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紫外分光光度法优缺点 紫外分光光度法测黄酮的优缺点

2021-03-11知识2

为什么分光光度法能够测定某一种黄酮的量吗 只要是有颜2113色变化的,吸收特征峰5261和最大峰明显的。4102都可以用分光光度法来1653检测其含量。具体是用朗伯-比尔定律(Beer-Lambert Law)也叫布格-朗伯-比尔定律,是光吸收的基本定律,适用于所有的电磁辐射和所有的吸光物质,包括气体、固体、液体、分子、原子和离子。比尔-朗伯定律是吸光光度法、比色分析法和光电比色法的定量基础。光被吸收的量正比于光程中产生光吸收的分子数目。数学表达式[1]A=lg(1/T)=KbcA为吸光度,T为透射比(透光度),是出射光强度(I)比入射光强度(I0).K为摩尔吸收系数.它与吸收物质的性质及入射光的波长λ有关.c为吸光物质的浓度,b为吸收层厚度.【b也常用L替换,含义一致】物理意义物理意义是当一束平行单色光垂直通过某一均匀非散射的吸光物质时,其吸光度A与吸光物质的浓度c及吸收层厚度b成正比,而透光度T与c、b成反比。希望对你有用。祝福开心!

紫外分光光度法优缺点 紫外分光光度法测黄酮的优缺点

紫外可见分光光度法测黄酮吸光度数值可以大于1吗 吸光度A一般在0.1–1,测量误差才回减少

分光光度法和紫外分光光度法有何区别? 分光光度法是通过2113测定被测物质在特定波长处或5261一定波长范围内的光吸收度4102,对该物质1653进行定性和定量分析的方法。1.基本原理 单色光辐射穿过被测物质溶液时,被该物质吸收的量与该物质的浓度和液层的厚度(光路长度)成正比,即朗伯-比尔定律,这是吸收光谱法定量的理论依据,其关系式如式 3-1:A=ECL 式(3-1)式中A 为吸收度;E 为吸收系数,即单位浓度、单位液层厚度的吸收度数值;C 为溶液浓度;L 为液层厚度。紫外-可见分光光度法是根据物质分子对波长为 200~760nm 这一范围的电磁波的吸收特性所建立的光谱分析方法。《中国药典》(2005 年版)有 10 种药材用该法进行药材的有效性评价。其主要特点为:灵敏度高,可达 10-4 g/ml~10-7 g/ml;准确度高,相对误差为 2%~5%。中药中有紫外吸收的成分或本身有颜色的成分,在一定的浓度范围内,其溶液的吸收度与浓度符合朗伯-比尔定律,均可用此法进行分析。本法适于大类成分的含量测定,如总黄酮、总蒽醌、总生物碱等。2.定量测定法 测定时,应以配制供试品溶液的同批溶剂为空白对照,采用 1cm 的石英吸收池,在选(规)定的吸收峰波长±2nm 以内测试几个点的吸光度,或由仪器在选定波长附近自动扫描测定,。

总黄酮含量的测定方法,如紫外可见分光光度法 高效液相色谱法,方法的类容详细点 流动性影响出峰时间、分离度、理论塔板数等,不影响峰面积。流动相影响总黄酮的保留时间,根据不同的大小,可能提前也可能推后;也影响分离度。

紫外分光光度法测定黄酮类光谱时为何要用甲醇做溶剂?哪位大侠知道,还请不吝赐教啊。

紫外分光光度法测定黄酮时,使用芦丁作为标准品,与用槲皮素作为标准品,做标准曲线时,有何不同?在线等 零点不一样。斜率是一样的。

影响紫外分光光度法测定准确性的因素有哪些? 1.仪器是否工作正常(光源灯老化,电压不稳定,集成电路板、显示器有毛病,波长调节器有毛病等等)2.标准溶液浓度是否准确3.所用方法是否合理(你选用的标准方法是否符合你要测定的对象—被测定浓度范围,干扰情况,赋存状态等等)4.所用试剂是否符合要求(纯度、干扰情况)5.所用量器(天平、容量瓶、移液管等)是否存在系统误差6.配置显色过程是否误操作(加入试剂顺序、加入量等)7.显色时间、显色温度是否符合要求8.样品槽是否洁净9.测试吸光度范围是否在0.2-0.8之间除此之外,数据处理也会带来误差。最好采用标准系列法,平行多次测定,计算机程序绘图,计算机计算每侧测定结果并求出平均值,按误差理论对数据进行处理,最后给出结果。

紫外分光光度法优缺点 优点是1灵敏度高2仪器设备简单,操作简便、快速3应用广泛缺点是准确度相对不高

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