基因工程研究中需要哪几类酶，这些酶各有什么作用？ 用于基因工程的工具酶一，限制性内切酶(Endonucleosase)(一)限制性内切酶(Endonucleosase)的发现与分类1)50年代初发现细菌能将外来DNA片段在某些专一位点上切断，从而保证其不为外来噬菌体所感染，而其自身的染色体DNA由于被一种特殊的酶所修饰而得以保护，这种现象叫做限制-修饰，它们由三个基因位点所控制：hsd R，hsd M，hsd S，十年后，人们搞清了细菌的限制与修饰分子机理：hsd R-限制性内切酶hsd M-限制性甲基化酶hsd S-控制两个系统的表达1968年Smith等人从流感嗜血杆菌株中分离出两个类内切酶，Hind II和Hind III，为基因工程技术的诞生奠定了基础.截止到目前为止，已经分离出400余种II类酶，搞清识别位点的有300种，商品化的约有一百种，而实验室常用的有二十种.2)限制性核酸内切酶可分为三大类：I类 能识别专一的核苷酸顺序，并在识别点附近切割双链，但切割序列没有专一性.II类 识别位点(回文序列)严格专一，并在识别位点内将双链切断III类 识别位点严格专一(不是回文序列)，但切点不专一，往往不在识别位点内部.因此在基因工程中具有实用价值的是II类限制性内切酶.(二)II类限制性内切酶的命名及特性命名原则：取属名的第一个字母大写，取种名的前两个字母小写，构成基本名称。.
怎么区分限制性核酸内切酶，DNA连接酶，DNA聚合酶？ RNA聚合酶是怎么回事？ 谢谢！ 我们可以把DNA双链看成有好多对的人在排队，每个人一只32313133353236313431303231363533e78988e69d8331333262343762手拉着对面的人的一只手，拉着的手就是相对的互补的碱基之间连有的氢键（C和G之间有3个氢键，A和T之间有2个氢键)。另一只手拉着边上人的衣角，这只拉着的手就是相邻的核苷酸之间的磷酸二酯键。（或许记住这个场景可以帮你记DNA链的组成）限制性核酸内切酶和DNA连接酶是基因工程的三大关键工具之二，另一个就是运载体。限制性核酸内切酶，就是一把手术刀，有专一性（酶都有专一性），只识别特定碱基序列的部位（即对应切点）并断开某两个核苷酸之间的磷酸二酯键，把整条的链条分成两条（环形DNA链被酶切后的现象是变成链状DNA）。就是把队伍从中间某两个人之间分开，分成两个队伍。酶切后，会形成两种可能的情况—粘性末端和平末端，粘性末端就是切出来的两条链的切口是不平的，会有挂出来一截的。平末端就是切口是平整的，没有挂出来的一截。（这个很好区分的）DNA连接酶，就是缝合针线，也会识别特定的切点，并把切口处的磷酸二酯键重新建立。DNA聚合酶和RNA聚合酶，就是让人一个一个排进队里的酶。DNA聚合酶在DNA复制（是一种半保留复制）时，把。
关于DNA外切酶具有核酸外切酶活性的相关概念 DNA聚合酶具有两种活性，一个是聚合酶活性，5’—3’，意思是说在合成的单链或者引物链的3’加上与模板链互补的脱氧核苷酸此外，DNA聚合酶还有一个外切酶活性位点，用来校正剪切掉错误的脱氧核苷酸.这个活性是3’—5’方向，所以可以将新链3’端的错误配对脱氧核苷酸去掉.两个位点对于DNA的结合能力是不同的，正常情况（即配对正确）下，聚合酶位点的结合能力强，而外切酶位点结合能力弱，因此DNA聚合酶从5’向3’合成双链DNA；当合成时出现错配的情况，聚合酶位点与错配链的结合能力下降约100倍，而外切酶的结合能力不变，强于此时的聚合酶位点，所以DNA3’端移向外切酶位点，并剪切掉错误的配对；当错误配对被切掉后，相当于重新回到了正确配对的情况，故而聚合酶位点结合能力再次强于外切酶位点，DNA回到聚合酶位点，继续合成新链.这是由我们分子生物学的课程中学来的，我们使用的教材是《molecular biology of genes》，由发现DNA双螺旋的Waston主编如果你还是不懂，可以将邮箱发给我，我可以将我们上课的课件发给你
DNA聚合酶，连接酶，限制性内切酶各自参与的反应 DNA聚合酶好像是d复制后单链聚合成双链用的-连接酶是用来连接被限制性内切酶切开的单链的黏性末端-不是用来连接碱基的
RNA聚合酶的功能为（)。 A．具有核酸内切酶活性 B．催化与RNA聚合酶结合的DNA模板双链打开 C．催化磷酸二酯 BCE
DNA聚合酶I具有A．3'→5'内切酶活性B．3'→5'外切酶活性C．5'一3'聚合酶活性D．3'→5'聚合酶活性 正确答案：BC
限制性核酸内切酶与DNA聚合酶有什么区别 限制性核酸酶。这是一类能从DNA分子中间水解磷酸二酯键，从而切断双链DNA的核酸水解酶。http：//zhidao.baidu.com/question/17909783.html？si=1&wtp=wkDNA聚合酶的共同特点是：（1）需要提供合成模板；（2）不能起始新的DNA链，必须要有引物提供3'－OH；（3）合成的方向都是5'→3'（4）除聚合DNA外还有其它功能。
DNA连接酶与DNA聚合酶的区别？ DNA连接酶与2113DNA聚合酶有形成方式、模板和用途三个区5261别：1、形成方式不同DNA连接酶是4102在1653两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，不是在单个核苷酸与DNA片段之间形成磷酸二酯键。DNA连接酶都不能催化两条游离的DNA链相连接。DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的DNA片段上，形成磷酸二酯键。dna聚合酶起到催化剂的作用，催化原来的dna进行复制，然后将原来的dna和复制以后的dna进行模板配对后，连接聚合在一起，就可以形成新的dna链。2、模板不同DNA连接酶不需要模板，因为DNA连接酶是将DNA双链上的两个缺口同时连接起来。用DNA连接酶连接具互补粘性末端的DNA片段或是用T4DNA连接酶直接将平末端的DNA片段连接起来。DNA聚合酶是以一条DNA链为模板，将单个核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模板链互补的DNA链。DNA聚合酶的结构是三磷酸腺苷。3、用途不同DNA连接酶主要用于基因工程，将由限制性核酸内切酶“剪”出的粘性末端重新组合，故也称“基因针线”。如基因工程中，大肠杆菌连接酶连接黏性末端，T4连接酶既可连接黏性末端，又可连接平末端。DNA聚合酶在DNA复制中起做用，主要是连接DNA片段与单个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键。参考资料：-DNA连接。
什么是DNA聚合酶？ DNA聚合酶的种类很多，它们在细胞中的DNA复制过程中起着重要的作用。DNA聚合酶有DNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三类。基因工程中很多步骤都需要DNA聚合酶催化DNA体外合成反应，这些酶作用时大多都需要模板，合成产物的序列与模板互补。基因工程常用的DNA聚合酶有：①大肠杆菌聚合酶Ⅰ(全酶)；②大肠杆菌聚合酶Ⅰ大片段(Klenow片段)；③T4噬菌体DNA聚合酶；④T7噬菌体聚合酶及经修饰的T7噬菌体聚合酶(测序酶)，⑤耐热DNA聚合酶(TaqDNA聚合酶)；⑥末端转移酶(末端脱氧核苷酸转移酶，也属DNA聚合酶)；⑦逆转录酶(依赖于RNA的DNA聚合酶)。DNA聚合酶Ⅰ是基因工程中最常用的工具酶。DNA聚合酶Ⅱ是一条120kD的肽链，催化5′3′方向合成DNA，也具有3′5′外切酶活性但没有5′3′外切酶活性。可能在当细胞DNA受到化学或物理损伤时，DNA聚合酶Ⅱ在修复过程中起特殊作用。DNA聚合酶Ⅲ全酶是一种大于250kD，由多种亚基组成的蛋白质，它是不对称的二聚体，两个亚基可分别同时催化前导链(leadingstrand)及后随链的合成。DNA聚合Ⅲ与DNA聚合酶Ⅰ相同，也具有3′5′外切酶活性。在DNA聚合作用中，核苷酸添加的错误率达1/1000。由于DNA聚合酶Ⅰ和DNA聚合酶Ⅲ全酶的3′5′外切酶活性，可以终止。
DNA聚合酶I有哪些活性？ emphasis：role=italicE.coliemphasis：DNA聚合酶I为单链多肽，分子量109ku，有四种活性。（1）5′→3′DNA聚合酶活性：反应底物为单链DNA及引物（带3′-OH基）或5′突出的。
