TAKARA的 T4 DNA 连接酶在室温下多久会失活 这个没有实验证明过，只知道DNA连接酶在高温不稳定，所以一般都用16℃连接过夜。25℃左右的室温估计会维持七八个小时。
最近做酶切连接，为防自连碱性磷酸酶将5‘端去磷酸化，可是T4连接酶怎么连接去磷酸化的5’端和3‘-OH端啊 据NEB M0202 T4 DNA 连接酶的产品说明：该酶催化契合的双链DNA或RNA的5'-磷酸末端和3'-羟基末端形成磷酸二酯键。该酶不仅能够催化平滑末端或粘性末端DNA之间的连接，还可以修复双链DNA、RNA或DNA/RNA杂交双链中的单链切口。也就是说载体切口两端4条链在碱性磷酸酶作用下均变成了羟基，而未被处理的目的片段每端各有一个磷酸基团和羟基，这样连接的话两端会各有一个5‘羟基和3’羟基的缺口（nick），然后T4连接酶具有修复神力，于是就呵呵了。
NEB T4DNA连接酶 最低0.27元开通文库会员，查看完整内容>；原发布者：mihoutao851124货号规格价格#M0202L100，000units3，029.00元#M0202M(高浓度5x)100，000units3，029.00元#M0202S20，000units699.00元#M0202T(高浓度5x)20，000units699.00元#M0202V10，000units349.00元■提高反应效率■粘性末端和平齐末端均可连接e69da5e887aae799bee5baa6e79fa5e9819331333433623766■限制性酶切片段的克隆（3）■将linker或adapter连接到DNA片段的平齐末端■室温或16℃均有活性概述该酶催化契合的双链DNA或RNA的5′-磷酸末端和3′-羟基末端形成磷酸二酯键。该酶不仅能够催化平滑末端或粘性末端DNA之间的连接，还可以修复双链DNA、RNA或DNA/RNA杂交双链中的单链切口(1)。来源纯化自E.coliC600pcl857pPLc28lig8(2)。反应条件1X T4 DNA 连接酶缓冲液[50mMTris-HCl（pH7.5@25℃），10mMMgCl2，10mMDTT，1mMATP]。推荐DNA5'末端浓度为0.1－1.0μM。质保声明无核酸内切酶和外切酶污染。每批T4DNA连接酶均通过模拟克隆实验进行检测，该实验可以检测出连接后DNA末端的任何损伤。结果表明超过99.9%的DNA末端保持完好。单位定义（粘性末端活性单位）1单位指在20
纺锤体出现有什么作用 在细胞分裂中，其主要作用有两个部分。其一为排列与分裂染色体。纺锤体的完整性决定了染色体分裂的正确性。纺锤体的正常生成是染色体排列的必要条件。纺锤体生成完毕后一般。
NEB常用酶介绍 最低0.27元开通文库会员，查看完整内容>；原发布者：粮院西篮球场DpnI识别2113位点在不同反应缓冲液的活性NEBuffer1.1：100%NEBuffer2.1：100%NEBuffer3.1：75%CutSmartBuffer：100%来源重组5261E.coli菌株，包含有从DiplococcuspneumoniaeG41(S.Lacks)克隆的4102DpnI基因。特性CutSmart、重组酶、省时酶。连接1653和再切经过DpnI20倍过量消化，大约25%的DNA片段能被连接，连接片段中>；95%能被再切。反应条件CutSmart缓冲液，37℃。热失活：80℃20分钟。浓度20，000units/ml。【通过pBR322DNA（dam甲基化后）鉴定】。甲基化敏感性只有当识别位点被甲基化时，DpnI才能切割。从dam+菌株纯化而来的DNA才是DpnI切割的底物。对哺乳动物基因组DNACpG甲基化敏感。NcoI识别位点在不同反应缓冲液的活性NEBuffer1.1：100%NEBuffer2.1：100%NEBuffer3.1：100%CutSmartBuffer：100%特性重组酶、省时酶。反应条件NEBuffer3.1，37℃。热失活：80℃20分钟。浓度10，000和50，000units/ml。甲基化敏感性对dam、dcm和哺乳动物CpG甲基化均不敏感。NotI识别位点在不同反应缓冲液的活性NEBuffer1.1：特性重组酶、省时酶。反应条件NEBuffer3.1，37℃。热失活：65℃20分钟。浓度10，000和50，000units/ml。甲基化敏感。
分子生物学实验中有哪些常用的软件？ 不少分子生物学试剂公司都有免费的网页小工具甚至APP，现在我个人比较常用NEB系列的。传送门 Interactive…
RNA是否有连接酶？有的话又叫什么名字？连接位点又是什么的？ 有啊，T4 RNA连接酶，很多地方有卖的。以NEB为例，有T4 RNA连接酶1和2。1可以连接单链RNA，2连接双链RNA。原理与T4 DNA ligase一样，连接酶都是催化5'3'之间的磷酸二酯键的。
T4 连接酶 TAKARA的和NEB的区别大吗 酶功能应该都是一样的，国内一般用takara的多，neb的好像价格要贵，性价比的话是takara，不差钱买neb的也行，都不错
最近做酶切连接，为防自连碱性磷酸酶将5‘端去磷酸化，可是T4连接酶怎么连接去磷酸化的5’端和3‘-OH端啊 因为T4连接酶就是催化5’P和3‘-OH没有了5’-P它怎么发挥作用啊 。
