细胞实验中验证磷酸化的蛋白需要血清饥饿培养吗 细胞实验中验证磷酸化的蛋白是否需要血清饥饿培养首先要确定该细胞确实可以被诱导,即有其他的文献支持做一个无血清组一个含血清组,然后WB检测,看是否存在磷酸化的差异。如果无血清处理后磷酸化显著降低,则以后实验中可以采用无血清饥饿法预处理细胞。因为有的细胞即使在无血清的条件下也不会发生磷酸化的变化,因此这个预试验是很有必要的hela细胞中诱导自噬一般血清饥饿处理多久 1.Hela细胞本身自噬水平高,这和你们的细胞株本身的状态有关;自噬在不同类型的细胞中状态截然不同,一般情况下,要结合溶酶体抑制剂 lysosomalprotease inhibitors(pepstatin A and E64d),在不同时间段处理分析LCI/LCII转化情况;自噬的鉴定主要还是要联合多种方法一起进行,而且说实话是东说东的理论,西边说西边的理论,总的来说还是看你最后文章的整体水平的需要。2.LC3II免疫荧光是可行的,也有一些文献在做。相比于GFP-LC3稳定株或者病毒感染(当然瞬转的不评价)有一定鉴定优势,但是不能体现一种自噬流聚集的直观过程感受。为什么在处理细胞之前要让细胞饥饿一段时间 体外细胞无血清或低血清(血清饥饿法)培养主要有以下用途(转载,仅供参考):(1)使细胞周期同步化。该方法可将百细胞周期度阻滞在G0/G1期,在此基础上进行的后继处理及细胞周期变化分析,结果更有说服力。这也是细胞饥饿知法最主要和最常见的用途。在进行异种体细胞核移植重组胚胎前也要用该法使细胞处于休止的G0期。(2)无血清培养可使细胞处于饥饿状态,在加入药物后可更好的吸收药物,有助于药物作用的发挥。(3)血清可激活与细胞生长有关的信号通路(如MAPK)或诱导相关细胞因子的道分泌。在进行这些信号通路或细胞因子的相关研究时,也会用到血清饥饿法。(4)有研究表明无血清饥饿法可去除神回经组织培养中的成纤维细胞。该方法简捷、易操作,为神经组织培养中去成纤维细胞的一种好方法。(5)血清饥饿可答诱导人血管平滑肌细胞再分化。为什么总是感觉肚子饿? 之前明明已经吃很多东西了,也没有吃不够,但是总感觉还想吃多点东西。高糖无血清dmem做饥饿诱导自噬模型饥饿多久高糖的DMEM培养基含有葡萄糖4500mg/L,适合于生长较快,附着性较差的肿瘤细胞。低糖型为1000mg/L。做单抗细胞融合时,一般使用低糖,高糖使细胞生长过快,不利于融合细胞的染色体稳定。细胞稳定培养10代以上,就可以使用高糖DMEM进行培养。脂类代谢的具体过程 一、甘油三酯的合成代谢合成部位:肝、脂肪组织、小肠,其中肝的合成能力最强。合成原料:甘油、脂肪酸1、甘油一酯途径(小肠粘膜细胞)脂酰CoA转移酶 脂酰CoA转移酶2-甘油。如何辨别晕针与过敏性休克? 青霉素试敏,皮试几分钟后有明显的红晕,20分钟时红晕部分消退,然后进行肌肉注射试敏,几分钟后恶心,眼…为什么要饥饿细胞 你好啊~指的是诱导细胞同步化中的血清饥饿吗?知如果是,那么血清浓度降到一定时,细胞仅仅能存活而不能分裂,可以获得大量出于G1期的细胞,道达到细胞同步化的目的,再进行培养。这里引出内了另一个问题,为什么血清浓度降低会维持不了细胞分裂。先回答到这了吧,如果继续深入,可以查文献容。为什么细胞衰老时β-半乳糖苷酶活性会增加。(我要原理)谢谢 1995 年,Dimiri 等发现体外培养人二倍体成纤维细胞在 p H 为 6 时,其β 2 半乳糖苷酶染色的阳性率随代龄增加而增加,他们把这种中性β 2 半乳糖苷酶定义为衰老相关的β 2 半。
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