酶分离纯化过程中需要注意什么问题？为什么进行酶活力、酶比活力的测定 最低0.27元开通文库会员，查看完整内容>；原发布者：a995853256ppt制作：朱杰明ppt讲解：尹聪翔资料查找：陈荣威目酶的分离与纯化酶在分离纯化中应注意的问题酶活力录酶比活力酶活回收率酶比活力提高比酶的提取、分离纯化技术路线细胞破碎动物、植物或微生物细胞酶提取酶分离纯化酶浓缩酶贮存离心分离，过滤分离，沉淀分离，层析分离，电泳分离，萃取分离，结晶分离等。根据酶提取时，所采用的溶剂或溶液的不同，酶抽提的方法主要有盐溶液提取，酸溶液提取，碱溶液提取，有机溶剂提取等。1.盐溶液提取：大多数酶在一定浓度的盐存在条件下，酶的溶解度增加，即盐溶，但盐浓度不能太高，否则溶解度反而降低，即盐析。故：一般采用稀盐溶液进行酶的提取，盐浓度控制在0.020.5mol/L。如淀粉酶、蛋白酶等胞外酶0.14mol/l氯化钠溶液提取。2.酸溶液提取：有些酶在酸性条件下溶解度比较大，且稳定性好，宜用酸溶液提取。提取时需注意溶液的pH不能太低，以免酶变性失活。如胰蛋白酶可用0.12mol/l硫酸溶液提取。3.碱性溶液提取：有些酶在碱性条件下溶解度较大，且稳定性较好，宜用碱溶液提取，操作时注意pH不能过高，以免影响酶活，同时加碱液时要一边搅拌一边缓慢加进，避免局部过碱而。
蛋白质的酸碱性苏教版课本说：“蛋白质分离纯化过程中酸性蛋白可以用稀碱性溶液抽提”我想查一下什么叫酸性蛋白，有人说等电点偏酸性的为酸性蛋白，举例为胃蛋白酶，但我查了一下胃蛋白酶等电点8.1，偏碱性呀，到底咋回事？
论酶的分离与纯化的常见方法
哪位高手能告诉我，在PCR产物纯化中，蛋白酶K 的作用是什么，以及其原理 感激不尽啊！！！！！！ 觉得应该是灭活Taq酶的，这2113个原5261理应该是比较清楚的，不赘述了4102。用EDTA的话，EDTA是广谱的螯合剂1653，可以和金属离子结合。在配制PCR的反应物时都会加入镁盐，因为镁是Taq所必须的，EDTA掠夺镁离子，也可以起到灭活Taq酶的作用。
酶的纯化有哪些方法？ 酶是蛋白质，因此凡用于蛋白质的纯化手段均适用于酶的纯化，如盐析法、聚乙二醇沉淀法、有机浴剂分级沉淀法、等电点法、选择性沉淀法、各种柱层析法（吸附层析、离子交换。
