用磷酸苯二钠法测定磷酸酶活性，显色剂是氯代二溴对苯醌亚胺，求一个重蒸酚的标准曲线，谢谢 钙调磷酸酶活性定磷比色法

用磷酸苯二钠比色法测土壤磷酸酶活性的问题我用磷酸苯二钠比色法测定磷酸酶，为什么做标准曲线的时候不显色.我是严格按照关松殷1986年的专著上写的做的……酚原液是5天前提前配好的.其他都是现配的.用的是柠檬酸盐缓冲液PH=6.6 磷酸苯二钠比色法具体怎么操作？ 土壤酶活性的测定方法土壤酶活性的测定：酸性磷酸酶采用磷酸苯二钠比色法测定；过氧化氢酶活性采用KMnO4滴定；脲酶采用扩散滴定法测定；蛋白酶活性采用茚三酮比色法测定；转化酶活性以0.1N的Na2S2O3滴定法测定；脱氢酶活性采用三苯基甲比色法[4-5]希望能帮到您O(∩_∩)O~谁能告诉我，怎样用对-硝基苯磷酸盐（即PNPP）法测定碱性磷酸酶（ALP）活性？ 【步骤】（1）用吸管吸掉96孔板内的培养液，用PBS冲洗3遍，加入含25mmol/L二乙醇胺，1mmol/L氯化镁和6.7mmol/L PNPP的反应液。（2）每孔150ul.37℃避光放置半小时，然后加0.1mol/L氢氧化钠100ul终止反应，用酶标仪于405nm波长下测定OD值.（3）样品OD值在ALP标准曲线上读取酶活性值(U/L).ALP标准曲线绘制：取PNP0.0111克用三蒸水溶解后稀释至250ml，此时PNP的浓度为320umol/L.依次稀释到160 umol/L，80umol/L，40umol/L，20umol/L，10umol/L和5mol/L.相当于ALP1280 U/L，640U/L，320U/L，160U/L，80U/L，40U/L和20U/L(活性值).用酶标仪于405nm波长下测定PNP的OD值.以ALP活性值作为自变量，对应的OD值作为应变量，求得直线回归方程.【结果】测定碱性磷酸酶的含量还有其他方法来测定，比如以ALP为目标物的检测方法有1 Gomori钙钴法2偶氮偶联法3碱性磷酸酶染色试剂盒法。4.PNPP偶氮法5.BCIP/NBT比色法6 茜素红法7.von Kossa法

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