凝胶法鲎试剂测内毒素 最低0.27元开通文库会员，查看完整内容>；原发布者：海骄子683凝胶法测内毒素1)实验原理：本法系利用鲎试剂来检测或量化由革兰阴性菌产生的细菌内毒素，以判断供试品中细菌内毒素的限量是否符合规定的一种方法。细菌内毒素检查包括两种方法，即凝胶法和光度测定法，后者包括浊度法和显色基质法。供试品检测时，可使用其中任何一种方法进行试验。当测定结果有争议时，除另有规定外，以凝胶法结果为准。内毒素的量用内毒素单位(EU)表示。细菌内毒素国家标准品系自大肠埃希菌提取精制而成。用于标定、复核、仲裁鲎试剂灵敏度和标定细菌内毒素工作标准品的效价。细菌内毒素工作标准品系以细菌内毒素国家标准品为基准标定其效价，用于试验中鲎试剂灵敏度复核、干扰试验及各种阳性对照。凝胶法细菌内毒素检查用水系指内毒素含量小于0.015EU/ml的灭菌注射用水。试验所用器皿需经处理，以除去可能存在的外源性内毒素，常用的方法是250℃干烤至少1小时，也可用其它确证不干扰细菌内毒素的适宜方法。若使用塑料器械，如微孔板和微量加样器配套的吸头等，应选用标明无内毒素并且对试验无干扰的器械。试验操作过程应防7a686964616fe4b893e5b19e31333433623830止微生物的污染。制备供试品需。
热原是什么 多少才正常 热原注入人体的注射剂中含有热原量达1μg/kg就可引起不良反应，发热反应通常在注入1小时后出现，可使人体产生发冷、寒颤。热原检测分析：http：//product.bio1000.com/114548/
以下有关细菌内毒素检查法的论述中，正确的是（） A.2000年版《中国药典》才将该方
鲎试剂的试剂分类 按原料来源分一种是由美洲鲎62616964757a686964616fe58685e5aeb931333361303036血液提取的称美洲鲎试剂(Limulus Amebocyte Lysate)，缩写为LAL，由美国生产；另一种是由东方鲎血液中提取的称东方鲎鲎试剂(Tachypleus Amebocyte Lysate)，缩写为TAL。TAL与LAL有相同的功效。按实验方法分细菌内毒素检查法包括两种方法，即凝胶法和光度测定法，后者又包括浊度法和显色基质法。则鲎试剂可分为：凝胶法鲎试剂、动态浊度法鲎试剂、终点浊度法鲎试剂、动态显色法鲎试剂和终点显色法鲎试剂。凝胶法鲎试剂通过与内毒素产生凝集反应的原理来定性检测或半定量内毒素的方法。动态浊度法鲎试剂、终点浊度法鲎试剂、动态显色法鲎试剂和终点显色法鲎试剂则都是定量检测内毒素的。按使用特点分普通鲎试剂 灵敏度0.5～0.125EU/ml，适用于仅需要检测内毒素限量的样品。高灵敏度鲎试剂 灵敏度0.06～0.015 EU/ml，适用于内毒素限量较低的样品细菌内毒素检查。特异性鲎试剂 灵敏度0.5～0.015EU/ml，适用于成分较为复杂，会对鲎试剂产生干扰的样品。定量法鲎试剂 最低检测限0.03～0.005 EU/ml，适用于需要对内毒素进行定量测定的样品。
细菌内毒素测定仪的细菌内毒素的检测 如自来水中含内毒素的量为1至100EU/ml。当内毒素通过消化道进入人体时并不产生危害，但内毒素通过注射等方式进入血液时则会引起不同的疾病。内毒素小量入血后被肝脏枯否细胞灭活，不造成机体损害。内毒素大量进入血液就会引起发热反应—“热原反应”。因此，生物制品类、注射用药剂、化学药品类、放射性药物、抗生素类、疫苗类、透析液等制剂以及医疗器材类（如一次性注射器，植入性生物材料）必须经过细菌内毒素检测试验合格后才能使用。由于家兔对热原的反应与人基本相似，所以半个世纪以来用家兔来检测热原，为保障药品质量和用药安全发挥了重要作用。1956年美国人Bang发现美洲鲎血液遇革兰氏阴性菌时会产生凝胶。其后Levin和Bang又搞清楚微量革兰氏阴性菌内毒素也可以引起凝胶反应，从而创立了鲎试剂检测法。由于鲎试剂法简单﹑快速﹑灵敏﹑准确，目前已广泛用于临床、制药工业药品检验等方面。在美国，鲎试验被称作为“细菌内毒素试验（Bacterial Endotoxin Test）收载于1980年20版美国药典。随后英、德、意、日以及中国相继在药典中收载了这一检查法。此后鲎试验逐渐替代家兔热原试验，但由于部分药品由于自身特殊性无法通过稀释法消除干扰，因此鲎试验还无法。
对药品进行细菌内毒素检验的意义是什么？细菌内毒素为外源性致热原，它可激活中性粒细胞等，使之释放出一种内源性热原质，作用于体温调节中枢引起发热。。
什么叫热原？热原的检查法有哪些 热原系指由微生物产生的能引起恒温动物体温异常升高的致热物质。主要是指细菌性热原，是某些细菌的代谢产物、细菌尸体及内毒素。热原的检查法包括家兔法，凝胶法和光度测定。
细菌内毒素检查方法 炎琥宁系穿心连提取物经酯化，脱水，成盐精制而成，偶见皮疹等过敏反应.所以对本品过敏的人不能用.另外，炎琥宁注射液需输注前新鲜配制.对胎盘绒毛滋养叶细胞有细胞毒(杀灭作用。
细菌内毒素检测方法，目前国内一个是凝胶法，另一个是光度法，多数是以光度法测定，可得到一个定量的结果，这样的结果也较可靠。内毒素很多人较陌生，甚至有些临床医生，。
细菌内毒素检查法(定量检测)之光度测定法 光度测定试验应在特定的仪器中进行，温度一般为37℃±1℃。为保证浊度和显色试验的有效性，应预先进行标准曲线的可靠性试验以及供试品溶液的干扰试验。当试验环境中发生了任何可能影响检测结果的改变时，试验的有效性应重新检测。标准曲线的可靠性试验标准曲线的制备 用标准内毒素配成溶液并制成至少3个浓度的稀释液（稀释度不得大于10），最低浓度不得低于所用鲎试剂的标示检测限。每一稀释步骤的混匀时间同凝胶法，每一浓度至少做3支平行管。同时要求做2支阴性对照。当阴性对照在设定的时间内不发生反应，将全部数据进行线性回归分析。根据线性回归分析，标准曲线的相关系数（r）的绝对值应该大于或等于0.980，试验方有效。否则须重新试验。干扰试验选择标准线中点或一个靠近中点的内毒素浓度。按表4制备溶液A、B、C和D。供试品和鲎试剂的加样量、供试品和鲎试剂的比例以及保温时间等，参照所用仪器和试剂的有关说明进行。每种溶液至少做2个平行管。表4 光度测定法干扰试验的制备编号 内毒素浓度 配制内毒素的溶液 平行管数A 无 供试品溶液 不少于2个B 标准曲线的中点（或附近点）的浓度（设为λm）供试品溶液 不少于2个C 至少3个浓度（最低一点设定为λ）。
