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生物技术药品分离纯化过程中内毒素的去除 分离,纯化生物大分子的依据是什么?其相应的方法和原理是什么

2020-07-24知识27

什么是生物亲和技术,有哪几种分离纯化方式,其优点是什么? 生物亲和就是指利用两种物质的高亲和性,例如抗体和抗原的特异识别,来纯化出你想要的物质,比如生物研究中常用的亲和层析,优点是特异性高,比凝胶过滤层析等层析方法特异性要好过程是让混合物经过一个柱子,从而达到分离纯化的目的,柱子里有一种物质,可以和混合物中的一种物质有特异性结合,从而结合到柱子固相上,其他杂质流走分离纯化微生物的方法有哪些?各方法适用分离什么菌种 主要有21131、稀释倒平板法首先把微生物悬液作5261一系列4102的稀释(如1:10、1:100、1:1000、1:10000),然后分别取1653不同稀释液少许,与已熔化并冷却至50℃左右的琼脂培养基混合,摇匀后,倾入灭过菌的培养皿中,待琼脂凝固后制成可能含菌的琼脂平板,保温培养一定时间即可出现菌落。如果稀释得当,在平板表面或琼脂培养基中就可出现分散的单个菌落,这个菌落可能就是由一个细菌细胞繁殖形成的。随后挑取该单个菌落,或重复以上操作数次,便可得到纯培养。2.、稀释涂布平板法将已熔化的培养基倒入无菌平皿,制成无菌平板,冷却凝固后,将一定量的微生物悬液滴加在平板表面,再用无菌玻璃涂棒将菌液均匀分散至整个平板表面,经培养后挑取单个菌落。3、平板划线法将微生物样品在固体培养基表面多次作“由点到线”稀释而达到分离。4、稀释摇管法先将一系列盛无菌琼脂培养基的试管加热使琼脂熔化后冷却并保持在50℃左右,将待分离的材料用这些试管进行梯度稀释,试管迅速摇动均匀,冷凝后,在琼脂柱表面倾倒一层灭菌液体石蜡和固体石蜡的混合物,将培养基和空气隔开。什么是生物分离与纯化技术 一、生物分离技术的基本含义 1、定义 生物分离技术是指从动植物与微生物的有机体或器官、生物工程 产物(发酵液、培养液)及其生物化学产品中提娶分离、纯化 有用物质的。蛋白质药物的分离纯化方法 蛋白质的分离纯化方法:一、根据蛋白质溶解度不同的分离方法1、蛋白质的盐析法:中性盐对蛋白质的溶解度有显著影响,一般在低盐浓度下随着盐浓度升高,蛋白质的溶解度增加,此称盐溶;当盐浓度继续升高时,蛋白质的溶解度不同程度下降并先后析出,这种现象称盐析。2、等电点沉淀法:蛋白质在静电状态时颗粒之间的静电斥力最小,因而溶解度也最小,各种蛋白质的等电点有差别,可利用调节溶液的pH达到某一蛋白质的等电点使之沉淀,但此法很少单独使用,可与盐析法结合用。3、低温有机溶剂沉淀法:用与水可混溶的有机溶剂,甲醇,乙醇或丙酮,可使多数蛋白质溶解度降低并析出,此法分辨力比盐析高,但蛋白质较易变性,应在低温下进行。二、根据蛋白质分子大小的差别的分离方法1、透析与超滤:透析法是利用半透膜将分子大小不同的蛋白质分开。超滤法是利用高压力或离心力,强使水和其他小的溶质分子通过半透膜,而蛋白质留在膜上,可选择不同孔径的泸膜截留不同分子量的蛋白质。2、凝胶过滤法:也称分子排阻层析或分子筛层析,这是根据分子大小分离蛋白质混合物最有效的方法之一。柱中最常用的填充材料是葡萄糖凝胶(Sephadex ged)和琼脂糖凝胶(agarose gel)。三、。分离,纯化生物大分子的依据是什么?其相应的方法和原理是什么 生物大分子的分离纯化方法多种多样,主要是利用它们之间特异性的差异,如分子的大小、形状、酸碱性、溶解性、溶解度、极性、电荷和与其他分子的亲和性等。? 各种方法的基本原理可以归纳为两个方面:? ①利用混合物中几个组分分配系数的差异,把它们分配到两个或几个相中,如盐析、有机溶剂沉淀、层析和结晶等;? ②将混合物置于某一物相(大多数是液相)中,通过物理力场的作用,使各组分分配于不同的区域,从而达到分离的目的,如电泳、离心、超滤等。? 目前纯化蛋白质等生物大分子的关键技术是电泳、层析和高速与超速离心。

#蛋白质结构#选择性培养基#固体培养基#亲和层析#微生物发酵

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