操做液相色谱时影响保留时间的变化的因素有哪些？ 影响液相色谱保留时间的因素：1、流动相的比例与极性。对于不同的柱子，分离度和保留时间往往都会有点差别，所以在操作的时候：a、可以适当调整流动相的比列，如甲醇—水。
高效液相色谱中的持留时间是什么意思？ 保留时间：是样品从进入色谱柱到流出色谱柱所需要的时间，不同的物质在不同的色谱柱上以不同的流动相洗脱会有不同的保留时间，因此保留时间是色谱分析法比较重要的参数之一.保留时间由物质在色谱中的分配系数决定：Rt=t0(1+KVs/Vm)式中Rt表示某物质的保留时间，t0是色谱系统的死时间，即流动相进入色谱柱到流出色谱柱的时间，这个时间由色谱柱的孔隙、流动相的流速等因素决定.K为分配系数，Vs，Vm表示固定相和流动相的体积.这个公式又叫做色谱过程方程，是色谱学最基本的公式之一.
凝胶色谱的分离效果与什么因素有关？凝胶色谱柱的高度？直径？如何影响？
[分析化学]影响色谱柱柱效的因素
气相色谱的死时间怎么测 可用苯、四氯乙烯或KNO3水溶液作探针测死时间。
求问如何精确测定死时间和死体积？ 一般情况下在流动相中不保留的成分，出来的第一个峰就是死时间。因此，死体积=死时间X流量。死时间(t0)是液相色32313133353236313431303231363533e58685e5aeb931333332636336谱中的重要参数，其值的精确测定对分离条件的优化和色谱热力学研究具有重要意义。在反相色谱中．固定相极性较弱．流动相一般为强极性的水、甲醇、乙腈等．故通常采用极性更强的NaNO3或NH4No3作为标记物，进行死时间的测定。但由于标记物与固定相之间，存在着一定的相互作用．因此测定结果会与真实死时间有一定的偏离。通常以NaNO3等强极性溶质进行反相液相色谱中死时间测定时，其与固定相之问极弱的相互作用可以忽略不计。这种方法得到的死时间可以进一步用于色谱保留机理的热力学研究和分离条件的优化。高效液相色谱中死时间是个非常重要的基础参数。在进行色谱条件优化及定性鉴定时都需要用到。液相色谱中的基本理论与气相色谱相同，但液相色谱系统与气相色谱系统却有很大差别 如液体的扩散系数和料颗粒的孔体积，也包括填料颗粒间的孔隙体积．故影响死时间的因素也比气相色谱复杂得多。在色谱中测定死时间通常有两种方法，一是用所谓的无保留的探测物如脲嘧啶、D2O、某些无机盐等直接测定。
衡量色谱柱柱效能的指标什么呢 衡量色谱柱效能2113的指标是有效5261理论塔板数n或者有效塔板高度H。柱性能指标包括4102在一定实验条件下（样品、流1653动相、流速、温度）下的柱压、理论塔板高度和塔板数、对称因子、容量因子和选择性因子的重复性，或分离度。一般说来容量因子和选择性因子的重复性在±5%或±10%以内。进行柱效比较时，还要注意柱外效应是否有变化。柱效受柱内外因素影响，为使色谱柱达到最佳效率，除柱外死体积要小外，还要有合理的柱结构（尽可能减少填充床以外的死体积）及装填技术。对于一般的分析只需5000塔板数的柱效；对于同系物分析，只要500即可；对于较难分离物质对则可采用高达2万的柱子，因此一般10~30cm左右的柱长就能满足复杂混合物分析的需要。在一般的液相色谱系统中，柱外效应对柱效的影响远远大于管壁效应。扩展资料（1）色谱柱中的管壁效应：即使最好的装填技术，在柱中心部位和沿管壁部位的填充情况总是不一样的，靠近管壁的部位比较疏松，易产生沟流，流速较快，影响冲洗剂的流形，使谱带加宽，这就是管壁效应。（2）色谱柱的构造：色谱柱由柱管、压帽、卡套（密封环）、筛板（滤片）、接头、螺丝等组成。柱管多用不锈钢制成，压力不高于70 kg/cm2 时，也。
