紫外-可见光分光光度计 原理，基本构造，使用方法，注意事项及应用 一、分光光度计的基2113本工作原理随着现代科技的不断5261发展和进步，现代4102分光光度法的测试手段1653和方法都在不断改进，但最根本的依据仍然建立在朗伯-比尔定律的基础之上。A=KLC式中：A-为被测物在给定波长的需光吸光度值K-为一系数，称为溶液的吸收系数（与入射光波长及被测物质的特性有关）L-为被测物质的厚度（一般与比色池的厚度有关）C-为被测物质的浓度由上式可以看出，被测物质对单色光的吸光度与被测物质的浓度成正比。实际测试时，单色光通过被测物质达到光电接收器，由光电倍增管或光电池转换成光电流，而光电流的强弱决定了吸光度值A的大小。假定通过参比样品的光电流为I。而通过待测样品的光电流为I，则两者之比设定为τ，也称透射比（或以T%表示，称为透过率）。则：τ=I/I。100%朗伯-比尔定律的贡献就是发现了透射比的负对数值（也就是吸光度A）的变化与物质的浓度的变化呈正比关系。即：A=-lgτ或lg（I/I。KCL同时，不同的物质对不同波长的单色光呈现出不同的吸光度值，这一变化特征也就是分光光度法用于物质的定性定量分析的理论基础。基于上述原理，你可以知道无论以往的仪器还是现代的仪器，其最基本的工作要求就是为了能准确获得。
紫外分光光度计使用方法及原理 可见-紫外分光光度计的工作原理基于朗伯-比尔(Lambert-Beer)定律，即物质在一定浓度 的吸光度与它的吸收介质的厚度呈正比，其应用波长范围为200～400nm的紫外光区、400～850nm的可见光区。主要由辐射源（光源）、色散系统、检测系统、吸收池、数据处理机、自动记录器及显示器等部件组成。将分析样品和标准样品以相同浓度配制在同一溶剂中，在同一条件下分别测定紫外可见吸收光谱。若两者是同一物质，则两者的光谱图应完全一致。如果没有标样，也可以和现成的标 准谱图对照进行比较。这种方法要求仪器准确，精密度高，且测定条件要相同。实验证明，不同的极性溶剂产生氢键的强度也不同，这可以利用紫外光谱来判断化合物在不 同溶剂中氢键强度，以确定选择哪一种溶剂。
紫外可见分光光度计使用方法
常见紫外分光光度计该如何使用，紫外、分光光度计是溶液中的物质在光的照射激发下，产生了对光的吸收效应，物质对光的吸收是具有选择性的。各种不同的物质都具有其各自的。
紫外-可见分光光度计的具体使用方法？
紫外分光光度计的使用步骤是什么？ 仪器名称：紫外/可见分光光度计系统使用方法：开机步骤1 开光谱仪电源2 开计算机电源3 在文件管理器中用鼠标指按UV WinLab图标，此时出现UV WinLab的应用窗口，仪器已准备好，可选用适当方法进行分析操作.2 方法：在分析中必须对分光光度计设定一些必要的参数，这些参数的组合就形成一个“方法”.Lambda系列UV WinLab软件预设四类常用方法.1）扫描（SCAN），用以进行光谱扫描.2）时间驱动（TIME DRIVER），用以观察一定时间内某种特定波长处纵坐标值的变化，如酶动力学.3）波长编程（WP）用以在多个波长下测定样品在一定时间内的纵坐标值变化，并可以计算这些纵坐标值的差或比值.4）浓度（CONC）用以建立标准曲线并测定浓度.2.1 进入所需方法，在方法窗口中选择所需方法的文件名.2.2 方法的设定2.2.1 扫描、波长编程及时间驱动各项方法可根据显示的参数表，逐项按需要选用或填入，并可参考提示.2.2.2 浓度浓度方法窗口下方标签较多，说明做浓度测定时需要参数较多.用鼠标指按每一标签，可翻出下页，其上有一些需要测定的参数.必须逐页设定.3 工具条3.1 SETUP当所需的各项参数都已在参数中设好后，必须用鼠标指按SETUP，才能将仪器调整到所设状态.3.2 AUTOZERO用鼠标指按此。
紫外分光光度计的使用方法
紫外可见分光光度计使用中应注意哪些问题？ 【紫外可见分光光度计使用注意事项】在使用紫外可见分光光度计时，必须要注意一些使用后的维护、保养，和一些基本使用注意事项，才能达到更好的使用效果。1、使用的吸收池必须洁净，并注意配对使用。量瓶、移液吸管均应校正、洗净后使用。2、取吸收池时，手指应拿毛玻璃面的两侧，装盛样品以池体的4/5为度，使用挥发性溶液时应加盖，透光面要用擦镜纸由上而下擦拭干净，检视应无溶剂残留。吸收池放入样品室时应注意方向相同。用后用溶剂或水冲洗干净，晾干防 尘保存。3、供试品溶液浓度除各该品种已有注明外，其吸收度以在0.3～0.7之间为宜。4、测定时除另有规定外，应以配制供试品溶液的同批溶剂为空白对照，采用25px石英吸收池，在规定的吸收峰±2nm以内，测几个点的吸收度或由仪器在规定的波长附近自动扫描测定，以核对供试品的吸收峰位置是否正确，并以吸收度最大的波长作为测定波长，除另有规定外吸收度最大波长应在该品种项下规定的测定波长±2nm以内。5、供试品应取2份，如为对照品比较法，对照品一般也应取2份。平行操作，每份结果对平均值的偏差应在±0.5%以内。6、选用仪e68a84e8a2ad3231313335323631343130323136353331333365643536器的狭缝宽度应小于供试。
怎么使用紫外分光光度计，相信做科研的小伙伴们一定都听过或者用过紫外分光光度计，但是对于刚入门的科研小白们，在没人教的情况下，如何来测定样品溶液的吸光度呢？
