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紫外分光光度法试剂纯度为 检测核酸纯度方法

2021-03-08知识4

紫外_可见分光光度法,用吸收系数法定量,公式是什么? A=ECL C=A/ELA为吸收度;T为透光率2113;E为吸收系数,采5261用的表示方法是(4102E1%1cm),其物理意义为当溶1653液浓度为1%(g/ml),液层厚度为1cm时的吸收度数值;C为100ml溶液中所含被测物质的重量(按干燥品或无水物计算),g;L为液层厚度,cm。紫外-可见分光光度法是在190~800nm波长范围内测定物质的吸光度,用于鉴别、杂质检查和定量测定的方法。当光穿过被测物质溶液时,物质对光的吸收程度随光的波长不同而变化。因此,通过测定物质在不同波长处的吸光度,并绘制其吸光度与波长的关系图即得被测物质的吸收光谱。从吸收光谱中,可以确定最大吸收波长λmax和最小吸收波长λmin。物质的吸收光谱具有与其结构相关的特征性。因此,可以通过特定波长范围内样品的光谱与对照光谱或对照品光谱的比较,或通过确定最大吸收波长,或通过测量两个特定波长处的吸收比值而鉴别物质。用于定量时,在最大吸收波长处测量一定浓度样品溶液的吸光度,并与一定浓度的对照溶液的吸光度进行比较或采用吸收系数法求算出样品溶液的浓度。原理可见光、紫外线照射某些物质,主要是由于物质分子中价电子能级跃迁对辐射的吸收,而产生化合物的可见紫外吸收光谱。基于物质对光的选择。

紫外分光光度法试剂纯度为 检测核酸纯度方法

水质中总氮总磷的测定方法,具体的国家标准方法?急 在水体中,有机氮和无机氮化物含量增加,消耗溶解氧,使水体质量恶化.磷类物质含量过量造成澡类过度繁殖,使水质透明度降低,水质变坏.因此,总氮、总磷是衡量水质的重要指标.总氮(TN)和总磷(TP)是《地表水环境质量标准》(GB3838-2002)中的基本项目,是地表水体富营养化的重要指标,其标准分析方法分别为碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法(GB11894-89)和过硫酸钾消解钼酸铵分光光度法(GB11893-89).1、总磷的测定 钼酸铵分光光度法用过硫酸钾(或硝酸-高氯酸)为氧化剂,将未经过滤的水样消解,用钼酸铵分光光度测定总磷的方法.总磷包括溶解的、颗粒的、有机的和无机磷.本标准适用于地面水、污水和工业废水.取25mL试料,本标准的最低检出浓度为0.01mg/L,测定上限为0.6mg/L.在酸性条件下,砷、铬、硫干扰测定.2 原理在中性条件下用过硫酸钾(或硝酸-高氯酸)使试样消解,将所含磷全部氧化为正磷酸盐.在酸性介质中,正磷酸盐与钼酸铵反应,在锑盐存在下生成磷钼杂多酸后,立即被抗坏血酸还原,生成蓝色的络合物.3 试剂本标准所用试剂除另有说明外,均应使用符合国家标准或专业标准的分析试剂和蒸馏水或同等纯度的水.3.1 硫酸(H2SO4),密度为1.84g/mL.3.2 硝酸(HNO3),密度为1.4g/mL.3.3 。

紫外光吸收法测定蛋白质浓度的时候,为什么280nm比260nm还要小? 你说的是吸光度或蛋白质浓度?在260nm有峰值。紫外吸收检测dna浓度与纯度2007年11月13日 星期二 11:40目的:了解紫外吸收检测dna浓度与纯度的原理,掌握测定方法。.

检测核酸纯度方法 紫外吸收检测DNA浓度与纯度2007年11月13日 星期二 11:40目的:了解紫外吸收检测DNA浓度与纯度的原理,掌握测定方法。原理:核酸的最大吸收波长为260nm,蛋白质为280nm,在。

紫外光吸收法测定蛋白质浓度时,为什么要同时测定280nm及260nm的吸光度 紫外吸收检测2113DNA浓度与纯度2007年11月13日5261 星期二 11:40目的:了解紫外吸收检测DNA浓度与纯4102度的原理,掌握测定方法.原理:1653 核酸的最大吸收波长为260nm,蛋白质为280nm,在波长260nm时,1OD值相当于双链DNA浓度为50μg/ml,单链 寡核苷酸的含量为30μg/ml,可以据此来计算核酸样品的浓度,还可通过测定在260nm和280nm的OD值的比值(OD260/OD280),估计核酸的纯度.纯净DNA的比值为1.8,RNA为2.0.若比值高于1.8说明DNA样品中的RNA尚未除 尽,若样品中含有酚和蛋白质将导致比值降低.270nm存在高吸收表明有酚的干扰.紫外分光光度法只能用于测定浓度 大于0.25μg/ml的核酸溶液,对浓度更小的样品,可采用荧光分光光度法.试剂与仪器:提取的质粒DNA,紫外分光光度仪.操作步骤:1)分光光度计先用水在260nm和280nm两个波长下校零.2)取质粒DNA样品2μl,用水稀释100倍,转入分光光度计的石英比色杯中.3)在260nm和280nm分别读出样品光密度值.如果样品浓度单位为μg/μl,则样品DNA浓度为OD 值的10倍,即如 OD260=0.1,则样品浓度即为1μg/μl.4)若OD260/OD280大于1.8,说明仍有RNA,可以考虑用RNA酶处理样品,若小于1.8,说 明样品中含有蛋白质或酚,应再用酚/氯仿抽提,以乙醇沉淀纯化。

维生素c含量的测定 病情分析:在测定维生素C的国标方法中,荧光法为测定食物中维生素C含量的第一标准方法,2,4-二硝基苯肼法作为第二法.一,荧光法1.原理样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化成脱氢型抗坏血酸后,与邻苯二胺(OPDA)反应生成具有荧光的喹喔啉(quinoxaline),其荧光强度与脱氢抗坏血酸的浓度在一定条件下成正比,以此测定食物中抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量.脱氢抗坏血酸与硼酸可形成复合物而不与OPDA反应,以此排除样品中荧光杂质所产生的干扰.本方法的最小检出限为0.022 g/ml.2.适用范围GB12392-90 本方法适用于蔬菜,水果及其制品中总抗坏血酸的测定3.仪器3.1.实验室常用设备.3.2.荧光分光光度计或具有350nm及430nm波长的荧光计.3.3.打碎机.4.试剂本实验用水均为蒸馏水,试剂不加说明均为分析纯试剂.(1)偏磷酸-乙酸液:称取15g偏磷酸,加入40ml冰乙酸及250ml水,搅拌,放置过夜使之逐渐溶解,加水至500ml.4℃冰箱可保存7~10天.(2)0.15 mol/L硫酸:取10ml硫酸,小心加入水中,再加水稀释至1200ml.(3)偏磷酸-乙酸-硫酸液:以0.15mol/L硫酸液为稀释液,其余同4.1.配制.(4)50%乙酸钠溶液:称取500g乙酸钠(CH3COONa·3H2O),加水至1000ml.(5)硼酸-乙酸钠溶液:。

紫外分光光度法与可见分光光度法有何异同 1、测量的范围不同:(1)紫外分光光度计量程为200nm~600nm间,其中包括部分可见光。(2)可见分光光度计量程为320nm-1100nm,能。

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