最详细：CRISPR-Cas9系统原理应用及发展 原发布者：pan2018babyCRISPR-Cas9系统基因修饰理论与实战1基因表达研究方法干扰基因表达（过表达或低表达），或者表达突变体并检测其相关生理功能，是基因功能研究中最重要的方式之一；基因表达技术-质粒转染，病毒转染等传统方法得到广泛运用，但同时其也存在缺点；1基因修饰的方法与各自优势质粒-瞬时转染-某些细胞效率偏低-表达结果不稳定，有内源表达的干扰；质粒-稳定细胞-表达结果不稳定，筛选效率不高，在重组插入基因组中可能干扰其它基因表达；病毒-瞬时感染-表达结果不稳定，质粒容易在细胞复制过程中丢失，随机插入基因组中可能会干扰其它基因表达；新一代的基因编辑技术-利用重组酶在基因组水平修饰基因，产生的遗传性质稳定，直接作用于内源，减少表达干扰，目前有成熟的技术如CRISPR/Cas9；DNA修复的机制与基因编辑原理NHEJandHDRDNA+donorDNADNAsequencedisruptedDNAsequencereplacedNHEJ：Non-homologousendjoiningHDR：homologydirectedrepair非同源性末端接合修复机制(Nonhomologousendjoining，NHEJ)同源介导的修复机制(Homologydirectedrepair，HDR)ZFN与TALEN基因编辑原理ZFNandTALEN5GenomeEditinginMammalianCellsI：GenomemodificationII：。
基因编辑crispr原理，优点及对生命科学发展的有什么意义 ZFNZFN，即锌指核糖核酸酶，由一个 DNA 识别域和一个非特异性核酸内切酶构成。DNA 识别域是由一系列 Cys2-His2锌指蛋白（zinc-fingers）串联组成（一般 3~4 个），每个锌指蛋白识别并结合一个特异的三联体碱基。锌指蛋白源自转录调控因子家族（transcription factor family），在真核生物中从酵母到人类广泛存在，形成alpha-beta-beta二级结构。其中alpha螺旋的16氨基酸残基决定锌指的DNA结合特异性，骨架结构保守。对决定DNA结合特异性的氨基酸引入序列的改变可以获得新的DNA结合特异性。多个锌指蛋白可以串联起来形成一个锌指蛋白组识别一段特异的碱基序列，具有很强的特异性和可塑性，很适合用于设计ZFNs。与锌指蛋白组相连的非特异性核酸内切酶来自FokI的C端的96个氨基酸残基组成的DNA剪切域(Kim et al.，1996)。FokI是来自海床黄杆菌的一种限制性内切酶，只在二聚体状态时才有酶切活性(Kim et al.，1994)，每个FokI单体与一个锌指蛋白组相连构成一个ZFN，识别特定的位点，当两个识别位点相距恰当的距离时（6~8 bp），两个单体ZFN相互作用产生酶切功能。从而达到 DNA 定点剪切的目的。TALENTALENs中文名是转录激活因子样效应物核酸酶，TALENs是一种可靶向修饰。
大范围核酸酶可用于基因组编辑吗 虽然CRISPR有许多优点。三种系统的比较 那么。三个其他的小组利用更系统的方法在人类细胞中评估了CRISPR的脱靶活性。。
基因疗法的原理是什么？ Mediated In Vivo Genome Editinghttps：//www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1525001618301102^ZFN-Mediated In Vivo Genome Editing Corrects Murine Hurler 。
中国现在在人类基因编辑到底走了多远？ 最近很火的一个是昆明的猴子胚胎编辑和广州黄军就教授的团队，坊间有留传中国至少在同时进行四个研究组，…
crispr系统中sgrna和grna一样吗 sgrna是single guide RNA（单导向RNA）的缩写。在CRISPR/Cas9系统中sgRNA与gRNA是一62616964757a686964616fe58685e5aeb931333433626536个概念。CRISPR（Clustered regularly interspaced short palindromic repeats）是原核生物基因组内的一段重复序列，是生命进化历史上，细菌和病毒进行斗争产生的免疫武器，简单说就是病毒能把自己的基因整合到细菌，利用细菌的细胞工具为自己的基因复制服务。细菌为了将病毒的外来入侵基因清除，进化出CRISPR-Cas9系统，利用这个系统，细菌可以不动声色地把病毒基因从自己的基因组上切除，这是细菌特有的免疫系统。扩展知识：功能特点：CRISPR是生物科学领域的游戏规则改变者，这种突破性的技术通过一种名叫Cas9的特殊编程的酶发现、切除并取代DNA的特定部分。这种技术的影响极其深远，从改变老鼠皮毛的颜色到设计不传播疟疾的蚊子和抗虫害作物，再到修正镰状细胞性贫血等各类遗传疾病等等。该技术具有非常精准、廉价、易于使用，并且非常强大的特点。CRISPR来自微生物的免疫系统，这种工程编辑系统利用一种酶，能把一段作为引导工具的小RNA切入DNA，就能在此处切断或做其他改变。以往研究表明，通过这些介入，CRISPR能使基因组。
「基因编辑」到底是什么，应当如何合理地应用这种技术？ 为了更好的理解基因编辑，我们先补充一些最基础的遗传学知识和背景。19世纪末，孟德尔对豌豆杂交试验的后…
crispr/cas9的技术优缺点 优点：使用方便，构建简单，可以覆盖大多数区域的基因编辑需求，成本低。缺点：质粒仍然较大，转染难度相对较大。具有碱基识别偏好性，局限了基因编辑的运用范围，而且会导致不同基因位点编辑效率不同。筛选仍然需要较大工作量。
韩春雨团队发现的 NgAgo 基因编辑技术有可能在将来取代 CRISPR 被广泛运用吗？ 1 DNA by gene editing：a proof-of-concept in vivo study展示了使用CRISPR技术清除体内HIV序列（http：//www. nature.com/gt/journal/v aop/ncurrent/full/gt201641a.html）。
基因敲除算不算转基因？ 蘑菇对于物理碰撞十分敏感，“一触式”采摘法和精心的包装，也可能激活那些加速蘑菇变质的酶。宾夕法尼亚大学伯克分校的杨亦农用CRISPR编辑敲除了导致褐变的多酚氧化酶（PPO）的基因家族中的一个，使这类酶的活性降低了30%。得到的抗褐变双孢菇（Agaricus bisporus）得到美国农业部的批准销售。美国农业部的审批程序表明，将不会对这种利用CRISPR-Cas9基因组编辑工具进行遗传修饰的蘑菇进行监管。这表明他们认为没有引进新基因，不算转基因作物。过去6年中，约有30个遗传修饰生物(GMO)成功绕过了美国农业部监管体系，杨教授的基因组编辑蘑菇只是其中之一。成功绕过美国农业部监管的遗传修饰植物中，有几种是通过基因组编辑技术得到的，比如锌指核酸酶(ZFN)和类转录激活因子效应物核酸酶(TALEN)系统。
