pcr实验原理及注意事项 去文库,查看完整内容>;内容来自用户:65665206wssPCR疑难解答当PCR结果不甚满意时,首先检查以下几方面并遵照执行:将PCR反应的试管与反应板紧贴。e69da5e6ba9062616964757a686964616f31333433646431 当酶反应混合物以70℃“热启动”开始循环时,切记在加入酶后稍微振荡一下,因为在0.2-ml的PCR管中不能均匀传热。不要随意减少dNTP的用量,它是一个系统的因素,必须与其它成份保持平衡。对于有问题的PCR反应,例如模板的量少,模板不纯和环状模板等,先尝试加Taq酶前的体系进行预变性,后加模板进行正常PCR扩增。没有扩增产物:在提供MgCl2缓冲液中,以0.25mmol/L为梯度增加MgCl2浓度;无MgCl2的缓冲液以0.5 mmol/L为梯度增加MgCl2浓度。泳道中出现模糊条带,如果DNA模板中存在RNA,则按上述提示浓度补加MgCl2,因为在PCR反应中可能缺少游离的Mg2+。检查退火温度和变性条件,如果有需要的话,可降低退火温度。检查模板和引物的用量。增加循环次数和/或模板DNA的用量。泳道中出现模糊条带:减少循环次数或模板DNA的用量。提高退火温度,但不要超过68℃。重新设计引物或设计更长的引物。其他值得注意的条件:建议使用0.2-ml薄壁管。厚壁管在92℃时不能有效地使模板变性。。
体外能否人工复制DNA?需要人为提供哪些条件?同题,谢谢 目前,已经可以在试管中人工复制DNA。这个体外的生化反应称为多聚酶链式反应(polymerase chain reaction,简称。
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荧光定量pcr用的离心管有什么要求?做RT-PCR的PCR管,要求比普通PCR管更高:可靠的密封性效果,低蒸发,管盖易开合.薄壁,良好的热传递效率.管壁均:-离心管,pcr,荧光,定量
【求助】为什么经常PCR会出不来呢,帮忙啊
在实验室中,做PCR通常使用的微量离心管是一种薄壁塑料管,此过程可以使用玻璃离心管吗?为什么 D