如何养293、293T系列的细胞? 将细胞培养瓶竖立放置,吸走培养基,如果培养基中的脱落细胞较多,说明细胞现在很容易脱落,只要加入1ml的PBS+EDTA(0.02%),来回轻微晃动培养瓶直到细胞完全脱落,加入10mlMEM,混匀,不能吹打,分装2瓶。如果细胞没长满就脱落,则只需加入5mlMEM,不分装。如果培养瓶中的细胞贴壁较牢固,培养基上清没有细胞脱落碎片,且细胞长满达到80%以上,吸走培养基,加入5ml的PBS+EDTA(0.02%),迅速轻微晃动,竖立培养瓶,吸走,加入1ml0.05%胰酶,37度消化不超过3min。扩展资料:注意事项:1、尽量用早期的细胞,传代太多状态不好,产毒也不好,贴壁困难。2、塑料的瓶子,DMEM+10%的小牛血清即可,要求并不高,ATCC上有详细的培养方法。3、主要是传代,胰酶消化点到即止,不能和其它成纤维细胞一样。4、细胞代数越高生长越快,同时性状和原代差别也更大。一般2-3天传代一次比较合适。5、传代时细胞密度在80%左右比较好,如果超过90%融合再传会影响细胞状态。参考资料来源:-293细胞
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