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植物蛋白样品缓冲液配方 植物蛋白质的提取方法

2021-03-06知识6

什么是PBS缓冲液 PBS是磷酸2113缓冲盐溶液一般作为溶剂,起溶解5261保护试剂的作用。4102它是生物化学研究中使用最为广泛的1653一种缓冲液,主要成分为Na ?HPO ?、KH?PO ?、NaCl和KCl。PBS缓冲液不仅伪狂犬病毒要用它稀释,一般的有活性的生物制剂都要用它来稀释。由于Na?HPO ? 和KH?PO ? 它们有二级解离,缓冲的pH值范围很广;而NaCl和KCl主要作用为增加盐离子浓度。如有需要PBS还可以补加1 mmol/L CaCl?和0.5 mmol/L MgCl?,以提供双价阳离子。扩展资料PBS是磷酸缓冲盐溶液作用:1、因为PBS缓冲液具有可调整的适宜pH缓冲作用和盐平衡的作用。不使用蒸馏水的原因在于水会破坏生物蛋白的结构和生物特性。不使用生理盐水的原因在于它不能够调整PH值。所以,对生物细胞进行清洗首选是PBS缓冲液。2、PBS缓冲液的PH值是细胞最适合的PH值范围,而且在酸碱微量的刺激下,PH值一般也没有任何的变化。培养基的PH值时很容易变化的,对于细胞具有极大的损伤,但是PBS缓冲液可以保持细胞能在适合的PH值范围之内健康的生活活。参考资料来源:-pbs缓冲液

氮蓝四唑NBT法测超氧化物歧化酶的具体步骤 氮蓝四唑(NBT)法测定超氧物歧化酶(SOD)活力一、原理超氧物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)普遍存在于动、植物体内,是一种清除超氧阴离子自由基的酶.本实验依据超氧物歧化酶抑制氮蓝四唑(NBT)在光下的还原作用来确定酶活性大小.在有氧化物质存在下,核黄素可被光还原,被还原的核黄素在有氧条件下极易再氧化而产生O2,可将氮蓝四唑还原为蓝色的甲腙,后者在560nm处有最大吸收.而SOD可清除O2,从而抑制了甲腙的形成.于是光还原反应后,反应液蓝色愈深,说明酶活性愈低,反之酶活性愈高.据此可以计算出酶活性大小.二、材料、仪器设备及试剂(一)材料;水稻或小麦叶片(二)仪器设备:1.高速台式离心机;2.分光光度计;3.微量进样器;4.荧光灯(反应试管处照度为4000Lx);5.试管或指形管数支.(三)试剂1.0.05mol/L 磷酸缓冲液(pH7.8);2.130mmol/L 甲硫氨酸(Met)溶液:称1.9399gMet用磷酸缓冲液定容至100ml;3.750μmol/L 氮蓝四唑溶液:称取0.06133gNBT用磷酸缓冲液定容至100ml,避光保存;4.100μmol/L EDTA-Na2溶液:称取0.03721gEDTA-Na2用磷酸缓冲液定容至1000ml;5.20μmol/L 核黄素溶液:称取0.0753g核黄素用蒸馏水定容至1000ml避光保存.三、实验步骤1。.

植物蛋白样品缓冲液配方 植物蛋白质的提取方法

植物蛋白质的提取方法 植物蛋白质的提bai取方法基本du上有这几种:盐zhi析法、有机溶剂法dao和等电点法专。1、盐析法原理属:盐析法是指在药物溶液中加入大量的无机盐,使某些高分子物质的溶解度降低沉淀析出,而与其他成分分离的方法。盐析法主要用于蛋白质的分离纯化。常作盐析的无机盐有硫酸钠、硫酸镁、硫酸铵等。2、有机溶剂法原理:机溶剂引起蛋白质沉淀的主要原因是加入有机溶剂使水溶液的介电常数降低,因而增加了两个相反电荷基团之间的吸引力,促进了蛋白质分子的聚集和沉淀。有机溶剂引起蛋白质沉淀的另一种解释认为与盐析相似,有机溶剂与蛋白质争夺水化水,致使蛋白质脱除水化膜,而易于聚集形成沉淀。3、等电点法原理:在等电点时,蛋白质分子以两性离子形式存在,其分子净电荷为零(即正负电荷相等),此时蛋白质分子颗粒在溶液中因没有相同电荷的相互排斥,分子相互之间的作用力减弱,其颗粒极易碰撞、凝聚而产生沉淀,所以蛋白质在等电点时,其溶解度最小,最易形成沉淀物。等电点时的许多物理性质如黏度、膨胀性、渗透压等都变小,从而有利于悬浮液的过滤。

提取基因组的方法

细胞破碎后,,用缓冲液提取蛋白质,用什么方法能得到蛋白质溶液而不含那些沉淀物!(离心后有杂质!) 细胞破碎后,用缓冲液提取蛋白质,用什么方法能得到蛋白质溶液而不含那些沉淀物!(离心后有杂质!离心后沉淀不稳定,是否应该用什么方法过滤下,要不然取得上清液 就难免。

跪求实验方案急。关于植物小分子多肽的提取分离和分析 最好用到高效液相提取 分析的 多肽类化合物广泛存在于自然界中,其中对具有一定生物活性的多肽的研究,一直是药物开发的一个主要方向。生物体内已知的活性多肽主要是从内分泌腺组织器官、分泌细胞和体液。

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