聚丙烯酰胺凝胶电泳实验操作过程中，应注意哪些事项？ 一、凝胶制备时：TEMED和AP要后加，加入后用玻棒缓慢匀速的混匀，避免有气泡产生；62616964757a686964616fe58685e5aeb931333339666662然后马上注入电泳槽内，插入梳子，这时也要匀速，但不能太慢，因为太慢的话底部的胶会比上面的胶凝的快，影响胶的质量，同时小心有气泡；二、加样时要注意：1.每空的上样量不能过大，以免样品溢出，造成各泳道相互污染；2.为了避免边缘效应，在未加样的泳道加入等量的样品缓冲液。注意事项（1）由于与凝胶聚合有关的硅橡胶称、玻璃板表面不光滑洁净，在电泳时会造成凝胶板与玻璃板或硅橡胶条剥离，产生气泡或滑胶；剥胶时凝胶板易断裂，为防止引现象，所用器材均应严格地清洗。硅橡胶条的凹槽、样品槽模板及电泳槽用泡沫海绵蘸取“洗洁净”仔细清洗。玻璃板浸泡在重铬酸钾洗液3～4h或0.2mol/L KOH的酒精溶液中20min以上，用清水洗净，再用泡沫海绵蘸取“洗洁净”反复刷洗，最后用蒸馏水冲洗，直接阴干或用乙醇冲洗后阴干。（2）安装电泳槽和镶有长、短玻璃板的硅橡胶框时，位置要端正，均匀用力旋紧固定螺丝，以免缓冲液渗漏。样品槽板梳齿应平整光滑。（3）在不连续电泳体系中，预电泳只能在分离胶乡合后进行。洗净胶面后才能制备。
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marker电泳条带为什么会这样 跑电泳的62616964757a686964616fe78988e69d8331333363366232时候，也许很多人会羡慕别人的电泳条带清晰好看，自己的电泳条带有时候弥散，有时候歪歪扭扭。熟能生巧，只要你掌握正确操作步骤，你也可以跑得得心应手。清洗玻璃板蘸点洗洁精轻轻擦洗。两面都擦洗过后用自来水冲，再用蒸馏水冲洗干净后立在筐里晾干。若不继续使用，需用无水乙醇擦拭后晾干再妥善收起来，玻璃板之间垫玻璃纸隔开。梳子应用水洗干净，临用前用无水乙醇擦拭晾干。灌胶与上样1.玻璃板对齐后放入夹中卡紧。然后垂直卡在架子上准备灌胶（操作前先往玻璃板间灌水，检查是否漏）。2.按配胶试剂盒说明书选择合适的分离胶浓度配置，最后加入 TEMED，之后摇匀即可灌胶。配制凝胶时要充分混匀，此外应保证试剂的新鲜，特别是过硫酸铵。灌胶时掌握好速度，避免气泡产生（注意浓度越小的胶含水越多，凝固后胶体积缩小越多）。胶上加一层水，液封后的胶凝的更快。灌胶时开始可快一些，胶面快到所需高度时要放慢速度。操作时胶一定要沿玻璃板流下，这样胶中才不会有气泡。加水液封时要很慢，否则胶会被冲变形。未聚合的丙烯酰胺具有神经毒性，操作时应该戴手套防护。梳子插入浓缩胶时，应确保没有气泡。
