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紫外分光光度法蛋白质 紫外分光光度法测量蛋白质的含量的原理?

2021-03-09知识16

可以用紫外分光光度法对氨基酸,蛋白质进行定量分析吗 可以,而且实际上也是这么2113干的5261。不过用紫外分光光度法来分析有两4102种,一种是直接把蛋白质或氨1653基酸溶液在OD280下看峰,高级一点的如nanodrop这种机器就可以直接给出蛋白浓度,但这种方法极易受到抽提蛋白时去污剂的影响而出现严重偏差,所以如果是在缓冲液中的纯蛋白是可以这么检测定量的,比如买来的抗体就会提供OD280的数值来计算浓度。实际中常用的几种蛋白定量是将蛋白或氨基酸的溶液与某些化学物质反应(如bca法、Broadford法等)后在上紫外分光光度计测量OD值,用标准蛋白如BSA做一个标准曲线,再将未知蛋白测得的OD与标曲进行比较测得准确的浓度,在一定的浓度范围内,这些方法的准确性很高。

紫外分光光度法测量蛋白质的含量的原理?

去文库,查看完整内容>;内容来自用户:空白已过时go紫外分32313133353236313431303231363533e58685e5aeb931333433646431光光度法测定蛋白质含量一、实验目的?1、学习紫外分光光度法测定蛋白质含量的原理;?2、掌握紫外分光光度法测定蛋白质含量的实验技术;?3、掌握TU-1901紫外-可见分光光度计的使用方法并了解此仪器的主要构造。二、实验原理紫外-可见吸收光谱法又称紫外-可见分光光度法,它是研究分子吸收190nm~750nm波长范围内的吸收光谱,是以溶液中物质分子对光的选择性吸收为基础而建立起来的一类分析方法。紫外-可见吸收光谱的产生是由于分子的外层价电子跃迁的结果,其吸收光谱为分子光谱,是带光谱。进行定性:利用紫外-可见吸收光谱法进行定性分析一般采用光谱比较法。即将未知纯化合物的吸收光谱特征,如吸收峰的数目、位置、相对强度以及吸收峰的形状与已知纯化合物的吸收光谱进行比较。定量分析:紫外-可见吸收光谱法进行定量分析的依据是朗伯-比尔定律:A=lgI0/I=εbc,当入射光波长λ及光程b一定时,在一定浓度范围内,有色物质的吸光度A与该物质的浓度c成正比,即物质在一定波长处的吸光度与它的浓度成线形关系。因此,通过测定溶液对一定波长入射光的。

紫外分光光度法测定蛋白质 利用该曲线进行物质定性、定量的分析方法,称为分光光度法,也称为吸收光谱法。用紫外光源测定无色物质的方法,称为紫外分光光度法。

可以用紫外分光光度法对氨基酸,蛋白质进行定量分析吗 可以的紫外分光光度法也是一种重要的检测蛋白质浓度的方法。蛋白质中酪氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键,因此,蛋白质具有吸收紫外光的性质,其最大吸收峰位于280 nm附近(不同的蛋白质吸收波长略有差别)。

紫外分光光度法测定蛋白质含量的方法有何优缺点受哪些因素的影响和限制 紫外分光光度2113法测定蛋白5261质含量的方法有何优缺点?受哪些因素的影4102响和限制?答:1653优点是:方法简单、灵敏、快速、高选择性,且稳定性好,不消耗样品,低浓度的盐类不干扰测定。缺点是:仪器昂贵,而且不同的蛋白质的紫外吸收是不相同的,测定结果存在着一定的误差,受光源、溶液的PH值、比色皿材质、缓冲介质溶液等因素的影响和限制。

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