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western blot和elisa用的二抗相同 为什么显色液不同 四甲基联苯胺显色产物

2021-03-20知识9

TMB是什么化学物质 四甲基联苯胺是一种化学物质,化学式是C16H20N2。中文名四甲基联苯胺英文名Tetramethylbenzidine别称3,3',5,5'-四甲基联苯胺化学式C16H20N2简介英文名称:。

,3'5,5'-四甲基联苯胺比色法 方法提要在pH>;2的酸性溶液中,余氯与3,3',5,5'-四甲基联苯胺(以下简称四甲基联苯胺)反应,生成黄色的醌式化合32313133353236313431303231363533e4b893e5b19e31333433616235物,用目视比色法定量。本法检测下限为0.005mg/L余氯。含量>;0.12mg/L铁和0.05mg/L亚硝酸盐对本法有干扰。试剂氯化钾-盐酸缓冲溶液(pH2.2)称取3.7g经100~110℃干燥至恒量的KCl,用纯水溶解,再加0.56mLHCl,并用纯水稀释至1000mL。3,3',5,5'-四甲基联苯胺溶液(0.3g/L)称取0.03g3,3',5,5'-四甲基联苯胺(C16H2ON2),用100mL0.1mol/LHCl分批加入并搅拌使试剂溶解(必要时可加温助溶),混匀,此溶液应无色透明、贮存于棕色瓶中,在常温下可保存6个月。重铬酸钾-铬酸钾溶液称取0.1550g经120℃干燥至恒量的重铬酸钾(K2Cr2O7)及0.4650g经120℃干燥至恒量的铬酸钾(K2CrO4),溶于KCl-HCl缓冲溶液中,稀释至1000mL。此溶液生成的颜色相当于1mg/L余氯与四甲基联苯胺生成的颜色。EDTA二钠盐溶液(20g/L)。余氯标准系列(0.005~1.00mg/L)按表81.4所列用量分别吸取K2Cr2O7-K2CrO4溶液,注入50mL具塞比色管中,用KCl-HCl缓冲溶液稀释至50mL,在冷暗处保存可使用6个月。表81.4 0.005~1.0mg/L余氯标准。

免疫印迹法区带显色常用的底物是() A.邻苯二胺 B.四甲基联苯胺 C.ABTS D 参考答案:E

western blot和elisa用的二抗相同 为什么显色液不同 其实都是HRP催化底物反应,与固相载体无关,他们在反应的整个过程都起到了相同的作用-供氢体HRP的催化反应需要底物过氧化氢(H2O2)和供氢体(DH2).供氢体多为无色的还原型染料,通过反应可生成有色的氧化型染料(D).酶促反应的过程如下:HRPDH2+H2O2─→D+2H2O目前用得较广泛和较满意的供氢体是:OPD(邻苯二胺)和TMB(四甲基联苯胺).DAB(3.3-二氨基联苯胺)的反应产物为不溶性沉淀物,并有电子密度,故适宜于做免疫酶染色或电镜观察.5AS(5-氨基水杨酸)早期曾用于ELISA,但其溶解度不够大,且空白孔不易控制到无色,现已很少应用.OT(邻联甲苯胺)的特点是能产生鲜艳的蓝绿色产物且灵敏度较高,但反应中受温度影响较大,而且由于产物不稳定,需要在短时间内进行测定.目前用得较广泛和较满意的供氢体是:OPD(邻苯二胺)和TMB(四甲基联苯胺).前者形成的产物为深桔黄色或棕色,后者产物为蓝绿色,二者的可溶性均好,在避光处颜色稳定,空白可近于无色,灵敏度上据报道后者比前者可高4倍以上.另外,还有一种供氢体称ABTS[2,2'-边氮基-双(3-乙基苯并噻吡咯啉-6磺酸)],其反应产物呈蓝绿色,且灵敏度和稳定性均好.尤其是在致癌的潜在可能性方面,ABTS与TMB皆是值得被优选的供氢体.

四甲基联苯胺的应用 TMB的反应产物为深蓝色,利于光镜观察,且反应产物越聚越大,常超出单个细胞器的范围(而DAB则被限制在其内),故TMB反应的检测阈较低。由于上述优点,目前TMB常用于光镜及超微结构水平的HRP及HRP-WGA神经投射的研究。需要注意的是:TMB显色液中的A液和B液应在2h内新鲜配制。另外,TMB是一种较强的皮肤刺激剂,并有致癌的潜在可能,故使用时应带手套及在通风条件下操作。TMB经HRP作用后共产物显蓝色,目视对比鲜明。TMB性质较稳定,可配成溶液试剂,只需与H2O2溶液混和即成应用液,可直接作底物使用。另外,TMB又有无致癌性等优点,因此在ELISA中应用日趋广泛。酶反应用HCL或H2SO4终止后,TMB产物由蓝色呈黄色,可在比色计中定量,最适吸收波长为450nm。ABTS虽不如OPD和TMB敏感,但空白值极低,也为一些试剂盒所采用

四甲基联苯胺的简介 英文名称:Tetramethylbenzidine 中文名称:3,3',5,5'-四甲基联苯胺 中文同义词:TMB溶液;TMB游离酸;四甲基联苯二胺;TMB游离酸溶液;钡硫氰酸盐三水合物;四甲基联苯胺,TMB;A B双液 TMB显色液;四甲基联苯胺盐酸盐 二水;3,3',5,5'-四甲基联苯胺;3,3,5,5-四甲基联苯胺溶液 CBNumber:CB6682185 分子式:C16H20N2 分子量:240.34

生物技术上的TMB什么意思 TBM(Tunnel TBM(Tunnel Boring Machine)TBM中文名为:全断面隧道掘进机,又称为全断面掘进机;也译作全断面(隧道)钻掘机,英文缩写为TBM,是专门用在开凿隧道的大型机。

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#四甲基联苯胺显色产物

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