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紫外分光光度法测的最小含量 紫外可见分光光度法定量检测样品的一般流程是什么?

2021-03-09知识19

如何用紫外分光光度计测DNA浓度 首先,分光光度计测量的样品必须是均一的,摇匀后再测量结果会准确些。它是利用62616964757a686964616fe59b9ee7ad9431333363393636分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器。核酸的定量是分光光度计使用频率最高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链、双链DNA,以及RNA。核酸的最高吸收峰的吸收波长260 nm。每种核酸的分子构成不一,因此其换算系数不同。定量不同类型的核酸,事先要选择对应的系数。如:1OD 的吸光值分别相当于50μg/ml的dsDNA,37μg/ml的ssDNA,40μg/ml的RNA,30μg/ml的Olig。测试后的吸光值经过上述系数的换算,从而得出相应的样品浓度。测试前,选择正确的程序,输入原液和稀释液的体积,尔后测试空白液和样品液。然而,实验并非一帆风顺。读数不稳定可能是实验者最头痛的问题。灵敏度越高的仪器,表现出的吸光值漂移越大。事实上,分光光度计的设计原理和工作原理,允许吸光值在一定范围内变化,即仪器有一定的准确度和精确度。如Eppendorf Biophotometer的准确度≤1.0%(1A)。这样多次测试的结果在均值1.0%左右之间变动,都是正常的。另外,还需考虑核酸本身物化性质和溶解核酸的缓冲液的pH值,离子浓度等:在测试时,离子浓度太高,也。

紫外分光光度计使用中的一些问题 可以查数据,或者自己调节波长,到了特定波长时,吸光度会有很大变化

紫外可见分光光度法定量检测样品的一般流程是什么? 1、检查仪器2113;2、预热,同时配制待测样品对应的5261标准样(一般4102用高纯度试剂配制);3、待测样1653预处理;4、先根据国标或推荐检测方法测标准样的吸光度,然后测待测样的吸光度;5、用标准样得到的吸光度值做标准曲线,至少5个点(也就是说需要5个不同的标准溶液),然后把待测样得到的吸光度值拿去跟标准曲线对比(做辅助线)得到浓度值,或者把吸光度值带入到标准曲线的回归方程中,直接求出浓度值。补充一下:如果未知样不知道最大波长,需要先进行波长扫描,找到吸光度最大时对应的波长。

紫外分光光度计能测的最小浓度屁多少 要看你测什么物质啊,每样物质都不同的,一般的0.02mg/l一下就不准了。

紫外分光光度法测的最小含量 紫外可见分光光度法定量检测样品的一般流程是什么?

紫外_可见分光光度法,用吸收系数法定量,公式是什么? A=ECL C=A/ELA为吸收度;T为透光率2113;E为吸收系数,采5261用的表示方法是(4102E1%1cm),其物理意义为当溶1653液浓度为1%(g/ml),液层厚度为1cm时的吸收度数值;C为100ml溶液中所含被测物质的重量(按干燥品或无水物计算),g;L为液层厚度,cm。紫外-可见分光光度法是在190~800nm波长范围内测定物质的吸光度,用于鉴别、杂质检查和定量测定的方法。当光穿过被测物质溶液时,物质对光的吸收程度随光的波长不同而变化。因此,通过测定物质在不同波长处的吸光度,并绘制其吸光度与波长的关系图即得被测物质的吸收光谱。从吸收光谱中,可以确定最大吸收波长λmax和最小吸收波长λmin。物质的吸收光谱具有与其结构相关的特征性。因此,可以通过特定波长范围内样品的光谱与对照光谱或对照品光谱的比较,或通过确定最大吸收波长,或通过测量两个特定波长处的吸收比值而鉴别物质。用于定量时,在最大吸收波长处测量一定浓度样品溶液的吸光度,并与一定浓度的对照溶液的吸光度进行比较或采用吸收系数法求算出样品溶液的浓度。原理可见光、紫外线照射某些物质,主要是由于物质分子中价电子能级跃迁对辐射的吸收,而产生化合物的可见紫外吸收光谱。基于物质对光的选择。

#紫外分光光度法测的最小含量

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