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请问:做荧光定量PCR时,△△Ct值是什么意思,它的计算公式是什么? 荧光定量ct值比看家基因小

2020-07-23知识17

求助荧光定量PCR,我的实验组和对照组的目的基因CT值非常相近,但是两组内参基因的CT值相差5左右,正常吗 正常的,因为你提取两个材料的RNA的量不同。。请问:做荧光定量PCR时,△△Ct值是什么意思,它的计算公式是什么? Ct是荧光定量计算公式的简化形式,用于比较不同样品之间的差别或变化比率。Ct=-1/lg(1+Ex)*lgX€+lgN/lg(1+Ex),其中,n为扩增反应的循环次数,X€为初始模板量,Ex为扩增效率,N为荧光扩增信号达到阈值强度时扩增产物的量。Ct(n)=Ct(目的基因)-Ct(内参基因);CT(n)=△Ct(n)-△Ct(1)。起始拷贝数越多,Ct值越小。利用已知起始拷贝数的标准品可作出标准曲线,其中横坐标代表起始拷贝数的对数,纵坐标代Ct值。因此,只要获得未知样品的Ct值,即可从标准曲线上计算出该样品的起始拷贝数。扩展资料荧光定量PCR的原理:荧光定量PCR技术:在PCR反应体系中加入荧光基团,通过荧光信号不断累积而实现实时监测PCR全程,然后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。在实时荧光定量PCR中,对全程PCR扩增过程进行实时检测,根据反应时间和荧光信号的变化可以绘制成一条曲线。实时荧光定量常用的荧光化学分类有SYBR Green I法和Tag Man探针法。Ct值:C代表Cycle,t代表threshold,Ct值的含义是每个反应管内的荧光信号到达设定的域值时所经历的循环数。参考资料来源:参考资料来源:请问:做荧光定量PCR时,△△Ct值是什么意思,它的计算公式是什么? Ct这是相对荧光定量的一个计算公式的简化形式,用于比较不同样品之间的差别或变化比率。Ct=-k lgX0+b(线性方程)用这个方程可以通过Ct值算出样品的起始浓度斜率=-1/lg(1+e。

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