测定蛋白质中氨基酸含量的主要步骤有哪些？为什么一般分析报告显示17种氨基酸成分？ 一般来说人体必须的17种氨基酸，也较为重视氨基酸的定性测定一、氨基酸的一般显色反应本节介绍三种显色反应：茚三酮法、吲哚醌法和邻苯二甲醛法。前二种是经典的常用显色法，后一种是近年来发展起来的荧光显色法，具有灵敏度高的特点。1.茚三酮法显色方法有下列数种：①常用法：将点有样品的层析或电泳完毕的滤纸充分除尽溶剂，用 5g/L 茚三酮无水丙酮溶液喷雾，充分吹干，置65℃烘箱中约30min（温度不宜过高，避免空气中氨，以免背景泛红色），氨基酸斑点呈紫红色。为了使各种氨基酸呈现不同颜色，可用下列方法：②用 0.4g 茚三酮，10g 酚和90g 正丁醇的混合液显色。③用 1g/L 茚三酮无水丙酮溶液显色完毕后，再用盐酸蒸汽熏1min。④用 1g 茚三酮，600mL 无水乙醇，200mL 冰醋酸及80mL2，4，6-三甲基吡啶混合液80℃染色5～10min。为了使显色稳定，可用下列方法：⑤配制含醋酸镉 2g 加蒸馏水200mL 及冰醋酸40mL 的贮存液。将上述贮存液加200mL丙酮及2g 茚三酮，即为显色液。点有样品的滤纸上浸有此显色液后，放置于盛有一小杯浓硫酸的密闭玻璃容器中，25℃，18h，或较高温度下适当缩短时间。背景色浅，氨基酸斑点也比较稳定。⑥用含 2g/LCoCl2(或CuSO4)。
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