差示紫外分光光度法? 分光光度法中,样品中被测组分浓度过大或浓度过小(吸光度过高或过低)时,测量误差均较大。为克服这种缺点而改用浓度比样品稍低或稍高的标准溶液代替空白试剂来调节仪器的。紫外分光光度法 答:A=ECL,由于没有给出测定吸光度的吸收池长度,默认为1。所以0.434=141C,由此可以得到浓度C=0.00308mol/L。所以5片中共含有0.00308*0.250*2.404/0.1502=0.0123g=12。影响紫外分光光度法测定的因素有哪些 1.仪器是否工作正2113常(光源灯老化,电压不稳定,集5261成电路板、显4102示器有毛病,波长调节器有毛病等等)16532.标准溶液浓度是否准确3.所用方法是否合理(你选用的标准方法是否符合你要测定的对象—被测定浓度范围,干扰情况,赋存状态等等)4.所用试剂是否符合要求(纯度、干扰情况)5.所用量器(天平、容量瓶、移液管等)是否存在系统误差6.配置显色过程是否误操作(加入试剂顺序、加入量等)7.显色时间、显色温度是否符合要求8.样品槽是否洁净9.测试吸光度范围是否在0.2-0.8之间除此之外,数据处理也会带来误差。最好采用标准系列法,平行多次测定,计算机程序绘图,计算机计算每侧测定结果并求出平均值,按误差理论对数据进行处理,最后给出结果。紫外分光光度法测定维生素C的含量 1 仪器与试剂UV-260紫外分光光度计,VitC对照品及VitC片(规格:50mg)均由河南某药厂提供,硫酸溶液(pH=6)。2 实验操作2.1 标准曲线的绘制 精密称取VitC对照品0.05g溶于100ml硫酸溶液,再稀释成一系列不同浓度的对照品溶液(0~14μg/ml),分别测出其吸光度。然后以浓度为横坐标,以相应的吸光度为纵坐标绘制出标准曲线。该曲线是经过原点的一条直线,可求出该曲线的斜率。2.2 样品测定 取VitC20片,精密称定,研细,精密称出适量(相当于VitC50mg),置于100ml量瓶中,加硫酸溶液溶解并稀释至刻度,滤过,精密量取续滤液2ml置于另一100ml量瓶中,加硫酸溶液稀释至刻度,测出其吸光度A 样。由标准曲线查出样品的浓度C 样品[3]。2.3 结果计算 根据精密称出的样品的质量、溶解及稀释的体积可求出C 样。VitC含量=C 样品/C 样 或VitC含量=A 样/K×C 样注:K为标准曲线的斜率。3 讨论维生素C的还原能力强而易被氧化,特别是在碱性溶液中更易被氧化。另外在碱性溶液或强酸性溶液中还能进一步发生水解。因此,选择硫酸溶液使成弱酸性。测定时溶液pH的选择:维生素C的紫外最大吸收波长与溶液的pH值有着密切关系。在pH=2.0时,溶液的最大吸收波长在245nm;在pH=12时,。紫外分光光度法的原理是什么? 紫外-可见分光光度法:是根据物质分子对波长为200-760nm这一范围的电磁波的吸收特性所建立起来的一种定性、定量和结构分析方法。操作简单、准确度高、重现性好。波长长(频率小)的光线能量小,波长短(频率大)的光线能量大。分光光度测量是关于物质分子对不同波长和特定波长处的辐射吸收程度的测量。紫外分光光度法的原理是什么?? 紫外-可见分光光度2113法:是根据物质分子对波长5261为200-760nm这一范围的电磁波的吸4102收特性1653所建立起来的一种定性、定量和结构分析方法。操作简单、准确度高、重现性好。波长长(频率小)的光线能量小,波长短(频率大)的光线能量大。分光光度测量是关于物质分子对不同波长和特定波长处的辐射吸收程度的测量。差示紫外分光光度法? 分光光度法中,样品中被测组分浓度过大或浓度过小(吸光度过高或过低)时,测量误差均较大。为克服这种缺点而改用浓度比样品稍低或稍高的标准溶液代替空白试剂来调节仪器的100%透光率(对浓溶液)或0%透光率(对稀溶液)以提高分光光度法精密度、准确度和灵敏度的方法,称为差示分光光度法。差示分光光度法又可分高吸光度差示法,低吸光度差示法,精密差示分光光度法等。示差法和一般的光度法不同之处在于,示差法不是以空白溶液(不含待测组分的溶液)作为参比溶液,而是采用比待测溶液浓度稍低的标准溶液作为参比溶液,然后测量待测溶液的吸光度,从而测出待测液的浓度,从而大大提高测定结果的准确度。A=A1-A2(Ax+Az)-(Ay+Az)Ax-Ay(Ex-Ey)CL紫外分光光度法含量计算 【1】在240nm波长处,应该选择氢光源;【2】紫外分光光度法的波长范围是:380~400 nm
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