pcr都需要什么原料 pcr需要的原料有2113：物(PCR引物为5261DNA片段，细胞内DNA复制的引物为一段RNA链）、酶、4102dNTP、模板和1653缓冲液。PCR是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链，低温（经常是60°C左右）时引物与单链按碱基互补配对的原则结合，再调温度至DNA聚合酶最适反应温度（72°C左右），DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。扩展资料：PCR反应特点：一、特异性强引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及TaqDNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合（复性）可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。二、纯度要求低不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活组织等DNA扩增检测。三、简便、快速PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。参考资料来源：—PCR
pcr扩增技术需要用什么酶？ Taq酶Taq酶是从水生栖热菌 Thermus Aquaticus（Taq）中分离出的具有热稳定性的DNA聚合酶。一般常用的Taq酶可以分为rTaq酶和LTaq酶两类，LTaq酶的保32313133353236313431303231363533e4b893e5b19e31333337373535真性更强，耐热性也比rTaq酶好。对于PCR的应用有里程碑的意义，PCR循环包括变性（90 °C左右）、退火（50°C左右）、延伸（70°C左右），每一步对温度的要求都不一样，多数酶在高温时即变性失活，然而该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活，所以不需要每个循环加酶，使PCR技术变得非常简捷。同时也大大降低了成本，PCR技术得以大量应用，并逐步应用于临床。在应用Taq DNA聚合酶进行PCR反应时，变性往往在94~95°C条件下进行，这也是Taq DNA 聚合酶进行30个或者30个以上PCR循环而活力不受到过多损失时所能耐受的最高温度。然而这种酶的保真度不高，因为这种酶的DNA聚合作用依赖于3'-5’校正。Taq酶在不同温度下的活性与一般酶不同，用Taq酶扩增DNA时常使片段3'端凸出一个A，应注意.这是因为TaqDNA聚合酶具有一种模板依赖的末端转移酶活性（延伸活性），导致扩增DNA片段在3'末端附加单个的未配对的核苷酸。
pcr变性退火延伸的定义 变性：在94°高温下模板DNA双链解旋为单链退火：引物与作为模板的单链DNA上特定部位配对结合延伸：单链上4种脱氧核苷酸按碱基互补配对原则连接在引物之后，使其延伸形成。
