酶活力的常用测定方法? 最低0.27元开通文库会员,查看完整内容>;原发布者:马晓晓碱性蛋2113白酶及各种蛋白酶活力5261测定方法及测定有感因长期测定4102碱性蛋白酶酶活力与角蛋白酶1653活力与胶原酶活力和弹性蛋白酶活力,碱性蛋白酶活力测定还好,因有国家标准,测定按照国标来便可大大减少误差。其余酶活力测定过程中因无统一标准且底物差异大,导致长期酶活力测定的混乱,各种酶活力测定方法与各种试剂添加,最后实际测定的酶活力只能仅作参考。以下是各种蛋白酶活力测定方法及标曲绘制:碱性蛋白酶测定方法根据国标GB/T23527-2009附录B蛋白酶活力测定福林法以下是方法碱性蛋白酶的测定方法参考GB/T23527-2009附录B中福林酚法进行,即1个酶活力单位(U/mL)定义为1mL酶液在40℃、pH=10.5条件下反应1min水解酪蛋白产生1μg酪氨酸所需要的酶量,主要步骤如下。2.2.6.1标准曲线的绘制(1)L-酪氨酸标准溶液:按表2-6配制。管号表2-6L-酪氨酸标准溶液配置表Table2-6L-Tyrosinestandardsolutionform酪氨酸标准溶液的浓度/(μg/mL)取100μg/mL酪氨酸标准溶液的体积/(mL)取水的体积/(mL)001102203304405500101928374655(2)分别取上述溶液各1.00mL,各加0.4mol/L碳酸钠溶液5.0mL,福林试剂使用液1。.
碱性蛋白酶是什么? 碱性蛋白酶,指在碱性条件下能够水解蛋白质肽键的酶,最适pH在9~11范围内。广泛应用于洗涤剂、食品、医疗、酿造、丝绸、制革等行业。碱性蛋白酶是经细菌原生质体诱变方法造育的2709枯草杆微生物通过深层发酵、提取及精制而成的一种蛋白水解酶,属于一种丝氨酸脆外高碱性蛋白酶,它能水解蛋白质分子肽链生成多肽或氨基酸,具有较强的分解蛋白质的能力。生产工艺是采用微滤超滤膜分离、喷雾干燥或真空冷冻干燥等先进技术,广泛应用于食品、医疗、酿造、丝绸、制革等行业。
测定蛋白酶活力时为什么要严格控制反应时间? 为什么酶要放在冰箱里啊?简单的说,酶是有寿命的,时间长了,你就不知道是酶本身降解了,还是参与反应消耗了,这是两个截然不同的概念
酶活力测定的注意事项有哪些 最低0.27元开通文库会员,查看完整内容>;原发布者:马晓晓碱性2113蛋白酶及各种蛋白酶活力测定方法及测5261定有感因长期测定碱性蛋白4102酶酶活力与角蛋白1653酶活力与胶原酶活力和弹性蛋白酶活力,碱性蛋白酶活力测定还好,因有国家标准,测定按照国标来便可大大减少误差。其余酶活力测定过程中因无统一标准且底物差异大,导致长期酶活力测定的混乱,各种酶活力测定方法与各种试剂添加,最后实际测定的酶活力只能仅作参考。以下是各种蛋白酶活力测定方法及标曲绘制:碱性蛋白酶测定方法根据国标GB/T23527-2009附录B蛋白酶活力测定福林法以下是方法碱性蛋白酶的测定方法参考GB/T23527-2009附录B中福林酚法进行,即1个酶活力单位(U/mL)定义为1mL酶液在40℃、pH=10.5条件下反应1min水解酪蛋白产生1μg酪氨酸所需要的酶量,主要步骤如下。2.2.6.1标准曲线的绘制(1)L-酪氨酸标准溶液:按表2-6配制。管号表2-6L-酪氨酸标准溶液配置表Table2-6L-Tyrosinestandardsolutionform酪氨酸标准溶液的浓度/(μg/mL)取100μg/mL酪氨酸标准溶液的体积/(mL)取水的体积/(mL)001102203304405500101928374655(2)分别取上述溶液各1.00mL,各加0.4mol/L碳酸钠溶液5.0mL,福林试剂使用液1。.
生化实验报告 胰蛋白酶活力测定 去文库,查看完整内容>;内容来自用户:huang900722胰蛋白酶活力测定一、实验原理1、福林—酚试剂中的磷钨酸和磷钼酸,在碱性条件下极不稳定,易62616964757a686964616fe4b893e5b19e31333433646366被酚类化合物还原为蓝色化合物(钨蓝和钼蓝)。2、蛋白质中含具酚基的氨基酸(酪氨酸、色氨酸、苯丙氨酸),用胰蛋白酶水解蛋白底物,生成含酚基的氨基酸与福林—酚试剂反应,生成蓝色化合物,在一定的范围内,蓝色化合物颜色的深浅与酶活力的大小成正比。二、实验仪器1、试管2、7220分光光度计3、恒温水浴锅三、实验试剂1、福林试剂B:见福林(Folin)-酚试剂法测定蛋白质的浓度部分(冰箱中)2、0.55mol/L碳酸钠溶液:58.3g无水碳酸钠溶于蒸馏水,稀释并定容至1000ml3、10%三氯乙酸溶液4、0.2mol/L磷酸缓冲液(pH7.5):5、0.5%酪素溶液:称取0.5g酪素,以0.5mol/L氢氧化钠1ml湿润,再加少量0.2mol/L磷酸缓冲液稀释。在水浴中煮沸溶解,冷却,稀释并容至100ml,冷藏在(冰箱)里。6、500ug/L酪氨酸溶液7、胰蛋白酶溶液(冰箱中)四、实验步骤1、标准曲线的制作:按下表加入试剂:管号|1|2|3|4|5|6|500ug/酪氨酸溶液/ml|00.2|0.4|0.6|0.8|1.0|蒸馏水/ml|。
碱性蛋白酶盐析实验酶催化反应中,为什么要精确控制时间
如何使用Folin-酚法测定蛋白酶的活力? 实验原理:采用Folin-酚法测定,Folin-酚试剂由甲试剂和乙试剂组成.甲试剂由碳酸钠,氢氧化钠,硫酸铜及酒石酸钾钠(KNaC4H4O6?4H2O)组成.多肽中的肽键在碱性条件下,与酒石酸钾钠铜盐溶液起作用,生成紫红色络合物.乙试剂是由磷钼酸、磷钨酸、硫酸和溴等组成.此试剂在碱性条件下,易被多肽中酪氨酸的酚基还原呈蓝色反应,其色泽深浅与多肽含量成正比[28].实验所需试剂的配置:(1)试剂甲:(A):10g Na2CO3,2g NaOH和0.25g酒石酸钾钠(KNaC4H4O6?4H2O),溶解于500mL去离子水.(B):0.5g 硫酸铜(CuSO4?5H2O)溶解于100mL 去离子水中;将50份(A)与1份(B)混合,即为试剂甲.(2)试剂乙:将Folin-酚试剂与去离子水按1:1混合.(3)标准蛋白质溶液:精确称取结晶牛血清蛋白,溶于去离子水中,浓度为250μg/mL左右.牛血清蛋白溶于水,若混浊,可改用0.9%(质量分数)NaCl溶液.(4)样品溶液:通常根据样品中蛋白含量的不同,样品在测定前需要进行适当倍数的稀释.实验步骤:(1)标准曲线的测定:取16支大试管,1支作空白,3只留作未知样品,其余试管分成两组,分别加入0,0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0 mL标准蛋白质溶液(浓度为250μg/mL).用水补足到1.0 mL,然后每支试管加入5mL试剂甲,在漩涡混合器。
碱性蛋白酶是什么? 碱性蛋白酶是目前市场上流行的洗涤添加剂,能大幅度提高洗涤去污能力,特别对血渍、汗渍、奶渍、油渍等蛋白类污垢,具有独特的洗涤效果。碱性蛋白酶在技术上采用细菌原生质。