紫外分光光度法测溶液浓度? 1、280nm的光吸收法用标准曲线法进行测定。标准蛋白质溶液配制的浓度为1.0 mg/mL。常用的标准蛋白质为牛血清清蛋白(BSA)。2、280 nm和260 nm的吸收差法核酸对紫外光有很强的吸收,在280 nm处的吸收比蛋白质强10倍(每克),但核酸在260 nm处的吸收更强,其吸收高峰在260 nm附近。核酸260 nm处的消光系数是280 nm处的2倍;而蛋白质则相反,其280 nm的紫外吸收值大于260 nm的吸收值。3、215 nm与225 nm的吸收差法蛋白质的稀溶液由于含量低而不能使用280 nm的光吸收测定时,可用215nm与225 nm吸收值之差,通过标准曲线法来测定蛋白质稀溶液的浓度。4、肽键测定法蛋白质溶液在238 nm处的光吸收的强弱,与肽键的多少成正比。因此可以用标准蛋白质溶液配制一系列50~500 mg/mL已知浓度的5.0 mL蛋白质溶液,测定238 nm的光吸收值A238,以A238为纵坐标,蛋白质含量为横坐标,绘制出标准曲线。未知样品的浓度即可由标准曲线求得。扩展资料:紫外分光光度法原理光谱法(spectrometry)是基于物质与电磁辐射作用时,测量由物质内部发生量子化的能级之间的跃迁而产生的发射、吸收或散射辐射的波长和强度进行分析的方法。光谱法可分为发射光谱法、吸收光谱法、散射光谱法;或分为原子光谱法和。紫外分光光度计标准曲线如何绘制? 绘制标准曲线,需要标准浓度,标样加入溶剂里,而溶剂一般就是水,标样加入零,那就是对应水本身的吸光度在紫外分光光度法中吸收曲线和标准曲线有什么使用意义 定性鉴别:可以根据吸收光谱的形状、吸收峰数目、各吸收峰的波长位置、强度和相应的吸光系数值等,判断两种化合物是否相同或是与标准化合物的吸收光谱比较判断。定量鉴别:通过吸光光谱可找出最大吸收波长,再通过最大吸收波长处 吸光值的测定可定量计算该物质含量。饲料添加剂中苯甲酸通过紫外分光光度法标准曲线绘制应该怎么做? 绘制标准曲线的操作步骤按试样的测定步骤进行。取苯甲酸标准溶液50.0mL,置于250mL蒸馏瓶中,加人磷酸lmL、无水硫酸钠20g、水10mL、玻璃珠3粒进行蒸馏。。HJ970-2018紫外分光光度法 方法仪论证报告 工具/原料 紫外分光光度计(紫外测油仪) 全自动振荡萃取器 紫外测油仪专用正己烷 正己烷 标准溶液:1000mg/L石油类标准溶液 方法/步骤 方法概述: 根据HJ970-2018标准,在。什么是分光光度法的标准曲线?绘制标准曲线有什么意义? 分光光度法的标准曲线定义:标准曲线是直接用标准溶液制作的曲线,是用来描述被测物质的浓度(或含量)在分析仪器响应信号值之间定量关系的曲线。绘制标准曲线意义:绘制标准曲线的实用意义就是只要测得其吸光度值即可在标准曲线上查出相应的浓度值。物质与光作用,具有选择吸收的特性。有色物质的颜色是该物质与光作用产生的。即有色溶液所呈现的颜色是由于溶液中的物质对光的选择性吸收所致。由于不同的物质其分子结构不同,对不同波长光的吸收能力也不同,因此具有特征结构的结构集团,存在选择吸收特性的最大实收波长,形成最大吸收峰,而产生特有的吸收光谱。即使是相同的物质由于其含量不同,对光的吸收程度也不同。利用物质所特有的吸收光谱来鉴别物质的存在(定性分析),或利用物质对一定波长光的吸收程度来测定物质含量(定量分析)的方法,称为分光光度法。扩展资料分光光度法中标准曲线的影响因素1)分析法自身的精密度:如显色反应灵敏度不高时,被测物质低于某一浓度就不能显色,当显色溶液中的掩蔽剂或缓冲液能够络和少量被测离子,就会使标准曲线线性关系不好。如用铬酸钡分光光度法测定水中硫酸盐、用双硫腙分光光度法测水中锌时,在标准曲线的低。
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