要使平板菌落计数准确,需要掌握哪几个关键?为什么? 3个1 无菌操作2 稀释良好,不会太浓或太稀。3 菌落生长时间控制好,不会长的太大不便区分,也不至于太小影响计数。要使平板菌落计数法准确,需要掌握那几个关键操作?为什么? 1 无菌操作2 稀释良好,不会太浓或太稀。3 菌落生长时间控制好,不会长的太大不便区分,也不至于太小影响计数。平板菌落计数法的说明 1.操作方2113法:以无菌操作取5261检样25g(或25ml),放于225mL灭菌生理盐水或其他稀释液4102的灭菌玻璃瓶内(瓶1653内预置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内,经充分振摇或研磨制成1:10的均匀稀释液。固体检样在加入稀释液后,最好置灭菌均质器中以8000~10000r/min的速度处理1min,制成1:10的均匀稀释液。用1ml灭菌吸管吸取1:10稀释液1ml,沿管壁徐徐注入含有9ml灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内,振摇试管混合均匀,制成1:100的稀释液。另取1ml灭菌吸管,按上项操作顺序,制10倍递增稀释液,如此每递增稀释一次即换用1支1ml灭菌吸管。2.无菌操作:操作中必须有“无菌操作”的概念,所用玻璃器皿必须是完全灭菌的,不得残留有细菌或抑菌物质。所用剪刀、镊子等器具也必须进行消毒处理。样品如果有包装,应用75%乙醇在包装开口处擦拭后取样。操作应当在超净工作台或经过消毒处理的无菌室进行。琼脂平板在工作台暴露15分钟,每个平板不得超过15个菌落。3.采样的代表性:如系固体样品,取样时不应集中一点,宜多采几个部位。固体样品必须经过均质或研磨,液体样品须经过振摇,以获得均匀稀释液。4.样品稀释误差:为减少样品稀释误差,在连续递次稀释时,每一稀释。
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