分光光度法和比色法有何异同 1、原理不同（1）、分光光度法的原理基于朗伯一比尔（Lambert-Beer）定律，在分光光度计中，将不同波长的光连续地照射到一定浓度的样品溶液时，便可得到与不同波长相对应的吸收强度。利用该曲线进行物质定性、定量的分析方法。（2）、比色法的原理是基于被测物质溶液的颜色或加入显色剂后生成的有色溶液的颜色，颜色深度和物质含量成正比，则根据光被有色溶液吸收的强度，即可测定溶液中物质的含量。2、特点不同（1）、分光光度法具有灵敏度高、操作简便、快速等优点，是生物化学实验中最常用的实验方法。（2）、比色法以生成有色化合物的显色反应为基础，针对性强，使用条件较为严格：反应应具有较高的灵敏度和选择性，反应生成的有色化合物的组成恒定且较稳定，它和显色剂的颜色差别较大。3、历史发展不同（1）、比色法的历史比分光光度法悠久。早在公元初古希腊人就曾用五倍子溶液测定醋中的铁，1795年，俄国人也用五倍子的酒精溶液测定矿泉水中的铁。比色法作为一种定量分析的方法，大约开始于19世纪30～40年代。而分光光度法是现代社会普遍使用的一种测定物质含量的方法。（2）、随着光学仪器制造技术的发展，紫外－可见分光光度计应用日益普及，精密度较高。
紫外可见分光光度计使用中应注意哪些问题？ 【紫外可见分光光度计使用注意事项】在使用紫外可见分光光度计时，必须要注意一些使用后的维护、保养，和一些基本使用注意事项，才能达到更好的使用效果。1、使用的吸收池必须洁净，并注意配对使用。量瓶、移液吸管均应校正、洗净后使用。2、取吸收池时，手指应拿毛玻璃面的两侧，装盛样品以池体的4/5为度，使用挥发性溶液时应加盖，透光面要用擦镜纸由上而下擦拭干净，检视应无溶剂残留。吸收池放入样品室时应注意方向相同。用后用溶剂或水冲洗干净，晾干防 尘保存。3、供试品溶液浓度除各该品种已有注明外，其吸收度以在0.3～0.7之间为宜。4、测定时除另有规定外，应以配制供试品溶液的同批溶剂为空白对照，采用25px石英吸收池，在规定的吸收峰±2nm以内，测几个点的吸收度或由仪器在规定的波长附近自动扫描测定，以核对供试品的吸收峰位置是否正确，并以吸收度最大的波长作为测定波长，除另有规定外吸收度最大波长应在该品种项下规定的测定波长±2nm以内。5、供试品应取2份，如为对照品比较法，对照品一般也应取2份。平行操作，每份结果对平均值的偏差应在±0.5%以内。6、选用仪e68a84e8a2ad3231313335323631343130323136353331333365643536器的狭缝宽度应小于供试。
分光光度计在医学领域主要应用于那些方面 分光光度计在医学领域主要应用于：核酸的定量、蛋白质的直接定量（UV法）、比色法蛋白质定量。1、核酸的定量核酸的定量是分光光度计使用频率最高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸，单链、双链DNA，以及RNA。核酸的最高吸收峰的吸收波长260 nm。每种核酸的分子构成不一，因此其换算系数不同。定量不同类型的核酸，事先要选择对应的系数。如2、蛋白质的直接定量（UV法）这种方法是在280nm波长，直接测试蛋白。选择Warburg 公式，光度计可以直接显示出样品的浓度，或者是选择相应的换算方法，将吸光值转换为样品浓度。蛋白质测定过程非常简单，先测试空白液，然后直接测试蛋白质。3、比色法蛋白质定量蛋白质通常是多种蛋白质的混合物，比色法测定的基础是蛋白质构成成分：氨基酸（如酪氨酸，丝氨酸）与外加的显色基团或者染料反应，产生有色物质。有色物质的浓度与蛋白质反应的氨基酸数目直接相关，从而反应蛋白质浓度。向左转|向右转扩展资料分光光度计测量范围一般包括波长范围为380~780 nm的可见光区和波长范围为200～380 nm的紫外光区。不同的光源都有其特有的发射光谱，因此可采用不同的发光体作为仪器的光源。钨灯的发射光谱：钨灯光源所发出的380～780。
紫外可见分光光度计能测哪些指标 每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线，可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量，这就是分光光度定性和定量分析的基础.因此可以适用这个原理、并在紫外可见光分光光度计光谱检测.
紫外-可见光分光光度计 原理，基本构造，使用方法，注意事项及应用 一、分光光度计的基2113本工作原理随着现代科技的不断5261发展和进步，现代4102分光光度法的测试手段1653和方法都在不断改进，但最根本的依据仍然建立在朗伯-比尔定律的基础之上。A=KLC式中：A-为被测物在给定波长的需光吸光度值K-为一系数，称为溶液的吸收系数（与入射光波长及被测物质的特性有关）L-为被测物质的厚度（一般与比色池的厚度有关）C-为被测物质的浓度由上式可以看出，被测物质对单色光的吸光度与被测物质的浓度成正比。实际测试时，单色光通过被测物质达到光电接收器，由光电倍增管或光电池转换成光电流，而光电流的强弱决定了吸光度值A的大小。假定通过参比样品的光电流为I。而通过待测样品的光电流为I，则两者之比设定为τ，也称透射比（或以T%表示，称为透过率）。则：τ=I/I。100%朗伯-比尔定律的贡献就是发现了透射比的负对数值（也就是吸光度A）的变化与物质的浓度的变化呈正比关系。即：A=-lgτ或lg（I/I。KCL同时，不同的物质对不同波长的单色光呈现出不同的吸光度值，这一变化特征也就是分光光度法用于物质的定性定量分析的理论基础。基于上述原理，你可以知道无论以往的仪器还是现代的仪器，其最基本的工作要求就是为了能准确获得。
分光光度计的原理是什么？ 分光光2113度计就是利用分光光度法对物质进行定量5261定性分析的仪器。4102该仪器是食品厂、饮用水厂办1653理QS、HACCP认证的必备检验设备。QS认证专用指定分光光度计 而分光光度法则是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定量分析。常用的波长范围为：(1)200～400nm的紫外光区，(2)400～760nm的可见光区，(3)2.5～25μm（按波数计为4000cm～400cm）的红外光区。所用仪器为紫外分光光度计、可见光分光光度计（或比色计）、红外分光光度计或原子吸收分光光度计。为保证测量的精密度和准确度，所有仪器应按照国家计量检定规程或本附录规定，定期进行校正检定。单色光辐射穿过被测物质溶液时，被该物质吸收的量与该物质的浓度和液层的厚度（光路长度）成正比，其关系如下式：A=-log(I/I。lgT=kLc 式中：A 为吸收度；I。为入射的单色光强度；I 为透射的单色光强度；T 为物质的透射比；k 为吸收系数；L 为被分析物质的光程 c 为物质的浓度 物质对光的选择性吸收波长，以及相应的吸收系数是该物质的物理常数。当已知某纯物质在一定条件下的吸收系数后，可用同样条件将该供试品配成溶液，测定其吸收度，即可由上式计算出供试品中该物质。
使用紫外分光光度计时应注意哪些问题 1.开机前将样品室内的干燥剂取出，仪器自检过程中禁止打开样品室盖。2.比色皿内溶液以皿高的2/3～4/5为宜，不可过满以防液体溢出腐蚀仪器。测定时应保持比色皿清洁，池壁上液滴应用擦镜纸擦干，切勿用手捏透光面。测定紫外波长时，需选用石英比色皿。3.测定时，禁止将试剂或液体物质放在仪器的表面上，如有溶液溢出或其它原因将样品槽弄脏，要尽可能及时清理干净。4.实验结束后将比色皿中的溶液倒尽，然后用蒸馏水或有机溶剂冲洗比色皿至干净，倒立晾干。关电源将干燥剂放入样品室内，盖上防尘罩，做好使用登记，得到管理老师认可方可离开。紫外可见分光光度计问题处理：1、如果仪器不能初始化，关机重启。2、如果吸收值异常，依次检查：波长设置是否正确（重新调整波长，并重新调零）、测量时是否调零（如被误操作，重新调零）、比色皿是否用错（测定紫外波段时，要用石英比色皿）、样品准备是否有误（如有误，重新准备样品）。
可见分光光度计有什么作用，是用来干什么的？ 你这个问题就很奇怪了。现在实验时使用的都是紫外可见分光光度计。只是紫外和可见光的频率不同，使用时调节棱镜和光栅就行了。作用都是检定物质。不同物质的最佳吸收光频率。
紫外及可见吸收光谱分析法的定性和定量分析依据分别是什么？定量分析时，为何常常采用 紫外-可见吸收光谱的产生及基本原理 2.1 物质对光的选择性吸收 分子的紫外-可见吸收光谱是基于分子内电子跃迁产生的吸收光谱进行分析的一种常用的光谱。Http：//www.ccsei.com
