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transwell细胞迁移问题 transwell接种细胞密度

2021-04-03知识14

如何用transwell进行细胞迁移实验 Transwell法的步骤:先把小室2113擦干净后在超净工作台照紫外过5261夜。如新的小室4102省略此步。下一步将小室倒1653扣并小室的底部外侧滴加0.1%(还是1%记不清了)的明胶室温放置20-30分钟。这是将细胞消化下来,调浓度。拿出24孔板加600ml的含有刺激因子的培养基。小室上还未干的明胶甩掉,加细胞放入24孔板里。放入细胞培养箱培养4-6小室。拿出小室甩掉里边的培养基。小心擦尽小室里边的细胞(不能碰外边)。将小室放入装有600ml结晶紫的24孔板染色1小时。移到空的24孔板后即可在显微镜下观察了。细胞迁移实验步骤(Neuroprobe的使用方法)1.膜预处理将48.5ml H2O+1.5ml 醋酸+150μL 鼠尾胶原置于50ml的离心管。在膜的粗糙面用铅笔做标记,放入上述溶液中4度过夜。实验前将膜取出,放入装有PBS的培养皿中漂洗一遍,再用饥饿培养基洗一遍,吸去培养基后加入新的饥饿培养基,放入37度培养箱中。2.处理细胞将细胞消化,调浓度1×105个/ml,细胞迁移装置下层加入166μl含有刺激因子的饥饿培养基。小心铺好膜(粗面朝下),装好塑料垫,固定上层装置。上层加入100μl细胞悬液,迁移4-6h。3.固定小心将膜取下来,在用PBS弄湿的滤纸上挂掉光滑面的细胞,在新的滤纸。

巨噬细胞的transwell实验上室放多少细胞 有21136well、12well、24well、96well,上室大小都不同.还有5261100mm培养皿的4102transwell,最大的嵌套膜生长面1653积是44cm2,你想好要回放多少再选型号呗答.按生长面积计算最多细胞数量

去文库,查看完整内容>;内容来自用户:renzhensheng79Transwell实验原理与操作步骤e69da5e887aa3231313335323631343130323136353331333433646431Trans-这个词根有转移、转运、穿过等意思,well有小室的意思,可以从字面上理解,这是一类有通透性的杯状的装置,根据Corning公司的Transwell说明书中的介绍,可以认为这是一种膜滤器(Membranefilters),也可认为是一种有通透性的支架(permeablesupports)。更准确地说,Transwell应该是一种实验技术,这项技术的主要材料是Transwell小室(Transwellchamber,Transwellinsert),其外形为一个可放置在孔板里的小杯子,不同厂家对Transwell会有不同的命名,而不同型号也可有不同形状,不同大小,根据实验需要,可有不同选择。但无论是何种外形,其关键部分都是一致的,那就是杯子底层的一张有通透性的膜,而杯子其余部分的材料与普通的孔板是一样。这层膜带有微孔,孔径大小有0.1-12.0μm,根据不同需要可用不同材料,一般常用的是聚碳酸酯膜(polycarbonatemembrane)。将Transwell小室放入培养板中,小室内称上室,培养板内称下室,上室内盛装上层培养液,下室内盛装下层培养液,上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔。我们将。

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