显微镜直接计数法实验报告 最低0.27元开通文库会员,查看完整内容>;原发布者:法阿同显微镜直接计数法1、实验目的1、明确血细胞计数板计数原理;2、掌握使用血细胞计数板进行微生物计数的方法。二、实验原理利用血细胞计数板在显微镜下直接计数,是一种常用的微生物计数方法。此法的优点是直观、快速。该计数板(构造如图1所示),是一块特制的载玻片,其上由四条槽构成三个平台。中间的平台又被一短横槽隔成两半,每一边的平台上各刻有一个方格网,每个方格网共分九个大方格,中间的大方格即为计数室,微生物的计数就在计数室中进行。计数室的刻度一般有两种规格,一种是一个大方格分成16个中方格,而每个中方格又分成25个小e68a847a6431333433623766方格;另一种是一个大方格分成25个中方格,而每个中方格又分成16个小方格。所以无论是哪种规格的计数板,每一个大方格中的小方格数都是相同的即共有400个小格。每一个大方格边长为1㎜,则每一大方格的面积为1㎜2,盖上盖玻片后,载玻片与盖玻片之间的高度为0.1㎜,所以计数室的容积为0.1㎜3。其计算方法如下:设5个中方格中的总菌数为A,菌液稀释倍数为B1.16×25的计数板计算公式细胞数/ml=(A/5)×16×10000×B=32000AB个2.25×16的计数板计算公式细胞。显微计数法的实验目的是什么?测定种群密度?还是种群数量?那样方法和显微计数法有什么区别 实验目的 1、明确血细胞计数板计数原理;2、掌握使用血细胞计数板进行微生物计数的方法.样方法和显微计数法区别还是很大的,样方法说白了就是在一块地里取一块块的区域,然后计数显微计数法主要是对那些肉眼看不到的生物.微生物计数方法有哪些 测定微生物计数的方法有很多,主要有以下几种:1.血细胞计数法将稀释的菌液样品滴在血细胞计数板上,在显微镜下计算4~5个中格的细菌数,并求出每个小格所含细菌的平均数,再以此为依据,估算总菌数.①此法的缺点是不能区分死菌和活菌.②对压在小方格界线上的细菌,应当取平均值计数.③此法可用于测定培养液中酵母菌种群数量的变化2.稀释涂布平板法原理:每个活细菌在适宜的培养基和良好的生长条件下可以通过生长形成菌落.培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌.①这一方法常用来统计样品中活菌的数目②统计的菌落数往往比活菌的实际数目低,原因是当两个活多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落.因此统计结果一般用菌落数而不是用活菌数来表示.③土壤、水、牛奶、食品和其他材料中所含细菌、酵母、芽孢与孢子等的数量均可用此法测定.但不适于测定样品中丝状体微生物,例如放线菌或丝状真菌或丝状蓝细菌等的营养体等.④此法若不培养成菌落,可通过将一定量的菌液均匀地涂布在玻片上的一定面积上,经固定染色后在显微镜下计数,这样又称涂片计数法.染色可用台盼蓝,台盼蓝能使死细胞染成蓝色,可分别计数死细胞和活细胞.3.滤膜法滤膜法是当。微生物平板菌落计数法具体实验步骤 一、目的要2113求学习平板菌落计数的基本5261原理和方法。二、4102基本原理平板菌落计数法1653是根据微生物在固体培养基上所形成的一个菌落是由一个单细胞繁殖而成的现象进行的,也就是说一个菌落即代表一个单细胞。计数时,先将待测样品作一系列稀释,再取一定量的稀释菌液接种到培养皿中,使其均匀分布于平皿中的培养基内,经培养后,由单个细胞生长繁殖形成菌落,统计菌落数目,即可换算出样品中的含菌数。这种计数法的优点是能测出样品中的活菌数。此法常用于某些成品检定(如杀虫菌剂),生物制品检定以及食品、水源的污染程度的检定等。但平板菌落计数法的手续较繁,而且测定值常受各种因素的影响。三、器材大肠杆菌悬液,牛肉膏蛋白胨培养基,1ml无菌吸管,无菌平皿,盛有4.5 ml无菌水的试管,试管架和记号笔等。四、操作步骤1.编号:取无菌平皿 9套,分别用记号笔标明10-4、10-5、10-6各3套。另取6支盛有4.5ml无菌水的试管,排列于试管架上,依次标明10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6。2.稀释用1ml无菌吸管精确地吸取0.5ml大肠杆菌悬液放入10-1的试管中,注意吸管尖端不要碰到液面,以免吹出时,管内液体外溢。然后仍用此吸管将管内悬液来回吸吹三次,吸时伸入管底,吹。血细胞计数法,显微计数法和抽样检测法的区别 血细胞计数法,显微计数法和抽样检测法实际上没什么区别:人教版称之为抽样检测法,北师大版本称之为显微计数法,因为实际操作过程中用了血球计数板,所以又叫血球板计数法。血球计数板的使用原理显微镜直接计数法是将小量待测样品的悬浮液置于一种特别的具有确定面积和容积的载玻片上(又称计菌器),于显微镜下直接计数,然后推算出含菌数的一种方法。血球计数板是常用的计菌器之一。血球计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物的一种仪器,由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台。中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面刻有一个方格网。方格网上刻有9个大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室。这一大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其容积为0.1mm3,即1mm×1mm×0.1mm方格的计数板;大方格的长和宽各2mm,深度为0.1mm,其容积为0.4mm3,即2mm×2mm×0.1mm方格的计数板。在血球计数板上,刻有一些符号和数字,其含义是:XB-K-25为计数板的型号和规格,表示此计数板分25个中格;0.1mm为盖上盖玻片后计数室的高;1/400mm2表示计数室面积是1mm2,分400个小格,每小格面积是1/400 mm2。微生物细胞大小的测定和显微镜直接计数的实验中应该注意哪些问题? 微生物细胞大小的测定实验好像没有做过,所以不好说,希望能给一个说明(最好详细的)但是,按照正常的推测,应该需要注意显微镜的放大倍数以及显微镜使用方法显微镜直接计数实验好像也是很少见的,因为一般都是通过血球计数板来计数的,但是既然都是显微镜实验,那么需要注意的事项应该是相通的,也就是需要注意显微镜的使用。微生物计数方法有哪些?我想知道详细的操作步骤 微生物的显微直接计数法 一、实验目的 了解血球计数板的构造、计数原理和计数方法,掌握显微镜下直接计数的技能。二、实验原理 测定微生物细胞数量的方法很多,通常采用的。测定培养液中微生物的菌体数,为什么在显微镜下要用血细胞计数板直接计数 光电比浊计数法一、目的要求1.了解光电比浊计数法的原理。2.学习、掌握光电比浊计数法的操作方法。二、基本原理当光线通过微生物菌悬液时,由于菌体的散射及吸收作用使光线的透过量降低。在一定的范围内,微生物细胞浓度与透光度成反比,与光密度成正比,而光密度或透光度可以由光电池精确测出(图15-4)。因此,可用一系列已知菌数的菌悬液测定光密度,作出光密度—菌数标准曲线。然后,以样品液所测得的光密度,从标准曲线中查出对应的菌数。制作标准曲线时,菌体计数可采用血细胞计数板计数,平板菌落计数或细胞干重测定等方法。本7a686964616fe59b9ee7ad9431333339656435实验采用血细胞计数板计数。光电比浊计数法的优点是简便、迅速,可以连续测定,适合于自动控制。但是,由于光密度或透光度除了受菌体浓度影响之外,还受细胞大小、形态、培养液成分以及所采用的光波长等因素的影响。因此,对于不同微生物的菌悬液进行光电比浊计数应采用相同的菌株和培养条件制作标准曲线。光波的选择通常在400~700nm之间,具体到某种微生物采用多少还需要经过最大吸收波长以及稳定性试验来确定。另外,对于颜色太深的样品或在样品中还含有其他干扰物质的悬液不适合用此法。土壤微生物分离与纯化实验原理和方法 一、实验目的 了解血球计数板的构造、计数原理和计数方法,掌握显微镜下直接计数的技能。二、实验原理 测定微生物细胞数量的方法很多,通常采用的有显微直接计数法和平板。
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