用紫外分光光度法测定核酸含量为什么实验结。
紫外_可见分光光度法，用吸收系数法定量，公式是什么？ A=ECL C=A/ELA为吸收度；T为透光率2113；E为吸收系数，采5261用的表示方法是（4102E1％1cm），其物理意义为当溶1653液浓度为1%（g/ml），液层厚度为1cm时的吸收度数值；C为100ml溶液中所含被测物质的重量（按干燥品或无水物计算），g；L为液层厚度，cm。紫外-可见分光光度法是在190~800nm波长范围内测定物质的吸光度，用于鉴别、杂质检查和定量测定的方法。当光穿过被测物质溶液时，物质对光的吸收程度随光的波长不同而变化。因此，通过测定物质在不同波长处的吸光度，并绘制其吸光度与波长的关系图即得被测物质的吸收光谱。从吸收光谱中，可以确定最大吸收波长λmax和最小吸收波长λmin。物质的吸收光谱具有与其结构相关的特征性。因此，可以通过特定波长范围内样品的光谱与对照光谱或对照品光谱的比较，或通过确定最大吸收波长，或通过测量两个特定波长处的吸收比值而鉴别物质。用于定量时，在最大吸收波长处测量一定浓度样品溶液的吸光度，并与一定浓度的对照溶液的吸光度进行比较或采用吸收系数法求算出样品溶液的浓度。原理可见光、紫外线照射某些物质，主要是由于物质分子中价电子能级跃迁对辐射的吸收，而产生化合物的可见紫外吸收光谱。基于物质对光的选择。
为什么用OD260/OD280评定核酸纯度 核酸的最大吸收波长是260nm，这个物理特性为测定核酸溶液浓度提供了32313133353236313431303231363533e4b893e5b19e31333431353866基础。在波长260nm紫外线下，1 OD值的光密度相当于双链DNA浓度为50μg/ml；单链DNA或RNA为40μg/ml；寡核苷酸为20μg/ml。可以此来计算核酸样品的浓度。通过测定在260nm和280nm的紫外线吸收值的比值（A260/A280）可以估计核酸的纯度。纯DNA的比值为1.8，纯RNA的比值为2.0。若DNA比值高于1.8，说明制剂中RNA尚未除尽。RNA、DNA溶液中含有酚和蛋白质将导致比值降低。样品中如混有RNA比值上升。扩展资料显示DNA的传统方法是富尔根（Feulgen）反应，切片先用稀盐酸处理，DNA经弱酸（1mol/L HCL）水解后，在60℃条件下使DNA分子中脱氧核糖与嘌呤之间的连接打开，脱氧核糖的一端释放出醛基，并在原位与Schiff试剂反应生成紫红色产物。原理同PAS反应，使细胞核DNA显紫红色。在此过程中RNA不受影响，故染色具有DNA特异性。准确的温度和盐酸浓度，适宜的水解时间是成功的关键。水解过度或不足均降低染色强度。核酸可分为脱氧核糖核酸（deoxyribonucleic acid，DNA）和核糖核酸（ribonucleic acid，RNA）。核酸不但是一切生物细胞的基本成分，还。
紫外分光光度法测定蛋白质含量的方法有何优缺点受哪些因素的影响和限制 紫外分光光度2113法测定蛋白5261质含量的方法有何优缺点？受哪些因素的影4102响和限制？答：1653优点是：方法简单、灵敏、快速、高选择性，且稳定性好，不消耗样品，低浓度的盐类不干扰测定。缺点是：仪器昂贵，而且不同的蛋白质的紫外吸收是不相同的，测定结果存在着一定的误差，受光源、溶液的PH值、比色皿材质、缓冲介质溶液等因素的影响和限制。
总氮的检测方法 碱性62616964757a686964616fe78988e69d8331333433616234过硫酸钾消解光度法方法提要在60℃以上的水溶液中，过硫酸钾可分解产生硫酸氢钾和原子态氧，硫酸氢钾在溶液中离解而产生氢离子，故在氢氧化钠的碱性介质中促使分解过程趋于完全。分解出的原子态氧在120～124℃条件下，可使水样中含氮化物的氮元素转化为硝酸盐。并且在此过程中有机物同时被氧化分解。可用紫外分光光度法于波长220nm和275nm处，分别测出吸光度A220及A275，用以校正220nm有机物吸光度的干扰。本法可测定水中亚硝酸盐氮、硝酸盐氮、无机铵盐、溶解态氨、及大部分有机含氮化合物中氮的总和。检测范围为0.05～4mg/L。本方法的摩尔吸光系数为1.47×103L·mol-1·cm-1。测定中干扰物主要是碘离子与溴离子，碘离子相对于总氮含量的2.2倍以上，溴离子相对于总氮量的3.4倍以上有干扰。某些有机物在本法规定的测定条件下不能完全转化为硝酸盐时对测定有影响。可滤性总氮：指水中可溶性及含可滤性固体(小于0.45μm颗粒物)的含氮量。总氮：指可溶性及悬浮颗粒中的含氮量。仪器和装置紫外分光光度计10mm石英比色皿。医用于提式蒸气灭菌器或家用压力锅压力为0.11～0.14MPa，锅内温度相当于120～124℃。具玻璃。
简述紫外分光光度法测定硝酸盐氮的原理，为什么要在两个波长测定吸光度 1、原理：在盐酸介质百中，利用硝酸根离子在220纳米波长处的吸收而定量测定，溶解的有机物在220纳米处和275纳米处均有吸收，而硝酸根离子度在275纳米处没有吸收。因此，在275纳米处做另一次测量，以校知正硝酸盐氮值。2、因为过硫酸钾将水样中的氨氮、亚硝酸盐氮及大部分有机氮化合物氧化为道硝酸盐。硝酸根离子在220nm波长处有吸收，而溶解的专有机物在此波长也有吸收，干扰测定。而硝酸根离子在275nm处没有吸收。所以在275nm处也测定吸光度，属用来校正硝酸盐氮值。
