如何用紫外分光光度计测DNA浓度 紫外分光光度法测苯酚浓度

紫外分光光度测定水中苯酚的含量数据怎么处理 苯酚含有苯环，具有由π→π*跃迁产生的三个特征吸收谱带。由于-oh的取代，吸收峰红移。从而使π*轨道的能量降低。首先在文献上查的苯酚的紫外吸收光谱数据，找出苯酚的入max并根据公式lg a=lg k+lg bc与其相对应的吸光度的比值，与所查数据进行对照，进行入max及吸光度比值比较，看其是否一致。【仪器与试剂】苯酚能用紫外可见分光光度计在波长为300nm测吸光度吗 苯酚在紫外光区的最大吸收波长λmax为270nm，所以你要在300测吸光度也能测出来，但不是吸收的最大值.紫外光谱是一个吸收谱带，而不是谱线，所以在哪个波长（紫外区）都是能测出一个数值的.但如果要定量分析就得在270测定了，否则误差太大.DNA或RNA样品不纯，用紫外分光光度计测定其浓度和纯度的准确性会受到影响，为什么？ 分光光度计分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸，蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。核酸的定量是分光光度计使用频率最高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸，单链、双链DNA，以及RNA。核酸在波长 260 nm处有最高吸收峰。吸收紫外光的性质是嘌呤环和嘧啶环的共轭双键系统所具有的，所以嘌呤和嘧啶以及一切含有它们的物质，不论是核苷、核苷酸或核酸都有吸收紫外光的特性。但紫外法不能区分DNA和RNA，只能用来鉴定核酸的纯度和含量。蛋白质由于含有芳香氨基酸，因此也能吸收紫外光。通常蛋白质的吸收高峰在280nm波长处，在260nm处的吸收值公为核酸的十分之一或更低，故核酸样品中蛋白质含量较低时对核酸的紫外测定影响不大。RNA的260nm与280nm吸收的比值在2.0以上；DNA的260nm与280nm吸收的比值则在1.9左右。当样品中蛋白质含量较高时比值即下降。分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源，通过系列分光装置，从而产生特定波长的光源，光源透过测试的样品后，部分光源被吸收，计算样品的吸光值，从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。核酸的定量DNA和RNA都有吸收紫外光的性质，它们的吸收高峰在260nm波长处，每种核酸。苯酚硫酸法可以用紫外分光光度计测吗 可以，比如测定枸杞、山药等得多糖含量就是用的苯酚-硫酸比色法如何用紫外分光光度计测DNA浓度 首先，分光光度计测量2113的样品必须5261是均一的，摇匀后再测量结果会准确些。4102它是利用分光1653光度法对物质进行定量定性分析的仪器。核酸的定量是分光光度计使用频率最高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸，单链、双链DNA，以及RNA。核酸的最高吸收峰的吸收波长260 nm。每种核酸的分子构成不一，因此其换算系数不同。定量不同类型的核酸，事先要选择对应的系数。如：1OD 的吸光值分别相当于50μg/ml的dsDNA，37μg/ml的ssDNA，40μg/ml的RNA，30μg/ml的Olig。测试后的吸光值经过上述系数的换算，从而得出相应的样品浓度。测试前，选择正确的程序，输入原液和稀释液的体积，尔后测试空白液和样品液。然而，实验并非一帆风顺。读数不稳定可能是实验者最头痛的问题。灵敏度越高的仪器，表现出的吸光值漂移越大。事实上，分光光度计的设计原理和工作原理，允许吸光值在一定范围内变化，即仪器有一定的准确度和精确度。如Eppendorf Biophotometer的准确度≤1.0%（1A）。这样多次测试的结果在均值1.0%左右之间变动，都是正常的。另外，还需考虑核酸本身物化性质和溶解核酸的缓冲液的pH值，离子浓度等：在测试时，离子浓度太高，也会导致读数漂移，因此建议使用。测定苯酚的方法？ 酸碱反应苯酚属于酚类物质，有弱酸性，能与碱反应：PhOH+NaOH→PhONa+H2O。苯酚pKa=1.28×10-10，酸性介于碳zd酸两级电离之间，因此苯酚不能与NaHCO3等弱碱反应：PhOˉ+CO2+H2O→PhOH+HCO3ˉ。此反应现象：二氧化碳通入后，溶液中出现白色混浊回。显色反答应苯酚遇三氯化铁溶液显紫色，原因是苯酚根离子与Fe形成了有颜色的配合物。6PhOH+FeCl3→H3[Fe(OPh)6]（紫色）+3HCl。紫外-可见分光光度法测定 如何用紫外分光光度计，测量水中二甲苯的浓度（步骤）？ 没说样品浓度范围，以下浓度都省去。1 取样品液，溶于一百毫升容量瓶中。用移液管取10毫升，定容稀释到100毫升容量瓶（要不要稀释看具体样品浓度）。2 配置一系列标准二甲苯浓度梯度溶液5份（比如0，0.5，1.0，1.5，2.0，2.5mg/L视样品浓度度而定）在相同条件下测定吸光度，作标准曲线得线性方程。3 测定未知样品吸光度，平行测定三次，带入线性方程，得浓度；按稀释关系换算后得样品浓度。紫外分光光度法与可见分光光度法有何异同 1、测量的范围不同：（1）紫外分光光度计量程为200nm~600nm间，其中包括部分可见光。（2）可见分光光度计量程为320nm-1100nm，能满足不同物质的测试。2、所用的灯不同：（1）紫外分光光度计通常用氢灯或氘灯。（2）可见分光光度计通常采用钨灯或卤钨灯。3、原理不同：（1）紫外分光光度计根据物质的吸收光谱研究物质的成分，是结构和物质间相互作用的有效手段。（2）可见分光光度计采用低杂散光，高分辨率的单光束单色器，保证了波长准确度、波长重复性和更高的分辨率。扩展资料紫外分光光度计的工作原理：物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量，相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同。因此，每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线，可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量，这就是分光光度定性和定量分析的基础。分光光度分析就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。又因为许多物质在紫外-可见光区有特征吸收峰，所以可用紫外分光。

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