ZKX's LAB

紫外分光光度法测细菌od值 紫外分光光度计里的OD280 OD260 OD254 OD190这几个波长在生物学里分别是测什么的

2020-07-22知识11

分光光度计是什么?用其测出的OD值又是什么 OD是optical density(光密度)的缩写,表示被检测物吸收掉的光密度,是检测方法里的专有名词,检测单位用OD值表示,OD=lg(1/trans),其中trans为检测物的透光值。光通过。紫外分光光度计如何测量细菌数目 【1】可以紫外分光法测量:OD是optical delnsity(光密度)的缩写,表示被检测物吸收掉的光密度。通常400~700nm 都是微生物测定的范围,需要紫外分光光度计测最大吸收波长。你是什么菌种?用得最多的就是505nm测菌丝菌体、560nm测酵母、600nm测细菌。用测OD方法画微生物生长曲线时,同一株菌的起始培养浓度可以准备多管(根据检测点的需要,如需检测10个点,就准备10管),然后每个点取一管出来测OD值就行了。【2】还有就是利用琼脂板涂板法:是最准确地一种,可以知道活菌的数量。可以用OD600,对琼脂板涂板法的菌落数做条曲线,以后就测OD就可以测量细菌的数目了。用紫外分光光度计测培养液中微生物的生物量,OD值会大于1吗?还有测定波长一定要设定为600nm吗? 可以有不同OD,比如660.OD值会大于1的,可以到达4,6.问题是分光光度计灵敏度有范围,高了就不准了.所以,一般超过0.8就要做稀释来测定.你查一下资料,看看你们的分光光度计灵敏度范围.求怎样用紫外分光光度法测蛋白质含量? 1、280nm的光吸收法用标准曲线法进行测定。标准蛋白质溶液配制的浓度为1.0 mg/mL。常用的标准蛋白质为牛血清清蛋白(BSA)。2、280 nm和260 nm的吸收差法核酸对紫外光有很强的吸收,在280 nm处的吸收比蛋白质强10倍(每克),但核酸在260 nm处的吸收更强,其吸收高峰在260 nm附近。核酸260 nm处的消光系数是280 nm处的2倍;而蛋白质则相反,其280 nm的紫外吸收值大于260 nm的吸收值。3、215 nm与225 nm的吸收差法蛋白质的稀溶液由于含量低而不能使用280 nm的光吸收测定时,可用215nm与225 nm吸收值之差,通过标准曲线法来测定蛋白质稀溶液的浓度。4、肽键测定法蛋白质溶液在238 nm处的光吸收的强弱,与肽键的多少成正比。因此可以用标准蛋白质溶液配制一系列50~500 mg/mL已知浓度的5.0 mL蛋白质溶液,测定238 nm的光吸收值A238,以A238为纵坐标,蛋白质含量为横坐标,绘制出标准曲线。未知样品的浓度即可由标准曲线求得。扩展资料:紫外分光光度法原理光谱法(spectrometry)是基于物质与电磁辐射作用时,测量由物质内部发生量子化的能级之间的跃迁而产生的发射、吸收或散射辐射的波长和强度进行分析的方法。光谱法可分为发射光谱法、吸收光谱法、散射光谱法;或分为原子光谱法和。

#分光光度法#紫外可见吸收光谱法#细菌#蛋白质#蛋白质结构

随机阅读

qrcode
访问手机版