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DNA聚合酶有核酸酶活性 在细胞中,核外有无参与DNA合成的酶,为什么

2021-03-18知识4

为什么DNA复制的保真度比RNA聚合酶的高

什么是DNA聚合酶? DNA聚合酶的种类很多,它们在细胞中的DNA复制过程中起着重要的作用。DNA聚合酶有DNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三类。基因工程中很多步骤都需要DNA聚合酶催化DNA体外合成反应,这些酶作用时大多都需要模板,合成产物的序列与模板互补。基因工程常用的DNA聚合酶有:①大肠杆菌聚合酶Ⅰ(全酶);②大肠杆菌聚合酶Ⅰ大片段(Klenow片段);③T4噬菌体DNA聚合酶;④T7噬菌体聚合酶及经修饰的T7噬菌体聚合酶(测序酶),⑤耐热DNA聚合酶(TaqDNA聚合酶);⑥末端转移酶(末端脱氧核苷酸转移酶,也属DNA聚合酶);⑦逆转录酶(依赖于RNA的DNA聚合酶)。DNA聚合酶Ⅰ是基因工程中最常用的工具酶。DNA聚合酶Ⅱ是一条120kD的肽链,催化5′3′方向合成DNA,也具有3′5′外切酶活性但没有5′3′外切酶活性。可能在当细胞DNA受到化学或物理损伤时,DNA聚合酶Ⅱ在修复过程中起特殊作用。DNA聚合酶Ⅲ全酶是一种大于250kD,由多种亚基组成的蛋白质,它是不对称的二聚体,两个亚基可分别同时催化前导链(leadingstrand)及后随链的合成。DNA聚合Ⅲ与DNA聚合酶Ⅰ相同,也具有3′5′外切酶活性。在DNA聚合作用中,核苷酸添加的错误率达1/1000。由于DNA聚合酶Ⅰ和DNA聚合酶Ⅲ全酶的3′5′外切酶活性,可以终止。

真核dna聚合酶有没有核酸酶活性

大肠杆菌中依赖于甲基化的限制系统有哪些?各有何特点?

在细胞中,核外有无参与DNA合成的酶,为什么 核外有参与DNA合成的酶。参与DNA合成主要的酶和蛋白质因子介绍如下:(1)DNA聚合酶:①原核细胞:以大肠杆菌为例,已发现DNA聚合酶Ⅰ,Ⅱ和Ⅲ,都是多功能酶,既有5'→3'。

基因工程研究中需要哪几类酶,这些酶各有什么作用? 用于基因工程的工具酶一,限制性内切酶(Endonucleosase)(一)限制性内切酶(Endonucleosase)的发现与分类1)50年代初发现细菌能将外来DNA片段在某些专一位点上切断,从而保证其不为外来噬菌体所感染,而其自身的染色体DNA由于被一种特殊的酶所修饰而得以保护,这种现象叫做限制-修饰,它们由三个基因位点所控制:hsd R,hsd M,hsd S,十年后,人们搞清了细菌的限制与修饰分子机理:hsd R-限制性内切酶hsd M-限制性甲基化酶hsd S-控制两个系统的表达1968年Smith等人从流感嗜血杆菌株中分离出两个类内切酶,Hind II和Hind III,为基因工程技术的诞生奠定了基础.截止到目前为止,已经分离出400余种II类酶,搞清识别位点的有300种,商品化的约有一百种,而实验室常用的有二十种.2)限制性核酸内切酶可分为三大类:I类 能识别专一的核苷酸顺序,并在识别点附近切割双链,但切割序列没有专一性.II类 识别位点(回文序列)严格专一,并在识别位点内将双链切断III类 识别位点严格专一(不是回文序列),但切点不专一,往往不在识别位点内部.因此在基因工程中具有实用价值的是II类限制性内切酶.(二)II类限制性内切酶的命名及特性命名原则:取属名的第一个字母大写,取种名的前两个字母小写,构成基本名称。.

做核酸检查可以报医保吗 DNA复制是指DNA双链在细胞分裂2113以前5261进行的复制过程,从一个原始DNA分子产生4102两个相同DNA分子的生物学1653过程。DNA复制是通过名为半保留复制的机制来得以顺利完成的。DNA复制发生在所有DNA为遗传物质的生物体中,是生物遗传的基础。中文名DNA复制外文名DNA replication过程引发、延伸、终止作用生物遗传的基础途径半保留复制快速导航DNA复制过程DNA复制的特点定义DNA复制是指DNA双链在细胞分裂以前的分裂间期S期进行的复制过程,复制的结果是一条双链变成两条一样的双链,每条双链都与原来的双链一样。这个过程通过边解旋边复制和半保留复制机制得以顺利完成。DNA复制DNA复制过程DNA复制主要包括引发、延伸、终止三个阶段[1]。以原核生物DNA复制过程予以简要说明。引发DNA复制始于基因组中的特定位置(复制起点),即启动蛋白的靶标位点[2]。启动蛋白识别“富含AT”(富含腺嘌呤和胸腺嘧啶碱基)的序列,因为AT碱基对具有两个氢键(而不是CG对中形成的三个),因此更易于DNA双链的分离。一旦复制起点被识别,启动蛋白就会募集其他蛋白质一起形成前复制复合物,从而解开双链DNA,形成复制叉。复制叉的形成是多种蛋白质及酶参与的较复杂的。

关于DNA外切酶具有核酸外切酶活性的相关概念 DNA聚合酶具有两种活性,一个是聚合酶活性,5’—3’,意思是说在合成的单链或者引物链的3’加上与模板链互补的脱氧核苷酸此外,DNA聚合酶还有一个外切酶活性位点,用来校正剪切掉错误的脱氧核苷酸.这个活性是3’—5’方向,所以可以将新链3’端的错误配对脱氧核苷酸去掉.两个位点对于DNA的结合能力是不同的,正常情况(即配对正确)下,聚合酶位点的结合能力强,而外切酶位点结合能力弱,因此DNA聚合酶从5’向3’合成双链DNA;当合成时出现错配的情况,聚合酶位点与错配链的结合能力下降约100倍,而外切酶的结合能力不变,强于此时的聚合酶位点,所以DNA3’端移向外切酶位点,并剪切掉错误的配对;当错误配对被切掉后,相当于重新回到了正确配对的情况,故而聚合酶位点结合能力再次强于外切酶位点,DNA回到聚合酶位点,继续合成新链.这是由我们分子生物学的课程中学来的,我们使用的教材是《molecular biology of genes》,由发现DNA双螺旋的Waston主编如果你还是不懂,可以将邮箱发给我,我可以将我们上课的课件发给你

DNA聚合酶I有哪些活性? emphasis:role=italicE.coliemphasis:DNA聚合酶I为单链多肽,分子量109ku,有四种活性。(1)5′→3′DNA聚合酶活性:反应底物为单链DNA及引物(带3′-OH基)或5′突出的。

#DNA聚合酶有核酸酶活性

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