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Folin-酚法测蛋白质的原理和操作 碱性蛋白酶活力的测定溶液配制

2020-12-18知识12

为什么PH值影响酶的活力?

Folin-酚法测蛋白质的原理和操作 碱性蛋白酶活力的测定溶液配制

瑞氏吉姆萨染色原理 染色原理和结果与瑞特染色法基本相同。嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结合,染粉红色,称为嗜酸性物质;细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性,与碱性染料美蓝或天青。

Folin-酚法测蛋白质的原理和操作 碱性蛋白酶活力的测定溶液配制

做胃蛋白酶活力实验时加三氯醋酸有什么作用 仅供参考:1.1原理 福林试剂在碱性条件下可被酚类化合物还原呈蓝色反应(钼蓝和钨蓝的混合物)。由于蛋白质分子中有含酚基的氨基酸(如酪氨酸、色氨酸和苯丙氨酸等),它。

Folin-酚法测蛋白质的原理和操作 碱性蛋白酶活力的测定溶液配制

如何使用Folin-酚法测定蛋白酶的活力? 实验原理:采用Folin-酚法测定,Folin-酚试剂由甲试剂和乙试剂组成.甲试剂由碳酸钠,氢氧化钠,硫酸铜及酒石酸钾钠(KNaC4H4O6?4H2O)组成.多肽中的肽键在碱性条件下,与酒石酸钾钠铜盐溶液起作用,生成紫红色络合物.乙试剂是由磷钼酸、磷钨酸、硫酸和溴等组成.此试剂在碱性条件下,易被多肽中酪氨酸的酚基还原呈蓝色反应,其色泽深浅与多肽含量成正比[28].实验所需试剂的配置:(1)试剂甲:(A):10g Na2CO3,2g NaOH和0.25g酒石酸钾钠(KNaC4H4O6?4H2O),溶解于500mL去离子水.(B):0.5g 硫酸铜(CuSO4?5H2O)溶解于100mL 去离子水中;将50份(A)与1份(B)混合,即为试剂甲.(2)试剂乙:将Folin-酚试剂与去离子水按1:1混合.(3)标准蛋白质溶液:精确称取结晶牛血清蛋白,溶于去离子水中,浓度为250μg/mL左右.牛血清蛋白溶于水,若混浊,可改用0.9%(质量分数)NaCl溶液.(4)样品溶液:通常根据样品中蛋白含量的不同,样品在测定前需要进行适当倍数的稀释.实验步骤:(1)标准曲线的测定:取16支大试管,1支作空白,3只留作未知样品,其余试管分成两组,分别加入0,0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0 mL标准蛋白质溶液(浓度为250μg/mL).用水补足到1.0 mL,然后每支试管加入5mL试剂甲,在漩涡混合器。

胶原蛋白的理化性质 一般是白色、透明的粉状物,分子呈细长的棒状,相对分子质量从约2kD至300kD不等。胶原蛋白具有很强的延伸力,不溶于冷水、稀酸、稀碱溶液,具有良好的保水性和乳化性。。

酶活力的常用测定方法?

酶活力测定的注意事项有哪些 最低0.27元开通文库会员,查看完整内容>;原发布者:马晓晓碱性2113蛋白酶及各种蛋白酶活力测定方法及测5261定有感因长期测定碱性蛋白4102酶酶活力与角蛋白1653酶活力与胶原酶活力和弹性蛋白酶活力,碱性蛋白酶活力测定还好,因有国家标准,测定按照国标来便可大大减少误差。其余酶活力测定过程中因无统一标准且底物差异大,导致长期酶活力测定的混乱,各种酶活力测定方法与各种试剂添加,最后实际测定的酶活力只能仅作参考。以下是各种蛋白酶活力测定方法及标曲绘制:碱性蛋白酶测定方法根据国标GB/T23527-2009附录B蛋白酶活力测定福林法以下是方法碱性蛋白酶的测定方法参考GB/T23527-2009附录B中福林酚法进行,即1个酶活力单位(U/mL)定义为1mL酶液在40℃、pH=10.5条件下反应1min水解酪蛋白产生1μg酪氨酸所需要的酶量,主要步骤如下。2.2.6.1标准曲线的绘制(1)L-酪氨酸标准溶液:按表2-6配制。管号表2-6L-酪氨酸标准溶液配置表Table2-6L-Tyrosinestandardsolutionform酪氨酸标准溶液的浓度/(μg/mL)取100μg/mL酪氨酸标准溶液的体积/(mL)取水的体积/(mL)001102203304405500101928374655(2)分别取上述溶液各1.00mL,各加0.4mol/L碳酸钠溶液5.0mL,福林试剂使用液1。.

原位杂交之蛋白酶K如何配制? http://emuch.net/html/200611/346411.html|入蛋白酶 K 至终浓度 1ug/ml。轻轻混匀后,倒入专用的蒸馏器中。放置 15 分钟后,加热蒸馏,流出的就是无蛋白质残留的RNase-。

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