紫外可分光光度法用于含量测定的方法一般有_____、______和_____ 对照品比较法、吸收系数法、比色法祝学习愉快~紫外分光光度法测溶液浓度? 1、280nm的光吸收法用标准曲线法进行测定。标准蛋白质溶液配制的浓度为1.0 mg/mL。常用的标准蛋白质为牛血清清蛋白(BSA)。2、280 nm和260 nm的吸收差法核酸对紫外光有很强的吸收,在280 nm处的吸收比蛋白质强10倍(每克),但核酸在260 nm处的吸收更强,其吸收高峰在260 nm附近。核酸260 nm处的消光系数是280 nm处的2倍;而蛋白质则相反,其280 nm的紫外吸收值大于260 nm的吸收值。3、215 nm与225 nm的吸收差法蛋白质的稀溶液由于含量低而不能使用280 nm的光吸收测定时,可用215nm与225 nm吸收值之差,通过标准曲线法来测定蛋白质稀溶液的浓度。4、肽键测定法蛋白质溶液在238 nm处的光吸收的强弱,与肽键的多少成正比。因此可以用标准蛋白质溶液配制一系列50~500 mg/mL已知浓度的5.0 mL蛋白质溶液,测定238 nm的光吸收值A238,以A238为纵坐标,蛋白质含量为横坐标,绘制出标准曲线。未知样品的浓度即可由标准曲线求得。扩展资料:紫外分光光度法原理光谱法(spectrometry)是基于物质与电磁辐射作用时,测量由物质内部发生量子化的能级之间的跃迁而产生的发射、吸收或散射辐射的波长和强度进行分析的方法。光谱法可分为发射光谱法、吸收光谱法、散射光谱法;或分为原子光谱法和。紫外分光光度法怎么计算,维生素C 的含量 先用标准溶液做标定曲线,然后再测未知溶液的吸收,对应到曲线上就行了紫外分光光度法 答:A=ECL,由于没有给出测定吸光度的吸收池长度,默认为1。所以0.434=141C,由此可以得到浓度C=0.00308mol/L。所以5片中共含有0.00308*0.250*2.404/0.1502=0.0123g=12。紫外分光光度法,喹乙醇含量测定的计算公式,怎么计算? A=-log(I/I.)=-lgT=kLc 式中:A 为吸收度;I.为入射的单色光强度;I 为透射的单色光强度;T 为物质的透射比;k 为吸收系数;L 为被分析物质的光程 c 为物质的浓度测定A,然后带入计算公式计算求 怎样用紫外分光光度法测蛋白质含量 1、280nm的光吸收法用标准曲线法进行测定。标准蛋白质溶液配制的浓度为1.0 mg/mL。常用的标准蛋白质为牛血清清蛋白(BSA)。2、280 nm和260 nm的吸收差法核酸对紫外光有很强的吸收,在280 nm处的吸收比蛋白质强10倍(每克),但核酸在260 nm处的吸收更强,其吸收高峰在260 nm附近。核酸260 nm处的消光系数是280 nm处的2倍;而蛋白质则相反,其280 nm的紫外吸收值大于260 nm的吸收值。3、215 nm与225 nm的吸收差法蛋白质的稀溶液由于含量低而不能使用280 nm的光吸收测定时,可用215nm与225 nm吸收值之差,通过标准曲线法来测定蛋白质稀溶液的浓度。4、肽键测定法蛋白质溶液在238 nm处的光吸收的强弱,与肽键的多少成正比。因此可以用标准蛋白质溶液配制一系列50~500 mg/mL已知浓度的5.0 mL蛋白质溶液,测定238 nm的光吸收值A238,以A238为纵坐标,蛋白质含量为横坐标,绘制出标准曲线。未知样品的浓度即可由标准曲线求得。扩展资料:紫外分光光度法原理光谱法(spectrometry)是基于物质与电磁辐射作用时,测量由物质内部发生量子化的能级之间的跃迁而产生的发射、吸收或散射辐射的波长和强度进行分析的方法。光谱法可分为发射光谱法、吸收光谱法、散射光谱法;或。紫外分光光度法怎么计算、维生素C 的含量 1.购买VC标准品,配制一系列一定浓度(被测试浓度左右)的标准溶液,测试它们的吸光度/透光率;2.将所得的数据计算得到一条标准曲线,可以通过EXCEL直接拟合;3.测试仪待测VC样品,通过标准曲线计算样品VC浓度.紫外可见分光光度计怎么由吸光度计算含量? 根据朗伯比尔定律得出:当一束平行单色光通过一定液层厚度的有色溶液时,由于溶质吸收了光能,光的强度就会减弱。溶液浓度越大,液层越厚,入射光越强,光被吸e5a48de588b6e799bee5baa631333431336161收的就越多。如果用公式表示的话,就可以表示为表示为:A=E*C*L(A为吸光度,C为溶液浓度,L为液层厚度)。E是物质在一定波长下的特征常数,与对光吸收的灵敏度呈正相关。该公式适用于有色溶液和均匀非散射的吸光物质(如:固、液、气)。在进行含量测定的时候,我们往往选择被测物质的最大吸收波长来作为使用波长,以防止外界干扰。于是,我们可以根据公式可以计算测定管中物质的含量,过程如下:A1=E1*C1*L1 A2=E2*C2*L2A1/(E1*C1)=A2/(E2*C2)由于标准液和待测液中的物质相同,故E1=E2∴C2=(A2/A1)*C1因为标准液和待测液的体积相等,物质含量m=C*V*M(M为相对分子质量,V为体积)故m2=(A2/A1)*m1所以溶液中物质的含量m2。扩展资料:在分光光度分析中,比尔定律是一个有限的定律,其成立条件是待测物为均一的稀溶液、气体等,无溶质、溶剂及悬浊物引起的散射;入射光为单色平行光。导致偏离朗伯-比尔定律的原因很多,但基本上可分为物理和化学两个方面。物理。紫外_可见分光光度法,用吸收系数法定量,公式是什么? A=ECL C=A/ELA为吸收度;T为透2113光率;E为吸收系数,采用的表5261示方法是(E1%1cm),其物理4102意义为当溶液1653浓度为1%(g/ml),液层厚度为1cm时的吸收度数值;C为100ml溶液中所含被测物质的重量(按干燥品或无水物计算),g;L为液层厚度,cm。紫外-可见分光光度法是在190~800nm波长范围内测定物质的吸光度,用于鉴别、杂质检查和定量测定的方法。当光穿过被测物质溶液时,物质对光的吸收程度随光的波长不同而变化。因此,通过测定物质在不同波长处的吸光度,并绘制其吸光度与波长的关系图即得被测物质的吸收光谱。从吸收光谱中,可以确定最大吸收波长λmax和最小吸收波长λmin。物质的吸收光谱具有与其结构相关的特征性。因此,可以通过特定波长范围内样品的光谱与对照光谱或对照品光谱的比较,或通过确定最大吸收波长,或通过测量两个特定波长处的吸收比值而鉴别物质。用于定量时,在最大吸收波长处测量一定浓度样品溶液的吸光度,并与一定浓度的对照溶液的吸光度进行比较或采用吸收系数法求算出样品溶液的浓度。原理可见光、紫外线照射某些物质,主要是由于物质分子中价电子能级跃迁对辐射的吸收,而产生化合物的可见紫外吸收光谱。基于物质对光的选择。
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