紫外分光光度法的适用条件, 应用范围:①定量分析,广泛用于各种物料中微量、超微量和常量的无机和有机物质的测定.②定性和结构分析,紫外吸收光谱还可用于推断空间阻碍效应、氢键的强度、互变异构、几何异构现象等.③反应动力学研究,即研究反应.紫外可见分光光度计要在什么条件下使用 紫外可见分光光度计的具体使用方法 使用前仪器要调零、调百校准,参比溶液又称空白溶液.测量时用作比较的、不含被测物质但其基体尽可能与试样溶液相似的溶液.通常,用参比溶液扫描的曲线应是一条平坦的直线.有时,基体中虽不含被测物质,但含有别的物质,这.紫外分光光度计使用方法及原理 可见-紫外分光光度计的工作原理基于朗伯-比尔(Lambert-Beer)定律,即物质在一定浓度 的吸光度与它的吸收介质的厚度呈正比,其应用波长范围为200~400nm的紫外光区、400~850nm的可见光区。主要由辐射源(光源)、色散系统、检测系统、吸收池、数据处理机、自动记录器及显示器等部件组成。将分析样品和标准样品以相同浓度配制在同一溶剂中,在同一条件下分别测定紫外可见吸收光谱。若两者是同一物质,则两者的光谱图应完全一致。如果没有标样,也可以和现成的标 准谱图对照进行比较。这种方法要求仪器准确,精密度高,且测定条件要相同。实验证明,不同的极性溶剂产生氢键的强度也不同,这可以利用紫外光谱来判断化合物在不 同溶剂中氢键强度,以确定选择哪一种溶剂。紫外分光光度计的使用步骤是什么? 仪器名称:紫外/可见分光光度计系统使用方法:开机步骤1 开光谱仪电源2 开计算机电源3 在文件管理器中用鼠标指按UV WinLab图标,此时出现UV WinLab的应用窗口,仪器已准备好,可选用适当方法进行分析操作.2 方法:在分析中必须对分光光度计设定一些必要的参数,这些参数的组合就形成一个“方法”.Lambda系列UV WinLab软件预设四类常用方法.1)扫描(SCAN),用以进行光谱扫描.2)时间驱动(TIME DRIVER),用以观察一定时间内某种特定波长处纵坐标值的变化,如酶动力学.3)波长编程(WP)用以在多个波长下测定样品在一定时间内的纵坐标值变化,并可以计算这些纵坐标值的差或比值.4)浓度(CONC)用以建立标准曲线并测定浓度.2.1 进入所需方法,在方法窗口中选择所需方法的文件名.2.2 方法的设定2.2.1 扫描、波长编程及时间驱动各项方法可根据显示的参数表,逐项按需要选用或填入,并可参考提示.2.2.2 浓度浓度方法窗口下方标签较多,说明做浓度测定时需要参数较多.用鼠标指按每一标签,可翻出下页,其上有一些需要测定的参数.必须逐页设定.3 工具条3.1 SETUP当所需的各项参数都已在参数中设好后,必须用鼠标指按SETUP,才能将仪器调整到所设状态.3.2 AUTOZERO用鼠标指按此。
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