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产气肠杆菌平板接种菌落描述

2020-07-17知识15

大肠杆菌在lb培养基的菌落形态 LB培养基是基础培养基,不具备选择和鉴定功能,大肠杆菌在其生长菌落形态就是白色、湿润、光滑菌落。如何鉴定大肠杆菌 1、发酵法这种方法主要是在211344.5℃下的5261培4102养基上进行大肠杆菌的培养,该培养基含有荧光底物,需要培养 24 h。然后对1653荧光底物进行释放,需要采用葡萄糖醛酸进行,让培养基能够在紫外光的照射下发出荧光。采用这样的方式方法,还可以进行统计学估计原来样品中的菌落。主要步骤包括发酵、分离培养、二次发酵、显微镜观察等。2、滤膜法该方法主要过程:加入 10 mL 左右的无菌水于滤器中,然后掺入一些无菌水进行清洁滤器的内壁,再进行过滤,将滤膜放在 M-FC 培养基中,两者之间不能够有气泡,然后进行密封,存放温度为 44.5℃,存放时间约 24 h,直到大肠杆菌的菌群变成蓝色或蓝绿色。然后记录数据,估算每一单位的水溶液菌群数量,然后进行大肠杆菌量值的换算。扩展资料:大肠杆菌是短杆菌,两端呈钝圆形,革兰阴性。有时因环境不同,个别菌体出现近似球杆状或长丝状;大肠杆菌多是单一或两个存在,但不会排列呈长链形状。大多数的大肠杆菌菌株具有荚膜或微荚膜结构,但是不能形成芽孢;多数大肠杆菌菌株生长有菌毛,其中一些菌毛是针对宿主及其他的一些组织或细胞具有黏附作用的宿主特异性菌毛。生化特性大肠杆菌在常用的生化特性检测项目中,乳品中大肠杆菌检测国标GB\/T4789.38-2008的具体步骤及达标的标准 第一法大肠杆菌MPN 计数 操作步骤 6.1、样品的稀释 6.1.1、固体和半固体样品:以无菌操作取259 样品,置盛这里可以下载此标准 http://www.51zbz.com/biaozhun/134141.html请问大肠菌群平板计数法,可疑菌落挑到BGLB里都未产气,应该怎么报告? 大肠菌群平板计数的报告经最后证实为大肠菌群阳性的试管比例乘以8.3中计数的平板菌落数,再乘以稀释倍数,即为每g(mL)样品中大肠菌群数。例:10-4样品稀释液1 mL,在VRBA平板上有100个典型和可疑菌落,挑取其中10个接种BGLB肉汤管,证实有6个阳性管,则该样品的大肠菌群数为:100×6/10×104/g(mL)=6.0×105CFU/g(mL)。如何判断大肠杆菌产酸产气 初发酵接种2mL待检样品于乳糖胆盐发酵管内.接种3个稀释度,每一稀释度接种3管,置(36土1)℃温箱内培养(24士2)h.如所有乳糖胆盐发酵管都不产气,则可报告为大肠杆菌群阴性复发酵证实试验在上述平板上,挑取可疑大肠菌群菌落1一2个进行革兰氏染色,同时接种乳糖发酵管,置(36士1)℃恒温箱内培养(24士2)h,观察产气情况.凡乳糖产酸产气、革兰氏染色为阴性的无芽袍杆菌,即可报告为大肠菌群阳性.关于大肠杆菌的几个问题 大肠菌群并非细菌学分类命名,而是卫生细菌领域的用语,它不代表某一个或某一属细菌,而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌,这些细菌在生化及血清学方面并非微生物的扩大培养为什么要得到由单个细胞繁殖而来的菌落呢?比如分离纯化大肠杆菌,接种环上都是大肠杆菌,为什么要利用平板划线法得到由一个大肠杆菌细胞繁殖而来的菌落呢?两个或者更多的在一起也可以繁殖出更多的大肠杆菌啊? 怎么检验饮料中的大肠杆菌 以无菌操2113作取25 g样品,放入装有225 mL稀释剂的灭5261菌均质杯内,于8000 r/min均质1~2min,制成1:10样品匀液(也可用4102灭菌乳钵研磨的方法代1653替).稀释样品匀液根据对样品污染情况的估计,用稀释剂将样品匀液制成一系列十倍递增的样品稀释液,如10*-2、10*-3、10*-4….从制备样品匀液至稀释完毕,全过程不得超过15min.附:这是一种9管MPN法测定方法.LST和EC初步筛选:对每个样品,选择适宜的三个连续稀释度的样品稀释液.每个稀释度接种三管月桂基硫酸盐胰蛋白(月示)(LST)肉汤,每管接种1mL.将接种管置于36±1℃培养48±2h.观察试管的产气情况:检查倒管内是否有气泡产生,用直径为3mm的接种环将所有48±2h内产气的LST肉汤管培养物移种于EC肉汤管中.将所有接种的EC肉汤管在30min内放入带盖44.5±0.5℃水浴箱内,培养48±2h.EMB平板:取其产气管的培养物划线接种于伊红美蓝(EMB)平板,36±1℃培养24±2h.检查平板上有无具黑色中心有光泽或无光泽的典型菌落.如有典型菌落,则从每个平板上至少挑取2个典型菌落;如无典型菌落,则从每个平板上至少挑取2个可疑菌落.用接种针接触菌落中心部位,移种到营养琼脂斜面上,36±1℃培养18~24h.平板划线示例EMB平板原理及斜面培养基接种大肠杆菌后的生长情况怎样描述 斜面培养基主要用于菌种的保存,描述细菌生长状况用平板划线(菌落特征),半固体培养基穿刺接种(细菌运动性,好氧性)。大肠杆菌怎么鉴定? 大肠杆菌测定伊红美蓝平板上典型大肠杆菌菌落接种到营养琼脂平板,在(36土1)℃培养18h-24 h。每个平板至少挑选2个菌落。挑取上述菌落纯培养物接种3.6.3生化培养基和乳糖发酵管,(36士1)0C培养24h 后观察结果。大肠杆菌与非大肠杆苗鉴别试验方法靛基质试验:滴加Kovacs氏靛基质试剂0.1 m L于靛基质试验培养基中混合,静置,观察结果。出现红色环的为反应阳性;出现黄色环的为反应阴性。甲基 红(MR)试验:滴加甲基红指示剂0.2 m 1于MR-VP培养基中混合,观察结果。出现红色为阳性反应;出现黄色为阴性反应。维 培(VP)试验:滴加VP试剂甲液0.2 mL于MR-VP培养基中混匀,再滴加VP试剂乙液0.1mL混匀,静置,观察结果。在15min内出现红色的为阳性反应;无颜色变化的为阴性反应。阴性结果1h后再观察一次出现红 色也为阳性反应。西蒙氏柠檬酸盐试验:观察培养基颜色变化,出现蓝色为阳性反应;不变色为阴性反应。大肠杆菌鉴定结果靛基质 MR VP 西蒙氏柠檬酸盐 鉴定典型大肠艾希氏杆菌非典型大肠艾希氏杆菌典型柠檬酸盐杆菌非典型柠檬酸盐杆菌典型产气肠杆菌非典型产气肠杆菌如出现表1以外的生化反应类型,表明培养物可能不纯,应重新划线分离,必要时做重复试验。结果报告

#大肠杆菌#大肠菌群#平板菌落计数法

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