平板划线法的步骤 1．融2113化培养基：牛肉膏蛋白胨琼脂5261培养基放入水浴中加热至4102融化。2．倒平板：待培养基冷却1653至50℃左右，按无菌操作法倒2只平板(每皿约15m1)，平置，待凝固。倒平板的方法：右手持盛培养基的试管或三角瓶置火焰旁边，用左手将试管塞或瓶塞轻轻地拨出，试管或瓶口保持对着火焰；然后用右手手掌边缘或小指与无名指夹住管(瓶)塞(也可将试管塞或瓶塞放在左手边缘或小指与无名指之间夹住。如果试管内或三角瓶内的培养基一次用完，管塞或瓶塞则不必夹在手中)。左手拿培养皿并将皿盖在火焰附近打开一缝，迅速例入培养基约15m1，加盖后轻轻摇动培养皿，使培养基均匀分布在培养皿底部，然后平置于桌面上，待凝后即为平板。3．作分区标记在皿底将整个平板划分成A、B、C、D四个面积不等的区域。各区之间的交角应为120℃左右（平板转动一定角度约60℃），以便充分利用整个平板的面积，而且采用这种分区法可使D区与A区划出的线条相平行，并可避免此两区线条相接触。4．划线操作(1)挑取他含菌样品：选用平整、圆滑的接种环，按无菌操作法挑取少量菌种。(2)划A区：将平板倒置于煤气（酒精）灯旁，左手拿出皿底并尽量使平板垂直于桌面，有培养基一面向着煤气灯(这时皿盖。
关于接种大肠杆菌的问题， 对 沾过菌液后，就在培养基表面划~他也是说的理想状态~这个实验的目的就是让在表面接纯种，让学生清楚看到大肠菌群的菌落形态而已~划破了也能看到~但你也不用抱着破坏培养基的心态去做这实验~小点劲儿咱不吃亏~ps 这实.
C．平板划线法是微生物接种的唯一方法 A、不同种类细菌的生长所需要的碳源不同，自养型细菌不需要有机碳，异养型细菌需要有机碳；A错误．B、分离菌种获得单菌落所用的培养基是固体培养基；B错误．C、微生物的接种方法有涂布平板法、平板划线接种法、斜面接种法、倾注培养法、穿刺接种法、液体接种法等；C错误．D、实验室常用的灭菌方法有高压蒸汽灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌；D正确．故应选D．
为什么培养微生物接种时不能划破培养基 因为培养基上面有培养微生物需要的各种营养物质，这个是按照一定的严格比例配置好的.接种针在划破培养基后，培养基的营养成分将会发生改变，此时培养微生物的结果也失去了准确性.得出的数据和结论将会严重影响实验结果.
用琼脂平板划线法分离细菌，培养后如何识别是你接种的，还是操作时杂菌污染？ 你划板抄的时候操作需要规范，有条件的bai应该在du洁净台操作，同时应注意穿实验服和戴zhi口罩。dao避免污染源。操作时污染的菌一般会单独生长，且数量很少。你接种的菌在平板上会有很多菌落且排列较规则。一般都会生长在你的划痕上。根据你接种菌的形态特征来进行分辨。
