荧光激发光谱与发射光谱之间有什么关系(分子荧光分析法) 激发光谱:荧光物质在不同波长的激发光作用下测得的某一波长处的荧光强度的变化情况。发射光谱:在某一固定波长的激发光作用下荧光强度在不同波长处的分布情况。
荧光分析的原理 使激发光的波长和强度保持不变,而让荧光物质所发生的荧光通过发射单色器照射于检测器上,调节发射单色器至各种不同波长处,由检测器测出相应的荧光强度,然后以荧光波长为横。
荧光光谱仪原理 荧光分析法的基本原理2113处于基态5261的被测物质的分子在吸收适当能量4102,如光、化学1653、物理能后,其共价电子从成键分子轨道或非键分子轨道跃迁到反键分子轨道上去,形成分子激发态。分子激发态不稳定,将很快衰变到基态。在分子激发态返回到基态的同时常伴随着光子的辐射。这种现象就是发光现象。荧光则属于分子的光致发光现象。二、荧光分光光度计的特点用荧光分析法分析的仪器,称荧光分光光度计。荧光分析法具有灵敏度高(比紫外、可见分光光度法高2~3个数量级),能提供激发光谱、发射光谱、发射强度、特征峰值等信息,在生物、环保、医学、药物、石油勘探等诸多领域都有广泛的应用。本仪器不仅能直接、间接地分析众多的有机化合物;另外,还可利用有机试剂间的反应,进行近70种无机元素的荧光分析。荧光的光谱特征是荧光光谱总是滞后于激发光谱即斯托克斯位移.三、荧光强度与物质浓度的关系1.对于某种荧光物质的稀溶液,在一定强度的激发光照射下,荧光物质的发射强度与入射光的强度以及检测器的放大倍数成正比,由光源发出的光经滤光片后成为单色光,样品在此单色光的照射下,产生荧光,荧光由大孔径非球面镜的聚光及光栅的分光后,照射于光电。