求 怎样用紫外分光光度法测蛋白质含量 紫外分光光度法的纯度检测

电泳法和紫外分光光度法检测DNA的浓度和纯度，哪种方法更好 两种方法各有优劣。电泳法更直观，如果你有DNA Maker，并且知道Maker的浓度，就可以使用一维条带分析软件如Quantity One分析样品中DNA的含量，而且可以很直观地了解目的DNA的纯度、大小等特性。但是，由于电泳中染色特异性很强，对DNA、RNA之外的小分子污染情况无法检测。紫外法可对样品中所有具紫外吸收特性的物质给出一个综合的结果。因此如果样品中有其他影响DNA后续操作的物质，样品吸光值就会有很大偏移。值得注意的是，紫外法仅可作为一个参考，吸光值是结果，而不是原因。吸光值符合要求并不能代表DNA纯度符合要求。一般紫外分析后还是要跑个电泳，两者结合就可靠多了。如何根据紫外线分光光度法检测的RNAA260和A280结果分析RNA浓度与纯度？ 如何根据紫外线分光光度法检测的RNAA260和A280结果分析RNA浓度与纯度，足差不多的。紫外分光光度法测溶液浓度？ 1、280nm的光吸收法用标准曲线法进行测定。标准蛋白质溶液配制的浓度为1.0 mg/mL。常用的标准蛋白质为牛血清清蛋白(BSA)。2、280 nm和260 nm的吸收差法核酸对紫外光有很强的吸收，在280 nm处的吸收比蛋白质强10倍(每克)，但核酸在260 nm处的吸收更强，其吸收高峰在260 nm附近。核酸260 nm处的消光系数是280 nm处的2倍；而蛋白质则相反，其280 nm的紫外吸收值大于260 nm的吸收值。3、215 nm与225 nm的吸收差法蛋白质的稀溶液由于含量低而不能使用280 nm的光吸收测定时，可用215nm与225 nm吸收值之差，通过标准曲线法来测定蛋白质稀溶液的浓度。4、肽键测定法蛋白质溶液在238 nm处的光吸收的强弱，与肽键的多少成正比。因此可以用标准蛋白质溶液配制一系列50～500 mg/mL已知浓度的5.0 mL蛋白质溶液，测定238 nm的光吸收值A238，以A238为纵坐标，蛋白质含量为横坐标，绘制出标准曲线。未知样品的浓度即可由标准曲线求得。扩展资料：紫外分光光度法原理光谱法（spectrometry）是基于物质与电磁辐射作用时，测量由物质内部发生量子化的能级之间的跃迁而产生的发射、吸收或散射辐射的波长和强度进行分析的方法。光谱法可分为发射光谱法、吸收光谱法、散射光谱法；或分为原子光谱法和。

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