在紫外可见分光光度法的定量分析中误差来源有几个方面？如何避免？ 紫外—可见分光光度分析法一、基本要求掌握：本章要求掌握分光光度法的特点、基本原理、测定方法及计算方法；分子吸收光谱与电子跃迁类型，物质对光的选择吸收与吸收光谱曲线，摩尔吸收系数与吸收系数，吸光度与透光度，偏离朗伯-比尔定律的原因；掌握显色反应条件及光度测量条件的选择；掌握紫外—可见分光光度计的主要部件，各部件的作用及仪器原理，主要类型及特点；掌握差示分光光度法的原理、特点.理物质分子结构与紫外吸收光谱的关系，吸收波长位移与分子结构变化的关系；紫外—可见分光光度定量分析影响结果准确度的各种因素.了了解紫外—可见分光光度法测定灵敏度和选择性的途径；双波长分光光度法等其它分光光度法定量测定的方法；紫外—可见分光光度法在有机化合物的结构解析方面的作用及在其他方面的应用.二、基本概念与重点内容A概述1．紫外—可见分光光度法的特点灵敏度与准确度较高；选择性较好；设备简单、操作简便.2．分光光度法的发展过程目视比色法 光电比色法 分光光度法3．分子的紫外—可见吸收光谱分子的紫外—可见吸收光谱是基于物质分子吸收紫外辐射或可见光，其外层电子跃迁而成，又称分子的电子跃迁光谱.紫外—可见分光光度法是基于物质分子的。
用于紫外吸收分光光度法的分析波长应如何确定，需要满足什么条件？ 光说和杜森的确定需要满足，当然是根据它的提示来
求紫外分光光度计的校正步骤 紫外分光光度计的校正方法：分光光度法的最重要的一个物理化学量是吸光度。为了获得准确e69da5e887aa62616964757a686964616f31333431366334的研究结果，准确测得样品溶液的吸光度是非常重要的。一般，分析结果的不可靠性与偶然误差和系统误差有关。偶然误差影响测量的精密度，可通过足够数量测量的统计处理来减少；系统误差影响测量结果的准确度，可在大体相同实验条件下，用比较一种物质的准确测量结果，使系统误差统一起来。而分光光度计的系统误差(波长校正、分光光度计的慢散光、放大器的线性响应、暗电流和比色皿的光程)和操作误差(温度改变、仪器读数、操作者的改变、使用物质的纯度、称量和浓度、pH)对测量吸光度的影响是可以检查和校正的。关于操作误差，多数情况下，通过严格按操作程序测量、仪器调零、准确称量等来控制或减少这种误差的产生。关于仪器的系统误差，可通过对分光光度计的定期校正来克服，若所需准确度很高的测量，则必须天天校正。扩展资料紫外分光光度计主要应用1、鉴定物质根据吸收光谱图上的一些特征吸收，特别是最大吸收波长λmax和摩尔吸收系数ε是检定物质的常用物理参数。这在药物分析上就有着很广泛的应用。在国内外的药典中，已。
紫外分光光度法中各定量方法有何优缺点
紫外可见分光光度法，用吸收系数法定量，公式是什么？ A=ECL C=A/ELA为吸收度；T为透光率；E为吸收系数，采用的表示方法是（E1％1cm），其物理意义为当溶液浓度为1%（g/ml），液层厚度为1cm时的吸收度数值；C为100ml溶液中所含被测物质的重量（按干燥品或无水物计算），g；L为液层厚度，cm。在给定波长，溶剂和温度等条件下，吸光物质在单位浓度，单位液层厚度时的吸收度称为吸收系数。根据比尔定律，吸光度A与吸光物质的浓度c和吸收池光程长b的乘积成正比。当c的单位为g/L，b的单位为cm时，则A=abc，比例系数a称为吸收系数，单位为L/g.cm-1；当c的单位为mol/L，b的单位为cm时，则A=εbc，比例系数ε称为摩尔吸收系数，单位为L/mol.cm-1，数值上ε等于a与吸光物质的摩尔质量的乘积。它的物理意义是：当吸光物质的浓度为1mol/L，吸收池厚为1cm，以一定波长的光通过时，所引起的吸光度值A。ε值取决于入射光的波长和吸光物质的吸光特性，亦受溶剂和温度的影响。显然，显色反应产物的ε值愈大，基于该显色反应的光度测定法的灵敏度就愈高。扩展资料：紫外分光光度法是根据物质分子对波长为200nm-400nm这一范围的电磁波的吸收特性所建立起来的一种定性、定量和结构分析方法。操作简单、准确度高、重视性好。波长长（频率小。
分光光度法的误差来源有哪些 分光光度法的误差来源：1）溶液偏离比尔定律引起的误差一方面是溶液中吸光物质不稳定，在测定过程中，被测物质逐渐发生离解、缔合，使被测物质的组成改变产生的误差；另一方面是单色光纯度差引起溶液对比尔定律的偏离，使标准曲线上部发生弯曲，产生误差。2）仪器误差由于仪器不够精密引起的误差，如光源不稳定、光电管灵敏性差、吸收池的厚度不均匀等都会引入误差。3）操作者主观因素引起的误差由于使用仪器不够熟练或操作不当；样品液与标准液的处理没有按相同的条件和步骤进行；读数不够准确等，都属于主观误差。
紫外_可见分光光度法，用吸收系数法定量，公式是什么？ A=ECL C=A/ELA为吸收度；T为透光率2113；E为吸收系数，采5261用的表示方法是（4102E1％1cm），其物理意义为当溶1653液浓度为1%（g/ml），液层厚度为1cm时的吸收度数值；C为100ml溶液中所含被测物质的重量（按干燥品或无水物计算），g；L为液层厚度，cm。紫外-可见分光光度法是在190~800nm波长范围内测定物质的吸光度，用于鉴别、杂质检查和定量测定的方法。当光穿过被测物质溶液时，物质对光的吸收程度随光的波长不同而变化。因此，通过测定物质在不同波长处的吸光度，并绘制其吸光度与波长的关系图即得被测物质的吸收光谱。从吸收光谱中，可以确定最大吸收波长λmax和最小吸收波长λmin。物质的吸收光谱具有与其结构相关的特征性。因此，可以通过特定波长范围内样品的光谱与对照光谱或对照品光谱的比较，或通过确定最大吸收波长，或通过测量两个特定波长处的吸收比值而鉴别物质。用于定量时，在最大吸收波长处测量一定浓度样品溶液的吸光度，并与一定浓度的对照溶液的吸光度进行比较或采用吸收系数法求算出样品溶液的浓度。原理可见光、紫外线照射某些物质，主要是由于物质分子中价电子能级跃迁对辐射的吸收，而产生化合物的可见紫外吸收光谱。基于物质对光的选择。
紫外分光光度计的校正方法：分光光度法的最重要的一个物理化学量是吸光度。为了获得准确的研究结果，准确测得样品溶液的吸光度是非常重要的。一般，分析结果的不可靠性与。
紫外可见分光光度法测核酸含量的误差来源是什么？如何排除 误差可能是由于蛋白质污染或者是其他试剂残留所引起的.A260/A280的比值，用于评估样品的纯度，因为蛋白的吸收峰是280nm.纯净的样品，比值大于1.8（DNA）或者2.0（RNA）.如果比值低于1.8 或者2.0，表示存在蛋白质或者酚类物质的影响.A230表示样品中存在一些污染物，如碳水化合物，多肽，苯酚等，较纯净的核酸A260/A230的比值大于2.0.A320检测溶液的混浊度和其他干扰因子.纯样品，A320一般是0.
