PCR仪如何设置温度梯度？就是不同的孔有不同的温度，具体怎么操作。Bio-Rad,DNA Engine Dyad pcr仪梯度是怎么控制温度的

eppendorf 梯度pcr仪 梯度怎 么编程，想同时跑2个退火温度，不知道怎么编程？ 我只用过博日科技的，设一个高的退火温度，设一个低的退火温度，然后会自动计算出中间每排孔的退火温度，你只要用最低和最高的那两个就够了。可以打EPPENDORF的技术支持。BIORAD PCR仪 A到H梯度温度 1，BIAORAD 可以进行梯度PCR的主要是S1000和C1000两个型号，这两个型号的PCR仪梯度PCR程序都是从A到H共8个梯度降低温度的。其梯度模块还能同时进行8个不同退火温度的PCR反应，在梯度模块上，可实现对梯度温度和梯度宽度等参数的调整，自由编程温度，梯度实现不同样品的退火温度并同时进行热循环。2，由于进行梯度PCR时，是在同一个热盖下反应，A到H间的温度不是梯度递减 的，在设置时一般只设置A于H的温度，中间的温度是仪器自己生成的。如何设置梯度PCR，对PCR条件进行进一步的优化调整 打开PCR仪，再找到一个普通PCR程序，以备改动（也可以自行重新编辑） 2 按enter键打开PCR普通程序，按”编辑“进入程序。请教梯度PCR设置梯度问题 在三步法PCR中，变性温度通常设为94℃，也有98℃，温度和时间可以参考PCR酶的说明书；延伸温度通常设为72℃，时间根据酶的扩增效率和目的基因的长度来确定；这两个温度对PCR的影响不是关键的。但退火温度的改变会对PCR产生很大的影响，所以梯度PCR主要是针对退火温度而设计的。在同样的PCR反应体系下，设置的梯度温度为引物Tm值附近的温度范围，比较哪一个退火温度能扩增出目的条带。反应管的放置由PCR仪的设置决定，我所使用的梯度PCR 仪是48孔的模块，一横排一个温度，最多可设8个不同退火温度，放反应管的地方里面的温度最高，外面温度最低；如果是96孔的模块，最多可设12个不同退火温度，具体你要看说明书对于仪器的详细说明。PCR反应温度怎么设置？ 在pcr反应过程中，要使用三个不同的温度变化，有变性，退火，扩增三个不同的反应阶段，而这三个反应需要的最适温度不同。具体设置如下：1、变性反应温度的设置当温度控制在90 °C以上时DNA会发生变性，双链DNA解链成单链。2、退火反应温度的设置当温度下降到50 °C的时候，DNA复性，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合。3、扩增反应温度的设置当温度上升到72 °C左右时延伸，DNA 聚合酶在此时有最大活性，能够催化4 种脱氧核苷酸合成新的DNA链。扩展资料：PCR温度与时间的设置：基于PCR原理三步骤而设置变性-退火-延伸三个温度点。在标准反应中采用三温度点法，双链DNA在90～95℃变性，再迅速冷却至40～60℃，引物退火并结合到靶序列上，然后快速升温至70～75℃，在Taq DNA聚合酶的作用下，使引物链沿模板延伸。对于较短靶基因（长度为100～300bp时）可采用二温度点法，除变性温度外、退火与延伸温度可合二为一，一般采用94℃变性，65℃左右退火与延伸（此温度Taq DNA酶仍有较高的催化活性）。复性的温度 PCR 扩增是否顺利的关键因素，通常在50-60℃之间。具体的温度主要由引物的Tm值决定。延伸温度绝大多数设定为72℃。如果复性的温度很高，可以将。温度梯度pcr怎么做？ 温度梯度pcr一般主要是指退火温度梯度.如果PCR仪支持的话，一次可以做好几个温度梯度，象AIB的可以做六个，而有些公司的是模仿梯度，比如一边高一边低，这样梯度温度可能误差大一点.如果仪器不支持，可能就麻烦了，想做六个温度就得做六次PCR了.每一次设成不同的温度.温度梯度PCR仪和降落PCR区别大吗 梯度pcr仪就是可以2113允许用户在退火步5261骤时选择同时进行不同的退火温度以筛选最佳退4102火温度.以wealtec的SEDI G为例，96孔控温模1653块按照8x12排布，解链步骤设置完后，设置退火步骤时，可以选择“梯度步骤”，此时程序会允许你设置梯度温控范围，让12个纵列孔位在此步骤时以不同温度运行.之所以pcr仪有这种功能有两个原因：1.我们本来就不知道哪个退火温度最好 2.同一品牌同一型号的不同pcr仪之间温控也有误差，一个pcr仪上的退火温度用到另一个上面效果就又变了，也需要筛选.

#pcr仪#梯度下降#pcr#梯度#dna