紫外可见分光光度计定性原理是什么？ 紫外可见分光光度计 原理

使用紫外可见分光光度计测蛋白质结构的原理是什么？如果出现负值是什么原因呢？(PS：已测过基线) 紫外可见分光光度计测定的是蛋白浓度，X射线晶体衍射测的才是蛋白质结构.紫外分光光度计测蛋白浓度原理：组成蛋白质的氨基酸里，有三种氨基酸：苯丙氨酸，酪氨酸，色氨酸具有苯环的共轭结构，它们对特定波长的紫外线具有吸收光谱，也就是说：它们对紫外线是有颜色的.每种蛋白质根据苯环的数量和分布都有一定的吸收强度，总的吸收值和分子的浓度呈正比.根据蛋白质溶液对280nm紫外线的吸收强度，可以测定出蛋白质的浓度.X射线晶体衍射测蛋白结构原理：蛋白质的肽链不是杂乱无章的，按照一定的规则盘曲成了特定的形状(蛋白质高级结构)，每个碳-碳键都有它特定的构象，这种特定的结构是蛋白质作为分子机器的基础.结晶的蛋白质中，分子排成了空间重复的有序的结构，而原子之间的间隙与X射线的波长类似，构成了X射线的衍射光栅.当用X射线照射这种重复性的天然光栅时，通过波的衍射形成了有规则的干涉条纹，分析这些条纹就可以解析出蛋白质分子中每个原子的位置.可见分光光度计与紫外分光光度计有什么区别？以及各种部件的区别？ 可见分光光度计的波长适用范围一般从350nm左右开始到1100nm左右，紫外可见分光光度计的波长适用范围一般从190nm到1100nm。从这点区别上看就是波长的适用范围不一样，紫外可见分光光度计多了从190到350nm左右这段波长。正式由于这段紫外光的区别，就决定了他们的仪器结构部件有一些不同了，他们的不同之处主要在于以下几个地方：1、光源不同：可见分光光度计的光源一般只用钨灯，而紫外可见分光光度计是用钨灯 氘灯两个光源，同时还多了这两个光源灯的切换部件。这是因为钨灯的光谱范围主要在可见到近红外这段，氘灯主要在紫外端。也正是因为光源的不一样，紫外可见分光光度计也多了一个专门提供氘灯工作的氘灯电源了。2、光学器件的不同：由于玻璃能吸收紫外波，而对可见到近红外端有比较好的透过性，所以可见分光光度计的一些光学部件可以使用玻璃，而紫外可见分光光度计就不能使用玻璃部件，一般使用石英光学部件。同时由于这个原因，在比色皿的选择上也就有不同了，可见分光光度计可以使用玻璃制的比色皿，而紫外可见分光光度计一般使用石英制的比色皿了。3、接收器的不同：由于紫外可见分光光度计多了紫外波，所以在接收器的选择上也就不一样了。多了对紫外波的。紫外-可见光分光光度计 原理，基本构造，使用方法，注意事项及应用 一、分光光度计的基本工作原理随着现代科技的不断发展和进步，现代分光光度法的测试手段和方法都在不断改进，但最根本的依据仍然建立在朗伯-比尔定律的基础之上。A=KLC式中：A-为被测物在给定波长的需光吸光度值K-为一系数，称为溶液的吸收系数（与入射光波长及被测物质的特性有关）L-为被测物质的厚度（一般与比色池的厚度有关）C-为被测物质的浓度由上式可以看出，被测物质对单色光的吸光度与被测物质的浓度成正比。实际测试时，单色光通过被测物质达到光电接收器，由光电倍增管或光电池转换成光电流，而光电流的强弱决定了吸光度值A的大小。假定通过参比样品的光电流为I。而通过待测样品的光电流为I，则两者之比设定为τ，也称透射比（或以T%表示，称为透过率）。则：τ=I/I。100%朗伯-比尔定律的贡献就是发现了透射比的负对数值（也就是吸光度A）的变化与物质的浓度的变化呈正比关系。即：A=-lgτ或lg（I/I。KCL同时，不同的物质对不同波长的单色光呈现出不同的吸光度值，这一变化特征也就是分光光度法用于物质的定性定量分析的理论基础。基于上述原理，你可以知道无论以往的仪器还是现代的仪器，其最基本的工作要求就是为了能准确获得物质（或称样品）。紫外可见分光光度计的主要操作原理是什么？ 透明液体的颜色由所吸收（透过）的光的波长和吸收量的不同而显示不同的颜色和深度，通过检测一定厚度该溶液的吸收波长和吸收量，可以判断溶液中电解质的种类和浓度。紫外可见分光光度计可以在可见光和紫外光光谱之间工作，发射器定强度、定波长发射出的光线在通过等厚度的玻璃皿后，接收器所接收到的强度会有所减弱，通过计算减弱的比例，可以判定溶液的浓度；而通过连续波谱吸收扫描可以大致判断玻璃皿中的溶液的最大特征吸收波长，从而大致判断溶液中可能含有的物质的特征。紫外可见分光光度计定性原理是什么？ 紫外可见分光光度计定性原理 由于不同的物质对不同波长光有不同的吸收度，其吸收曲线形状和最大吸收波长λmax不同；但同一种物质即使浓度不同，其吸收曲线形状仍相λmax。紫外分光光度计与紫外可见分光光度计的区别是什么？ 紫外分光光度计与紫外可见分光光度计的区别：1、测量的范围不同：（1）紫外分光光度计量程为200nm~600nm间（包括部分可见光）。（2）紫外可见分光光度计量程为200nm~1000nm。2、所用灯不同：（1）紫外光区通常用氢灯或氘灯。（2）见光区通常用钨灯或卤钨灯。3、原理不同：（1）紫外分光光度计，就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。（2）紫外-可见分光光度计是基于紫外可见分光光度法原理，利用物质分子对紫外可见光谱区的辐射吸收来进行分析的一种分析仪器。扩展资料紫外-可见分光光度计的结构与功能：由光源、单色器、吸收池、检测器和信号显示系统五大部分组成。（1）光源：是提供符合要求的入射光的装置，有热辐射光源和气体放电光源两类。热辐射光源用于可见光区，一般为钨灯和卤钨灯，波长范围是350~1000nm；气体放电光源用于紫外光区，一般为氢灯和氘灯，连续波长范围是180~360nm。（2）单色器：功能是将光源产生的复合光分解为单色光和分出所需的单色光束，它是分光光度计的心脏部分。（3）吸收池：又称比色皿，供盛放试液进行吸光度测量之用，其底及两侧为毛玻璃，另两面为光学透光面，为减少光的反射损失，吸收。

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