镀银法染色原理 1.镀银法染色(1)清洗玻片 选择光滑无裂痕的玻片,最好选用新的。为了避免玻片相互重叠,应将玻片插在专用金属架上,然后将玻片置洗衣粉过滤液中(洗衣粉煮沸后用滤纸过滤,以除去粗颗粒),煮沸20min。取出稍冷后用自来水冲洗、晾干,再放入浓洗液中浸泡5—6天,使用前取出玻片,用自来水冲去残酸,再用蒸e68a847a6431333239303262馏水洗。将水沥干后,放入95%乙醇中脱水。(2)菌液的制备及制片:菌龄较老的细菌容易失落鞭毛,所以在染色前应将待染细菌在新配制的半固体牛肉膏蛋白胨培养基斜面上(培养基表面湿润,斜面基部含有冷凝水)。用消过毒的盖玻片切取培养基边缘的小块琼脂放进试管中,注意要轻放并轻轻摇动,将该试管放在37℃恒温箱中静置10min(放置时间不宜太长,否则鞭毛会脱落),让幼龄菌的鞭毛松展开。然后,吸取少量菌液滴在洁净玻片的一端,立即将玻片倾斜,使菌液缓慢地流向另一端,用吸水纸吸去多余的菌液。涂片放空气中自然干燥。要注意的是菌液的含菌数量一定要少。干燥后的处理(1)干燥后用稀盐酸或稀氢氧化钠滴,并立即倾斜玻片,使酸(碱)液流下,并自然干燥.(2)用冲稀的头发顶型剂滴加,处理一到三分钟(具体的要实验才能知道),并自然干燥。.简述配制培养基应遵循的几个原则? 1.目的明确<;br>;培养不同的微生物必须采用不同的培养条件;培养目的不同,原料的选择和配比不同;例如枯草芽孢杆菌:一般培养:肉汤培养基或LB培养基;。细菌生长繁殖的条件有哪些 微生物培养基配制的最基本原则 在所2113有微生物培养基的配置过程中5261,都要按照“消毒严格、营养全面、湿度适4102中、1653PH值适宜”温度符合微生物生长的五项原则要求进行操作。一、为了防治其它微生物的滋生,要求培养基中无其它种类的活微生物或孢子,所以,必须对培养基进行严格消毒,通常是用足够的时间对培养基进行高温高压处理,彻底杀灭培养基中的各种其它微生物;二、培养基营养全面,包含各种必须营养元素或营养化合物;三、根据不同微生物的生物学特点,配置适宜湿度的培养基;四、根据不同微生物的生活需要,配置适宜的酸碱度的培养基;五、一切就绪后,最后要将培养基所处的环境温度控制在适合特定微生物生长的温度范围,然后再接种菌种或孢子等。在这五项基本原则中,第一项,严格消毒,是微生物培养基配置的最基本的原则。查氏培养基的基本原理 实验一 常用培养基的制备、灭菌与消毒一、实验目的了解培养基的配制原理;掌握配制培养基的一般方法和步骤;了解常见灭菌、清毒基本原理及方法;掌握干热天菌、高压蒸汽灭菌及过滤除菌的操作方法。二、实验原理培养基是人工按一定比例配制的供微生物生长繁殖和合成代谢产物所需要的营养物质的混合物。培养基的原材料可分为碳源、氮源、无机盐、生长因素和水。根据微生物的种类和实验目的不同,培养基也有不同的种类和配制方法。牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称为普通培养基。由于这种培养基中含有一般细胞生长繁殖所需要的最基本的营养物质,所以可供微生物生长繁殖之用。干热天菌、高压蒸汽灭菌方法主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生物的效果。三、试剂与器材1.器材 试管、三角瓶、烧杯、量筒、玻璃棒、培养基、分装器、天平、牛角匙、高压蒸汽灭菌锅、pH度纸、棉花、牛皮纸、记号笔、麻绳、纱布、吸管、培养皿、电烘箱、注射器、微孔滤膜过滤器、镊子等。2.试剂 牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂四、实验内容1.称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查2.干热灭菌:装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→。
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