平板菌落计数法的说明 平板菌落计数法的实验原理

比较平板菌落计数法和显微镜下直接计数法的优缺点急。微生物显微镜直接计数法随机性大，所以对菌体数量不能做出较为宏观，全面的反应.显微镜直接计数法一？平板菌落计数的原理是什么？它适用于哪些微生物的计数 原理：将待测样品经适当稀释之后，其中的微生物充分分散成单个细胞，取一定量的稀释样液涂布到平板上，经过培养，由每个单细胞生长繁殖而形成肉眼可见的菌落，即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞；统计菌落数，根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中的含菌数。适用于：通常用来测定样品中所含细菌、孢子、酵母菌等单细胞微生物的数量。微生物平板菌落计数法具体实验步骤 一、目的要2113求学习平板菌落计数的基本5261原理和方法。二、4102基本原理平板菌落计数法1653是根据微生物在固体培养基上所形成的一个菌落是由一个单细胞繁殖而成的现象进行的，也就是说一个菌落即代表一个单细胞。计数时，先将待测样品作一系列稀释，再取一定量的稀释菌液接种到培养皿中，使其均匀分布于平皿中的培养基内，经培养后，由单个细胞生长繁殖形成菌落，统计菌落数目，即可换算出样品中的含菌数。这种计数法的优点是能测出样品中的活菌数。此法常用于某些成品检定(如杀虫菌剂)，生物制品检定以及食品、水源的污染程度的检定等。但平板菌落计数法的手续较繁，而且测定值常受各种因素的影响。三、器材大肠杆菌悬液，牛肉膏蛋白胨培养基，1ml无菌吸管，无菌平皿，盛有4．5 ml无菌水的试管，试管架和记号笔等。四、操作步骤1．编号：取无菌平皿 9套，分别用记号笔标明10-4、10-5、10-6各3套。另取6支盛有4．5ml无菌水的试管，排列于试管架上，依次标明10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6。2．稀释用1ml无菌吸管精确地吸取0．5ml大肠杆菌悬液放入10-1的试管中，注意吸管尖端不要碰到液面，以免吹出时，管内液体外溢。然后仍用此吸管将管内悬液来回吸吹三次，吸时伸入管底，吹。求帮助：平板菌落计数法特点及结果分析 一般过程就是十倍倍比稀释以后倾注平板，规定条件培养。这是最常用的，只是容易混淆食物残渣。如果涂布平板的话好处就是全部长在表面，是不是残渣很清楚菌落形态也看得清楚但是只滴了一滴取样代表性差一点。另外还有点滴平板。这种菌落计数的方式只能找出能在一般培养基生长的需氧或兼性厌氧的菌。0的是没长菌么那过程肯定有问题，原因太多了，刚开始没混匀刚好没取到菌，培养基配的不对，检样开始稀释到倾注完过了太久菌已经死了，规定不能超过20分钟或者倾注平板的时候培养基太热把菌都烫死了也说不定。这种出现逆反现象的照理不能用要重做。平板菌落计数法的说明 1．操作方2113法：以无菌操作取5261检样25g（或25ml)，放于225mL灭菌生理盐水或其他稀释液4102的灭菌玻璃瓶内（瓶1653内预置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内，经充分振摇或研磨制成1：10的均匀稀释液。固体检样在加入稀释液后，最好置灭菌均质器中以8000~10000r/min的速度处理1min，制成1：10的均匀稀释液。用1ml灭菌吸管吸取1：10稀释液1ml，沿管壁徐徐注入含有9ml灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内，振摇试管混合均匀，制成1：100的稀释液。另取1ml灭菌吸管，按上项操作顺序，制10倍递增稀释液，如此每递增稀释一次即换用1支1ml灭菌吸管。2．无菌操作：操作中必须有“无菌操作”的概念，所用玻璃器皿必须是完全灭菌的，不得残留有细菌或抑菌物质。所用剪刀、镊子等器具也必须进行消毒处理。样品如果有包装，应用75%乙醇在包装开口处擦拭后取样。操作应当在超净工作台或经过消毒处理的无菌室进行。琼脂平板在工作台暴露15分钟，每个平板不得超过15个菌落。3．采样的代表性：如系固体样品，取样时不应集中一点，宜多采几个部位。固体样品必须经过均质或研磨，液体样品须经过振摇，以获得均匀稀释液。4．样品稀释误差：为减少样品稀释误差，在连续递次稀释时，每一稀释。

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