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wb压胶液 我是初学者,跑出来的蛋白电泳图,那些一排一排的条带是什么意思,还有一列一列的

2021-03-07知识4

正丁醇封闭分离胶在Western中的作用

酒精应该使用浓度为百分之多少的 酒精能使细菌中蛋白质凝固.常用于皮肤消毒的酒精浓度以75%为宜.此浓度也可用于钳、镊子和体温表的浸泡,浸泡30分钟即可,浸后备用.95%的酒精则用于燃烧灭菌,如镊子、钳子等急用时可用此法.一般低于70%的酒精不能起到.

我是初学者,跑出来的蛋白电泳图,那些一排一排的条带是什么意思,还有一列一列的 你的胶是考染的吗?首先你得先知道一点蛋白质的基本理论知识(不会不知道吧?难道你是学医的?或者说蛋白质(包括其他分子,如DNA、RNA等)电泳的原理(或者说是分离原理)。只说蛋白质:蛋白质在正常情况下,一般带有负电荷,因由不同的蛋白分子因为性质(空间结构以及基团性质)不同而带电量不同,这样结合蛋白质分子本身的不同质量,会在电场下(即电泳中)产生不同的移动速度,进而将不同的蛋白分离开。又为了消除蛋白质分子间性质的差别,创造一个单一因素的电泳分离条件,所以在进行蛋白质电泳之前,都会对蛋白质进行变性处理(非变性胶等不在此列),使蛋白质肽链打开:SDS是阴离子去污剂,作为变性剂和助溶试剂,它能断裂分子内和分子间的氢键,使分子去折叠,破坏蛋白分子的二、三级结构。而强还原剂如巯基乙醇,二硫苏糖醇能使半胱氨酸残基间的二硫键断裂。在样品和凝胶中加入还原剂和SDS后,分子被解聚成多肽链,解聚后的氨基酸侧链和SDS结合成蛋白-SDS胶束,所带的负电荷大大超过了蛋白原有的电荷量,这样就消除了不同分子间的电荷差异和结构差异。如此,蛋白质(准确的说应该是变形后的蛋白质或者是蛋白-SDS胶束)便会在电场中根据不同的带电量-亦即。

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wb配分离胶时用无水乙醇压胶之后用不用水冲洗 不用水冲洗,直接加浓缩胶就好。

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