紫外分光光度法测维生素含量

维生素B1紫外分光光度法含量测定的验证 1 加标回收2 留样再测3 标物验证4 曲线中间点验证紫外-可见分光光度法测定 紫外分光光度法测定维生素C的含量 1 仪器与试剂UV-260紫外分光光度计，VitC对照品及VitC片（规格:50mg）均由河南某药厂提供，硫酸溶液（pH=6）。2 实验操作2.1 标准曲线的绘制 精密称取VitC对照品0.05g溶于100ml硫酸溶液，再稀释成一系列不同浓度的对照品溶液（0～14μg/ml），分别测出其吸光度。然后以浓度为横坐标，以相应的吸光度为纵坐标绘制出标准曲线。该曲线是经过原点的一条直线，可求出该曲线的斜率。2.2 样品测定 取VitC20片，精密称定，研细，精密称出适量（相当于VitC50mg），置于100ml量瓶中，加硫酸溶液溶解并稀释至刻度，滤过，精密量取续滤液2ml置于另一100ml量瓶中，加硫酸溶液稀释至刻度，测出其吸光度A 样。由标准曲线查出样品的浓度C 样品［3］。2.3 结果计算 根据精密称出的样品的质量、溶解及稀释的体积可求出C 样。VitC含量=C 样品/C 样 或VitC含量=A 样/K×C 样注:K为标准曲线的斜率。3 讨论维生素C的还原能力强而易被氧化，特别是在碱性溶液中更易被氧化。另外在碱性溶液或强酸性溶液中还能进一步发生水解。因此，选择硫酸溶液使成弱酸性。测定时溶液pH的选择:维生素C的紫外最大吸收波长与溶液的pH值有着密切关系。在pH=2.0时，溶液的最大吸收波长在245nm;在pH=12时，紫外分光光度法怎么计算，维生素C 的含量 先用标准溶液做标定曲线，然后再测未知溶液的吸收，对应到曲线上就行了紫外分光光度法怎么计算、维生素C 的含量 1.购买VC标准品,配制一系列一定浓度（被测试浓度左右）的标准溶液,测试它们的吸光度/透光率；2.将所得的数据计算得到一条标准曲线,可以通过EXCEL直接拟合；3.测试仪待测VC样品,通过标准曲线计算样品VC浓度.用紫外分光光度法测定维生素A含量时，为什么采用三点校正法 因为含维生2113素a原料中常常混有许多5261杂质，包括异构体，氧化降解产物，合成中间体4102，副产物等1653有关物质，且含有稀释用油，这些杂质在紫外区也有吸收，导致在维生素a最大吸收波长处测得的吸光度并不是维生素a独有的吸收，为了消除其他物质引起的误差，所以采用三点校正法。三点波长的选择原则：一点选在维生素a的最大吸收波长处，其他的两点各在这一波长两侧选一点。这两点有两种选择方法，第一种是等波长差法，即最大吸收波长为328nm，左侧一点为316nm，右侧一点为340nm.这是10版药典规定测定维生素a醋酸酯的方法。第二种方法是等吸收比法，即左右两波长处的吸光度相等等于最大吸收波长处吸光度的七分之六。10版药典规定测定维生素a醇时用此方法。三点校正紫外分光光度法测定维生素A含量的原理是什么? 因为含维生素A原料中常常2113混有许多杂质，包括异构5261体，氧化降解产物，合4102成中间体，副产物等有关1653物质，且含有稀释用油，这些杂质在紫外区也有吸收，导致在维生素A最大吸收波长处测得的吸光度并不是维生素A独有的吸收，为了消除其他物质引起的误差，所以采用三点校正法。三点波长的选择原则：一点选在维生素A的最大吸收波长处，其他的两点各在这一波长两侧选一点。这两点有两种选择方法，第一种是等波长差法，即最大吸收波长为328nm，左侧一点为316nm，右侧一点为340nm.这是10版药典规定测定维生素A醋酸酯的方法。第二种方法是等吸收比法，即左右两波长处的吸光度相等等于最大吸收波长处吸光度的七分之六。10版药典规定测定维生素A醇时用此方法。如何提高紫外分光光度法测定维生素b12的含量 所有的分光光度计的操作都差不多，就那几步：1.开机预热30分钟，以保证读数稳定，手动或软件将测量数值显示模式选为透射比或吸光度。2.如果测紫外光谱或紫外吸收度，手动紫外分光光度法测定维生素AD胶丸中维生素A的含量。求助，测出的吸收度比值计算吸光度的公式。 吸光度的计算公式的原理是朗伯-比尔定律A=lgI0/I=-lgT其中A为吸光率T为透光率I0为入射光强I为透过光强用紫外分光光度法测定维生素A含量时，为什么采用三点校正法 核酸、核苷酸及其衍物结构嘌呤、嘧啶碱基具共轭双健系统（－C＝CC＝C）,能够强烈吸收250~280nm 波紫外光.核酸（DNA,RNA）紫外吸收值260nm 处.遵照Lambert-Beer 定律,紫外光吸收值变化测定核酸物质含量.同pH 溶液嘌呤、嘧啶碱基互变异构情况同,紫外吸收光随表现明显差异,摩尔消光系数随同.所,测定核酸物质均应固定pH溶液进行.核酸摩尔消光系数（或吸收系数）,通ε（ρ）表示,即每升含摩尔核酸磷溶液260nm 波处消光值（即光密度,或称光吸收）.核酸摩尔消光系数数,依赖于材料前处理、溶液pH 离强度发变化.经典数值（pH=7.0）：DNA ε（ρ）=6 000 8 000RNA ε（ρ）=7 000 10 000牛胸腺DNA 钠盐溶液（pH=7.0）ε（ρ）=6 600,DNA 含磷量9.2%,含1μg/mL DNA 钠盐溶液光密度0.020.RNA 溶液（pH=7.0）ε（ρ）=7 700~7 800,RNA 含磷量9.5%,含1μg/mL RNA 溶液光密度0.022~0.024.采用紫外光光度测定核酸含量,通规定：260nm 波,浓度1μg/mL DNA 溶液其光密度0.020,浓度1μg/mL RNA 溶液其光密度0.024.,测定未知浓度DNA（RNA）溶液光密度OD260nm,即计算测其核酸含量.该简单、快速、灵敏度高,核酸3μg／mL 含量即测.于含微量蛋白质核苷酸等吸收紫外光物质核酸品,测定误差