对于一段有重复序列的片段如何扩增，只是一个基因的中间的部分序列，准备扩增做overlap。 1.如果是非特异性扩增引起的无法扩增目的条带，那么可以提高退火温度，或者换酶，或者先切胶回收较浅的目的条带，再次扩增2.如果退火温度太高，可以用两步法扩增3.如果引物。
转化后的重组子进行PCR，扩增出来的是目的基因还是整个质粒？为什么DNA测序是在转化后才进行？
什么是PCR扩增技术 基因扩增技术（PCR）聚合酶链反应（polymerase chain reaction简称PCR）又称无细胞分子克隆系统或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增法，是基因扩增技术的一次重大革新.可将极微量的靶DNA特异地扩增上百万倍，从而大大提高对DNA分子的分析和检测能力，能检测单分子DNA或对每10万个细胞中仅含1个靶DNA分子的样品，因而此方法立即在分子生物学、微生物学、医学及遗传学等多领域广泛应用和迅速发展.由于PCR具有敏感性高、特异性强、快速、简便等优点，已在病原微生物学领域中显示出巨大的应用价值和广阔的发展前景.PCR扩增DNA的原理是：先将含有所需扩增分析序列的靶DNA双链经热变性处理解开为两个寡聚核苷酸单链，然后加入一对根据已知DNA序列由人工合成的与所扩增的DNA两端邻近序列互补的寡聚核苷酸片段作为引物，即左右引物.此引物范围就在包括所欲扩增的DNA片段，一般需20-30个碱基对，过少则难保持与DNA单链的结合.引物与互补DNA结合后，以靶DNA单链为模板，经反链杂交复性（退火），在Taq DNA聚合酶的作用下以4种三磷酸脱氧核苷（dNTP）为原料按5'到3'方向将引物延伸、自动合成新的DNA链、使DNA重新复制成双链.然后又开始第二次循环扩增.引物在反应中不仅起引导作用，而且起着特异性的。
利用pcr技术扩增目的基因，为什么是三次 PCR扩增就是循环步骤，一般进行20-40个循环。每次循环*2（不考虑扩增效率）。
400bp的基因具有多个重复序列，如何扩增 bp高度重复序列 为果蝇的一组转座成分，是foldback(折回)的缩写，全长500～5 000 bp，它的不同成员具有长.最末端的30bp高度保守，转座时，靶点序列产生9bp的倍生。已有证据。
