紫外分光光度法鉴定rna 影响紫外分光光度法测定准确性的因素有哪些

紫外分光光度法与可见分光光度法有何异同 1、测量的范围不同：（1）紫外分光光度计量程为200nm~600nm间，其中包括部分可见光。（2）可见分光光度计量程为320nm-1100nm，能满足不同物质的测试。2、所用的灯不同：（1）紫外分光光度计通常用氢灯或氘灯。（2）可见分光光度计通常采用钨灯或卤钨灯。3、原理不同：（1）紫外分光光度计根据物质的吸收光谱研究物质的成分，是结构和物质间相互作用的有效手段。（2）可见分光光度计采用低杂散光，高分辨率的单光束单色器，保证了波长准确度、波长重复性和更高的分辨率。扩展资料紫外分光光度计的工作原理：物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量，相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同。因此，每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线，可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量，这就是分光光度定性和定量分析的基础。分光光度分析就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。又因为许多物质在紫外-可见光区有特征吸收峰，所以可用紫外分光。紫外分光光度法与可见分光光度法有何异同 回答：其区别在于波长范围不同。紫外线的波长比可见光的波长小？补充：1.分光光度法是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定量。紫外分光光度法的原理是什么？？ 紫外-可见分光光度2113法：是根据物质分子对波长5261为200-760nm这一范围的电磁波的吸4102收特性1653所建立起来的一种定性、定量和结构分析方法。操作简单、准确度高、重现性好。波长长（频率小）的光线能量小，波长短（频率大）的光线能量大。分光光度测量是关于物质分子对不同波长和特定波长处的辐射吸收程度的测量。紫外分光光度法 在实际测量中，采用在另2113一等同的吸收5261池中放入溶剂与被分4102析溶液的透射强度进行比1653较，即：A=lg(I溶剂/I溶液)≈lg(I 0/I)吸光度具有加和性：A总λ=A1λ+A2λ+…Anλ比尔定律应用的局限性：只适用于稀溶液、化学偏离、仪器偏离Page 84.2 紫外一可见分光光度计Page 91.光源功能：提供能量激发被测物质分子，使之产生电子光谱谱带（提供宽带辐射）。连续光源：广泛应用在吸收和荧光光谱中(气体放电光源)氘灯、氢灯紫外可见氩灯真空紫外氙灯真空紫外、紫外、可见(热辐射光源)钨丝灯、卤钨灯可见光区Page 102.单色器功能：从光源辐射的复合光中分出单色光。3.吸收池功能：盛放分析试样（一般是液体）Page 114.检测器功能：检测光信号，测量单色光透过溶液后光强度变化的一种装置。5.信号显示系统Page 126.紫外一可见分光光度计的类型(1)单波长单光束分光光度计缺点：测量结果受电源波动的影响较大，误差较大。Page 13(2)单波长双光束分光光度计优点：除了能自动扫描吸收光谱外，还可自动消除电源电压波动的影响，减小放大器增益的漂移。Page 14(3)双波长分光光度计优点：在有背景干扰或共存组分的吸收干扰的情况下，可以对某组分进行定量测定。。紫外分光光度法 答：A=ECL，由于没有给出测定吸光度的吸收池长度，默认为1。所以0.434＝141C，由此可以得到浓度C＝0.00308mol/L。所以5片中共含有0.00308*0.250*2.404/0.1502＝0.0123g＝12。最低0.27元开通文库会员，查看完整内容>；原发布者：记忆_染成画紫外分光光度计的使用原理和方法紫外-可见分光光度法(ultraviolet-visiblespectrophotometry，UV-VIS)1定义：它是利用物质的分子或离子对某一波长范围的光的吸收作用，对物质进行定性分析、定量分析及结构分析，所依据的光谱是分子或离子吸收入射光中特定波长的光而产生的吸收光谱。2分类：按所吸收光的波长区域不同：分为紫外分光光度法和可见分光光度法，合称为紫外-可见分光光度法。3、紫外-可见分光光度法的特点：（1)其仪器设备和操作都比较简单，费用少，分析速度快；（与其它光谱分析方法相比）（2）灵敏度高；（3）选择性好；（4）精密度和准确度较高；（5）用途广泛。1.紫外-可见吸收光谱1.物质对光的选择性吸收物质对光的吸收是选择性的，利用被测物质对某波长的光的吸收来了解物质的特性，这就是光谱法的基础。通过测定被测物质对不同波长的光的吸收强度（吸光度），以波长为横坐标，吸光度为纵坐标作图，得出该物质在测定波长范围的吸收曲线。在吸收曲线中，通常选用最大吸收波长λmax进行物质含量的测定。2.有机化合物的紫外-可见吸收光谱2.1有机化合物的电子跃迁与紫外-可见吸收光谱有关的电子有三种，即。如何用紫外吸收法测定DNA含量？ 紫外吸收法测定DNA含量，组成核酸分子的碱基，均具有一定的吸收紫外线特性，最大吸收值在波长为250~270nm之间。核酸的最大吸收波长是260nm，这个物理特性为测定核酸溶液浓度提供了基础。在波长260nm紫外线下，1OD值的光密度相当于双链DNA浓度为50μg/ml；单链DNA或RNA为20μg/ml。可以次来计算核酸样品的浓度。分光光度法不但能确定核酸的浓度，还可通过测定在260nm和280nm的紫外线吸收值的比值(A260/A280)估计核酸的纯度。DNA的比值为1.8，RNA的比值为2.0。若DNA比值高于1.8，说明制剂中RNA尚未除尽。RNA、DNA溶液中含有酚和蛋白质将导致比值降低。270nm存在高吸收表明有酚的干扰。当然也会出现既含蛋白质又含RNA的DNA溶液比值为1.8的情况，所以有必要结合凝胶电泳等方法鉴定有无RNA。或用测定蛋白质的方法检测是否存在蛋白质。紫外分光光度法只用于测定浓度大于0.25μg/ml的核酸溶液。对于很稀的溶液可采用荧光光度法。生物帮上面有相关的方法步骤的，大脑模型 http：//product.bio1000.com/100057/紫外分光光度法优缺点 优点是1灵敏度高2仪器设备简单，操作简便、快速3应用广泛缺点是准确度相对不高影响紫外分光光度法测定准确性的因素有哪些 1.仪器是否工作正常（光源灯老化，电压不稳定，集成电路板、显示器有来毛病，波长调节器有毛病等等）2.标准溶液浓度是否准确3.所用方法是否合理（你选用的标准方法是否符合你要测定的对象—被测定浓度范围，干扰情况，赋存状态等等）4.所用试剂是否符合要求（纯度、干扰情况）5.所用量器（天平、容量瓶、移液管等）是否存在系统误差6.配置显色过程是否误操作（加入试剂顺序、加入量等）7.显色时间源、显色温度是否符合要求8.样品槽是否洁净9.测试吸光度范围是否在0.2-0.8之间除此之外，数据处理也会带来误差。最好采用标准系列法，平行多次测定，计算机程序绘图，计算机计算每侧测定结果并求出平均值，按误差理论对数据进行处理，最后给出结果。zd

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