关于平板菌落计数法 平板克隆接种数

平板划线法的步骤 1．融2113化培养基：牛肉膏蛋白胨琼5261脂培养基放入水浴中加热至融4102化。2．倒平板：待培养基1653冷却至50℃左右，按无菌操作法倒2只平板(每皿约15m1)，平置，待凝固。倒平板的方法：右手持盛培养基的试管或三角瓶置火焰旁边，用左手将试管塞或瓶塞轻轻地拨出，试管或瓶口保持对着火焰；然后用右手手掌边缘或小指与无名指夹住管(瓶)塞(也可将试管塞或瓶塞放在左手边缘或小指与无名指之间夹住。如果试管内或三角瓶内的培养基一次用完，管塞或瓶塞则不必夹在手中)。左手拿培养皿并将皿盖在火焰附近打开一缝，迅速例入培养基约15m1，加盖后轻轻摇动培养皿，使培养基均匀分布在培养皿底部，然后平置于桌面上，待凝后即为平板。3．作分区标记在皿底将整个平板划分成A、B、C、D四个面积不等的区域。各区之间的交角应为120℃左右（平板转动一定角度约60℃），以便充分利用整个平板的面积，而且采用这种分区法可使D区与A区划出的线条相平行，并可避免此两区线条相接触。4．划线操作(1)挑取他含菌样品：选用平整、圆滑的接种环，按无菌操作法挑取少量菌种。(2)划A区：将平板倒置于煤气（酒精）灯旁，左手拿出皿底并尽量使平板垂直于桌面，有培养基一面向着煤气灯(这时皿盖。单克隆接种到试管中培养时，为什么同时进行划线培养 1、将配制好的固体培养基（琼脂凝固前），分装到试管中，大概1/4～1/3试管高度，灭菌后摆斜面2、有接种环将大肠杆菌划线到斜面上3、用接种环直接挑取划线。单克隆抗体的制备过程 过程1）免疫脾细胞的制备 制备单克隆抗体的动物多采用纯系 Balb/c小鼠。免疫的方法取决于所用抗原的性质。免疫方法同一般血清的制备，也可采用脾内直接免疫法。。关于平板菌落计数法 由于菌种个体差异，生长能力不同，或者开始生长的时间不同，比如铺板的时候，有气泡（可能看不见，但是没有和LB培养基完全结合）由于是几何级数的增长，所以越到后面，差的。单克隆抗体的制备 单克隆抗体制备有两种方法。第一种方法是：增量培养法，即将杂交瘤细胞在体外培养，在培养液中分离单克隆抗体。该法需用特殊的仪器设备，一般应用无血清培养基，以利于单。

#固体培养基#lb培养基#平板